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2011 年度 実績報告書

ゲノミクスとセロミクスを用いた神経芽腫・肝芽腫の発生機序解明と分子標的療法の創出

研究課題

研究課題/領域番号 21390474
研究機関広島大学

研究代表者

檜山 英三  広島大学, 自然科学研究支援開発センター, 教授 (00218744)

研究分担者 升島 努  広島大学, 医歯薬学総合研究科, 教授 (10136054)
外丸 祐介  広島大学, 自然科学研究支援開発センター, 教授 (90309352)
上松瀬 新  広島大学, 病院, 病院助教 (90569881)
キーワード癌 / ゲノム / 細胞・組織 / 発生・分化 / トランスレーショナルリサーチ
研究概要

昨年度に引き続き、初代培養にて腫瘍細胞を選別した140検体と樹立株19株を中心に検討した。
がん幹細胞の分離、分化異常細胞(予後良好腫瘍細胞)の分離
1.がん幹細胞の分離、分化異常細胞分離:細胞株からヒトテロメラーゼのTERT(human telomerase reverse transcriptase)と表面抗原CD133を指標に幹細胞分画を濃縮した。免疫不全(NOG)マウスでの腫瘍形成能からがん幹細胞を選別した。これらの細胞にて、スフィンゴミエリンやAFP発現、Nestin,c-kit,Bim-1やNotch-1などのprogenitor cellのマーカーについて検討したところ、Bim-1発現が有意であった。この遺伝子発現を1細胞PCRで検討したところ、がん幹細胞といして分離した細胞に有意に発現していた。
2.セロミクス:セロミクス(single cell proteomics)で幹細胞と分化細胞から一細胞内液を直接吸引してMSで解析したところ、スフィンゴミエリンとさらにグルタミン代謝で差を認めた。
3.ゲノムデータ解析と検証:既に解析済みのマイクロアレイによる遺伝子変化、遺伝子発現、microRNA、メチル化解析のデータに加え、次世代シークエンサーにて遺伝子変異や発現の差異を検索した結果、AKTパスウェイとグルタミン代謝経路に差を認め、バイオマーカーと有用性が示唆された。これらの遺伝子について培養細胞や正常細胞への導入、ノックダウンにて変化を検討したが、最終的に大きな変化を認める標的としては4分子が見出され、この4遺伝子についてのノックアウトマウスの作成にて検証するところである。

  • 研究成果

    (39件)

すべて 2012 2011

すべて 雑誌論文 (13件) (うち査読あり 13件) 学会発表 (23件) 図書 (3件)

  • [雑誌論文] Clinical feature of ALK mutated neuroblastoma2012

    • 著者名/発表者名
      Hiyama E, et al
    • 雑誌名

      Journal of Pediatric Surgery

      巻: (In press)

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Establishment of ES cells from inbred strain mice by dual inhibition (2i)2012

    • 著者名/発表者名
      Hiyama E, et al
    • 雑誌名

      The Journal of Reproduction and Development

      巻: 58 ページ: 77-83

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Is the prognosis of stage 4s neuroblastoma in patients 12months of age and older really excellent?2012

    • 著者名/発表者名
      Hiyama E, et al
    • 雑誌名

      European Journal of Cancer

      巻: (In press)

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Prognostic Significance of Telomerase Activity and Human Telomerase Reverse Transcriptase Expression in Ampullary Carcinoma2012

    • 著者名/発表者名
      Hiyama E, et al
    • 雑誌名

      Annals of Surgical Oncology

      巻: (In press)

    • 査読あり
  • [雑誌論文] In Situ Molecular Analysis of Plant Tissues by Live Single Cell Mass Spectrometry2012

    • 著者名/発表者名
      Tejedor ML, Mizuno H, Tsuyama N, Harada T, Masujima T
    • 雑誌名

      Analytical Chemistry

      巻: (in press)

    • DOI

      10.1021/ac202447t

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Direct drug metabolism monitoring in a live single hepatic cell by video mass spectrometry2012

    • 著者名/発表者名
      Date S, Mizuno H, Tsuyama N, Harada T, Masujima T
    • 雑誌名

      Analytical Science

      巻: 28 ページ: 201-203

    • DOI

      10.2116/analsci.28.201

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Drug metabolite heterogeneity between cultured single cells profiled by pico-trapping direct mass spectrometry2012

