難聴症例のミトコンドリア遺伝子変異の網羅的解析法確立と内耳細胞内の変異定量解析

2013 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21390459
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 喜多村 健 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (90010470)
• 研究分担者: 木村 百合香 地方独立行政法人東京都健康長寿医療センター(東京都健康長寿医療センター研究所), その他部局等, 研究員 (40450564) ; 野口 佳裕 東京医科歯科大学, 医学部附属病院, 講師 (50282752) ; 田中 雅嗣 地方独立行政法人東京都健康長寿医療センター(東京都健康長寿医療センター研究所), その他部局等, 研究部長 (60155166) ; 加藤 智史 地方独立行政法人東京都健康長寿医療センター(東京都健康長寿医療センター研究所), その他部局等, 研究員 (80469965)
• 研究期間 (年度): 2009-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: 遺伝子 / 脳・神経 / 神経科学 / 臨床

研究概要

難聴は種々の要因で発症するが、ミトコンドリア遺伝子変異による難聴は、比較的高頻度である。ミトコンドリア遺伝子変異の網羅的解析手法として開発した蛍光ビーズ・アレイPCR-Luminex®法を用いて、原因不明の遺伝性ならびに非遺伝性感音難聴症例を対象に、ミトコンドリア遺伝子変異の有無を解析した。本法により、373例を対象に、61種類のミトコンドリア遺伝子変異の有無を解析し、m.1555A>Gを11例、m.3243A>Gを9例、その他としてm.8348A>G、m.11778G>A、15498G>A、m.7444G>A、m.7472C>ins C変異を各々１例検出した。この網羅的解析法により、臨床所見では診断が困難であったミトコンドリア遺伝子変異例を診断し、治療指針の確立に有用であった。また、61個のミトコンドリア遺伝子点変異の有無を同定して、日本人に見られる主要な12のハプログループとの関連を検索し、ハプロタイプD4bが、有意に健常者より遺伝性感音難聴発症に関与していると同定した。
さらに、ミトコンドリア遺伝変異による難聴として代表的なtRNALeu(UUR)遺伝子の3243A>G変異の68歳女性のMELAS側頭骨標本を対象に、我々が開発したレーザーキャプチャー・マイクロダイセクションによるヒト内耳細胞からの個別のDNA抽出法により、変異ミトコンドリア遺伝子量を定量解析し、3243A＞G変異率は、有毛細胞は2.2%、血管条は2.4%、ラセン神経節細胞は26.6%であった。また、ホルマリン固定ヒト側頭骨標本のパラフィン包埋切片から、ラセン神経節細胞、外有毛細胞、ラセン神経節細胞をレーザキャプチャにて採取し、RNAを抽出、COCHとSLC26A5のmRNAを解析した。

現在までの達成度 (区分)

