キャリア―細胞を用いたアデノウイルスベクターによる頭頸部癌の遺伝子治療

2011 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21390462
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 丹生 健一 神戸大学, 医学研究科, 教授 (20251283)
• 研究分担者: 大月 直樹 神戸大学, 医学研究科, 准教授 (40343264) ; 白川 利郎 神戸大学, 保健学研究科, 准教授 (70335446)
• キーワード: 頭頸部癌 / 遺伝子治療 / midkine / gene therapy / アデノウイルス / siRNA

研究概要

本研究の目的は、5年生存率30%と予後不良な頭頸部癌進行癌へのあらたな治療の試みとして、制限増殖型アデノウイルスベクターに抗腫瘍効果を持つ遺伝子を付加し、生体のアデノウイルスに対する中和抗体効果を減じる目的のため、キャリア細胞を用いて投与する遺伝子治療を開発することである。
本年度は、
1.癌特異的にアデノウイルス増殖が行われるよう、自己増殖に必要な遺伝子群EIAとEIB遺伝子を、癌細胞特異的に活性の高いmidkineプロモーター下流につなぎ、アデノウイルスコスミドベクターに導入した。
2.さらに、このベクターに抗腫瘍効果を持つEGFRまたはVEGFのsiRNA配列をRNA polymerase III (pol III)系のヒト由来のU6プロモーター発現するユニットを導入したアデノウイルスコスミドベクターを作成した。
siRNA配列は、対EGFRに5種類、対VEGFに2種類を過去の文献などから検索し、合成したものを用意し、それぞれのスクランブル(配列が似ているがsiRNA効果がないコントロール)も用意した。
3.いずれのsiRNA配列も、当研究室で構築した発現ベクターによる一過的な導入発現において、癌培養細胞中のEGFRおよびVEGFの発現を低下させることを確認した。
現在、アデノウイルスコスミドベクターからアデノウイルス作成および精製を行っており、ウイルス獲得後はin vitro,in vivoの実験系で、その効果を確認していく予定である。

