研究課題
本研究では、卵子とES細胞に着目し卵子の質がES細胞へ影響を与えるか解析し解明していくことで卵子の本質をとらえていく。卵子の質に影響を与える生物学的現象として加齢を対象として、加齢マウス由来の卵子から受精卵を作成しES細胞を作成した。前実験として、加齢雌マウスでは自然交配により受精卵を得ることができなかったため顕微授精(ICSI)法により受精卵を得た。定量PCRにより未分化マーカー(Oct4, Sox2, Nanog)で免疫組織抗体法によるタンパク質レベルでの解析でも発現が認められた。多分化能解析では、免疫不全マウス(Nu/Nu)の皮下移植により得られた腫瘤で外胚葉、中胚葉そして内胚葉組織への分化を確認した。体外培養系では未分化維持因子LIFを除去した培地による胚様体(EB)作成による分化動態を解析すると中胚葉系組織への分化指向性が対象ES細胞と比し有意に効率であった。ES細胞のDNAマイクロアレイによる網羅的遺伝子発現解析を行ったところ、対象グループと明確にグループ分けされることが主成分分析により示された。バイオインフォマティックス解析により対象グループに比し細胞外マトリックス及び細胞間接着系に関連する遺伝子群の発現が有意に低下していることを見出した。Nrp1, Spon2, Pcdhb20やPcdha6のような接着関連遺伝子の発現が減少していた。今後は、細胞間接着や細胞外マトリックス組織の脆弱性が加齢とどのような関連性があるか、遺伝子発現やまた分化の偏りと卵子の加齢についての関連性を解析していく。
すべて 2009
すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (2件)
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