理由

25年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

25年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Audiovestibular findings in patients with Vogt-Koyanagi-Harada disease (2014)
  • 著者名/発表者名: Noguchi Y, Nishio A, Takase H, Miyanaga M, Takahashi H, Mochizuki M, Kitamura K
  • 雑誌名: Acta Otolaryngol 巻: 134(4) ページ: 339-44
  • 査読あり
• [雑誌論文] A DFNA5 Mutation Identified in Japanese Families with Autosomal Dominant Hereditary Hearing Loss (2014)
  • 著者名/発表者名: Nishio A, Noguchi Y, Sato T, Naruse T, Kimura A, Takagi A, Kitamura K
  • 雑誌名: Ann Hum Genet 巻: 78 ページ: 83-91
  • DOI: 10.1111/ahg.12053
  • 査読あり
• [雑誌論文] 軽度難聴の急性感音難聴症例の検討 (2014)
  • 著者名/発表者名: 野口佳裕，籾山直子，高橋正時，喜多村 健
  • 雑誌名: Audiology Japan 巻: 57 ページ: 63-70
  • 査読あり
• [雑誌論文] High-Resolution ENT Video Endoscope with Superior Image Quality Equivalent to that of Gastric Video Endoscopes (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsunoda A, Tsunoda K, Sumi T, Kishimoto S, Kitamura K
  • 雑誌名: The International Open Access Otolaryngology 巻: 4 ページ: 1000166
  • 査読あり
• [雑誌論文] 前庭水管拡大症を伴うSLC26A4, ATP6V1B1, SIX1変異例の聴平衡覚所見の検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 野口佳裕，伊藤卓，川島慶之，西尾綾子，本田圭司，喜多村 健
  • 雑誌名: Equilibrium Res 巻: 72 ページ: 97-106
  • 査読あり
• [雑誌論文] RNA analysis of inner ear cells from formalin fixed paraffin embedded (FFPE) archival human temporal bone section using laser microdissection –A technical report (2013)
  • 著者名/発表者名: Kimura Y, Kubo S, Koda H, Shigemoto K, Sawabe M, Kitamura K
  • 雑誌名: Hear Res 巻: 302 ページ: 26-31
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bezold膿瘍を形成した隠蔽性乳様突起炎の１例 (2013)
  • 著者名/発表者名: 立石優美子，高橋正時，喜多村 健
  • 雑誌名: Otology Japan 巻: 23 ページ: 210-5
  • 査読あり
• [雑誌論文] 網羅的解析により診断された耳小骨奇形を合併したミトコンドリア3243変異例 (2013)
  • 著者名/発表者名: 本田圭司，野口佳裕，加藤智史，奥野秀次，喜多村 健
  • 雑誌名: Otology Japan 巻: 23 ページ: 227-32
  • 査読あり
• [雑誌論文] 熱湯による外傷性鼓膜穿孔例 (2013)
  • 著者名/発表者名: 籾山直子，高橋正時，野口佳裕，喜多村 健
  • 雑誌名: 耳鼻臨床 巻: 106 ページ: 1077-82
  • 査読あり
• [雑誌論文] 埋込型骨導補聴器術後皮膚合併症に対する再手術例の検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 吉本亮一，野口佳裕，岩崎朱見，喜多村 健
  • 雑誌名: Otology Japan 巻: 23 ページ: 834-40
• [学会発表] Risk factors for the development of descending necrotizing mediastinitis in patients with cervical necrotizing fasciitis (2013)
  • 著者名/発表者名: Takeda T, Kawashima Y, Kamada T, Kishine N, Hatanaka A, Kitamura K
  • 学会等名: The 12th Taiwan-Japan Conference on Otolaryngology-Head and Neck Surgery
  • 発表場所: Taipei, Taiwan
  • 年月日: 20131205-20131207
• [学会発表] Anatomical feature of the middle cranial fossa in fetal periods causes superior canal dehiscence (2013)
  • 著者名/発表者名: Kitamura K, Takahashi N, Tsunoda A, Shirakura S
  • 学会等名: 29th Politzer Society Meeting
  • 発表場所: Antalya Turkey
  • 年月日: 20131114-17
• [学会発表] A DFNA5 mutation in two Japanese families with autosomal dominant hereditary hearing loss (2013)
  • 著者名/発表者名: Kitamura K, Sato T, Noguchi Y, Nishio A, Naruse T, Kimura A, Takagi A
  • 学会等名: 29th Politzer Society Meeting
  • 発表場所: Antalya Turkey
  • 年月日: 20131114-17
• [学会発表] Functional MRI study of speech recognition in noise for patients with profound unilateral hearing loss (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto K, Tabei K, Katsuyama N, Taira M, Kitamura K
  • 学会等名: 13th Triennial Meeting of the International Otopathology Society
  • 発表場所: Boston, USA
  • 年月日: 20130609-20130611
• [学会発表] Comprehensibe analyses for mitochondrial DNA in patients with hereditary hearing loss (2013)
  • 著者名/発表者名: Kato T, Noguchi Y, Kimura Y, Kitamura K
  • 学会等名: 13th Triennial Meeting of the International Otopathology Society
  • 発表場所: Boston, USA
  • 年月日: 20130609-11
• [学会発表] A case of mitochondrial myopathy, encephalopathy, lactic acidosis, and stroke-like episodes (MELAS); histopathology and mutational analysis of the temporal bone (2013)
  • 著者名/発表者名: Kimura Y, Koda H, Kubo S, Shigemoto K, Arai T, kitamura K
  • 学会等名: 13th Triennial Meeting of the International Otopathology Society
  • 発表場所: Boston, USA
  • 年月日: 20130609-11
• [学会発表] Panel Discussion, Active Middle Ear Implant, Baha Experience: A note on complications (2013)
  • 著者名/発表者名: Kitamura K
  • 学会等名: 20th IFOS World Congress
  • 発表場所: Seoul, Korea
  • 年月日: 20130601-20130605
  • 招待講演
• [学会発表] Delayed restoration of speech discrimination score in sudden sensorineural hearing loss (2013)
  • 著者名/発表者名: Noguchi Y, Takahashi M, Ito T, Tokano H, Nishio A, Yamamoto K, Kitamura K
  • 学会等名: 20th IFOS World Congress
  • 発表場所: Seoul, Korea
  • 年月日: 20130601-20130605
• [学会発表] Efficacy of herbal medicine, Juzen-Taiho-To (JTT) in children with recurrent acute otitis media-arandomized controlled trial (2013)
  • 著者名/発表者名: Ito M, Takahashi H, Kitamura K, Kobayashi T, Yamanaka N, Harabuchi Y, Watanabe Y, Origasa H, Yoshizaki T
  • 学会等名: 20th IFOS World Congress
  • 発表場所: Seoul, Korea
  • 年月日: 20130601-20130605
• [図書] 臨床検査学講座 第3版 第7刷 生理機能検査学 (2014)
  • 著者名/発表者名: 堤 剛，喜多村 健
  • 総ページ数: 7
  • 出版者: 医歯薬出版株式会社
• [図書] イエロー・ノート 臨床編 2nd edition 芝 紀代子（編） (2013)
  • 著者名/発表者名: 角田篤信, 喜多村 健
  • 総ページ数: 6
  • 出版者: メジカルビュー社
• [図書] ドクターズガイド (2013)
  • 著者名/発表者名: 喜多村 健（監修）
  • 総ページ数: 2
  • 出版者: 時事通信社