研究成果

• [雑誌論文] E10A, an adenovirus-carrying endostatin gene, dramatically increased the tumor drug concentration of metronomic chemotherapy with low-dose cisplatin in a xenograft mouse model for head and neck squamous-cell carcinoma (2012)
  • 著者名/発表者名: Adhim Z, Lin X, Huang W, Morishita N, Nakamura T, Yasui H, Otsuki N, Shigemura K, Fujisawa M, Nibu K, Shirakawa T
  • 雑誌名: Cancer Gene Ther 巻: 19 ページ: 144-152
• [雑誌論文] Multi-institutional analysis of solitary extramedullary plasmacytoma of the head and neck treated with curative radiotherapy (2012)
  • 著者名/発表者名: Sasaki R, Yasuda K, Abe E, Uchida N, Kawashima M, Uno T, Fujiwara M, Shioyama Y, Kagami Y, Shibamoto Y, Nakata K, Takada Y, Kawabe T, Uehara K, Nibu K, Yamada S
  • 雑誌名: Int J Radiat Oncol Biol Phys 巻: 82 ページ: 626-634
  • DOI: doi:10.1016/j.ijrobp.2010.11.037
  • 査読あり
• [雑誌論文] Four cases of spinal accessory nerve passing through the fenestrated internal jugular vein (2012)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto Y, Otsuki N, Morimoto K, Saito M, Nibu KI
  • 雑誌名: Surg Radiol Anat 巻: (in press)
  • DOI: DOI:10.1007/s00276-011-0875-x
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vitro and in vivo inhibitory effect of three Cox-2 inhibitors and epithelial-to-mesenchymal transition in human bladder cancer cell lines (2011)
  • 著者名/発表者名: Adhim Z, Matsuoka T, Bito T, Shigemura K, Lee KM, Kawabata M, Fujisawa M, Nibu K, Shirakawa T
  • 雑誌名: Br J Cancer 巻: 102 ページ: 393-402
  • DOI: doi:10.1038/bjc.2011.262
  • 査読あり
• [雑誌論文] Weekly paclitaxel in patients with recurrent or metastatic head and neck cancer (2011)
  • 著者名/発表者名: Tahara M, Minami H, Hasegawa Y, Tomita K, Watanabe A, Nibu K, Fujii M, Onozawa Y, Kurono Y, Sagae D, Seriu T, Tsukuda M
  • 雑誌名: Cancer Chemother Pharmacol 巻: 68 ページ: 69-76
  • DOI: doi:10.1007/s00280-010-1550-3
  • 査読あり
• [雑誌論文] 同時併用化学放射線療法を行った中咽頭癌患者に対する嚥下リハビリテーションの有用性 (2011)
  • 著者名/発表者名: 常行美貴、米澤宏一郎、森本浩一、谷本均、齋藤幹、大月直樹、丹生健一
  • 雑誌名: 頭頸部癌 巻: 37-1 ページ: 116-120
  • DOI: doi:10.5981/jjhnc.37.116
  • 査読あり
• [雑誌論文] 耳下腺癌における予防的頚部郭清と術後放射線治療について (2011)
  • 著者名/発表者名: 柴田智久、米澤宏一郎、森本浩一、山下大介、大月直樹、西村英輝、佐々木良平,丹生健一
  • 雑誌名: 頭頸部癌 巻: 37-1 ページ: 78-82
  • DOI: doi:10.5981/jjhnc.37.78
  • 査読あり
• [雑誌論文] 局所進行下咽頭癌に対する術後放射線療法の遡及的検討 (2011)
  • 著者名/発表者名: 西村英輝、佐々木良平, 吉田賢史, 宮脇大輔, 大月直樹, 斉藤幹, 清田尚臣, 副島俊典, 杉村和朗, 丹生健一
  • 雑誌名: 頭頸部癌 巻: 37-1 ページ: 62-66
  • DOI: doi:10.5981/jjhnc.37.62
  • 査読あり
• [雑誌論文] 頭頸部癌における集学的治療頸部郭清術後の肩・上肢運動機能のリハビリテーション (2011)
  • 著者名/発表者名: 大月直樹、丹生健一
  • 雑誌名: JOHNS27 巻: 4 ページ: 630-633
  • 査読あり
• [雑誌論文] 耳鼻咽喉科・頭頸部外科の看護技術2011癌治療に対する看護口腔・中咽頭癌 (2011)
  • 著者名/発表者名: 常行美貴、米澤宏一郎、齋藤幹、大月直樹、丹生健一
  • 雑誌名: JOHNS27 巻: 3 ページ: 407-411
  • 査読あり
• [学会発表] E10A, an adenovirus carrying endostatin gene, dramatically increased the tumor drug concentration of metronomic chemotherapy with low dose cisplatin in a xenograft mouse model for head and neck squamous cell carcinoma (2011)
  • 著者名/発表者名: Zainal Adhimi, Xubin Lin, Wenlin Huang, Tsutomu Nakamura, Hiroyuki Yasui, Naoki Otsuki, Masato Fujisawa, Ken-ichi Nibu, Toshiro Shirakawa
  • 学会等名: The 11th Japan-Taiwan Conference on Otolaryngology-Head and Neck Surgery
  • 発表場所: 神戸日本
  • 年月日: 2011-12-08
• [学会発表] Gene silencing with siRNA targeting E6/E7 as a therapeutic intervention against Head and Neck Cancer containing HPV16 cell lines (2011)
  • 著者名/発表者名: Zainal Adhim, Naoki Otsuki, Toshiro Shirakawa, Naoya Morishita, Masato Kawabata, Ken-ichi Nibu
  • 学会等名: Annual Meeting of American Academy of Otolaryngology-Head and Neck Surgery 2011
  • 発表場所: サンフランシスコ、アメリカ
  • 年月日: 2011-09-11
• [学会発表] E10A, an adenovirus carrying endostatin gene, dramatically increased the tumor drug concentration of metronomic chemotherapy with low dose cisplatin in a xenograft mouse model for head and neck squamous cell carcinoma (2011)
  • 著者名/発表者名: Zainal Adhimi Xubin Lin, Wenlin Huang, Tsutomu Nakamura, Hiroyuki Yasui, Naoki Otsuki Masato Fujisawa, Ken-ichi Nibu, Toshiro Shirakawa
  • 学会等名: Annual Meeting of Japan Society of Gene Therapy 2011
  • 発表場所: 福岡日本
  • 年月日: 2011-07-16
• [学会発表] E10A, an adenovirus carrying endostatin gene, enhanced anti-tumor effect of metronomic chemotherapy with low dose cisplatin in a xenograft mouse model for head and neck squamous cell carcinoma (2011)
  • 著者名/発表者名: Zainal Adhimi, Xubin Lin, Wenlin Huang, Tsutomu Nakamura, Hiroyuki Yasui, Naoki Otsuki, Ken-ichi Nibu, Masato Fujisawa, Toshiro Shirakawa
  • 学会等名: Annual Meeting of American Society of Gene Therapy and Cellular Therapy 2011
  • 発表場所: シアトル、アメリカ
  • 年月日: 2011-05-21
• [図書] 耳下腺腫脹今日の治療指針2011 (2011)
  • 著者名/発表者名: 大月直樹
  • 総ページ数: 1296-97
  • 出版者: 医学書院