    • 著者名/発表者名
      Fukano Y, Tsuyama N, Mizuno H, Date S, Takano M, Masujima T
    • 雑誌名

      Nanomedicine

      巻: (in press)

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Neoplastic transformation by TERT in FGF-2-expanded human mesenchymal stem cells2011

    • 著者名/発表者名
      Yamaoka E, Hiyama E, Sotomaru Y, Fukuba I, Sudo T, Sueda T, Hiyama K.
    • 雑誌名

      International Journal of Oncology

      巻: 39 ページ: 5-11

    • DOI

      DOI:10.3892/ijo.2011.1029.MM.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Wnt signaling and telomerase activation of hepatoblastoma : correlation with chemosensitivity and surgical resectability2011

    • 著者名/発表者名
      Hiyama E, et al
    • 雑誌名

      Journal of Pediatric Surgery

      巻: 46 ページ: 2221-2227

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Telomerase activation without shortening of telomeric 3'-overhang is apoor prognostic factor in human colorectal cancer2011

    • 著者名/発表者名
      Hiyama E, et al
    • 雑誌名

      Cancer Science

      巻: 102 ページ: 330-335

    • DOI

      10.1111/j.1349-7006.2010.01786.x

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Impact of intratumoral thymidylate synthase expression on prognosis after surgical resection for ampullary carcinoma2011

    • 著者名/発表者名
      Hiyama E, et al
    • 雑誌名

      World Journal of Surgical Oncology

      巻: 103 ページ: 663-668

    • DOI

      10.1002/jso.21879

    • 査読あり
  • [雑誌論文] New method for absolute spinal cord ischemia protection in rabbits2011

    • 著者名/発表者名
      Hiyama E, et al
    • 雑誌名

      Journal of Vascular Surgery

      巻: 54 ページ: 1109-1116

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Gene targeting and subsequent site-specific transgenesis at the β-act in (ACTB) locus in common marmoset embryonic stem cells2011

    • 著者名/発表者名
      Sotomaru Y, et al
    • 雑誌名

      Stem Cells and Development

      巻: 20 ページ: 1587-1599

    • DOI

      10.1089/scd.2010.0351

    • 査読あり
  • [学会発表] 神経芽腫におけるがん幹細胞分離の試み2011

    • 著者名/発表者名
      檜山英三, 他
    • 学会等名
      第34回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      横浜市
    • 年月日
      2011-12-02
  • [学会発表] 小児がんへ有効な施策提言のための資料収集とアウトカム指標の抽出2011

    • 著者名/発表者名
      檜山英三, 他
    • 学会等名
      第53回日本小児血液・がん学会学術集会
    • 発表場所
      群馬県前橋市
    • 年月日
      2011-11-27
  • [学会発表] 無蛍光分子プローブ-1細胞ビデオマススコープ法による細胞分子拡散追跡2011

    • 著者名/発表者名
      升島努, 他
    • 学会等名
      日本分析化学会第60年会
    • 発表場所
      名古屋市
    • 年月日
      2011-09-16
  • [学会発表] Live Single-cell MSによるホスホリピドニシス特異的分子探索2011

    • 著者名/発表者名
      升島努, 他
    • 学会等名
      第59回質量分析総合討論会
    • 発表場所
      吹田市
    • 年月日
      2011-09-15
  • [学会発表] 一細胞ダイレクト質量分析法による一肝細胞内薬物代謝追跡2011

    • 著者名/発表者名
      升島努, 他
    • 学会等名
      第59回質量分析総合討論会
    • 発表場所
      吹田市
    • 年月日
      2011-09-15
  • [学会発表] Live Single-cell MSによるリアルタイム細胞内変動分子追跡2011

    • 著者名/発表者名
      升島努, 他
    • 学会等名
      第59回質量分析総合討論会
    • 発表場所
      吹田市
    • 年月日
      2011-09-15
  • [学会発表] LC-MSによる神経芽細胞腫における新規指標分子の探索2011

    • 著者名/発表者名
      檜山英三, 他
    • 学会等名
      第59回質量分析総合討論会
    • 発表場所
      吹田市
    • 年月日
      2011-09-14
  • [学会発表] LC-MSによる血漿中の低分子の網羅的検出2011

    • 著者名/発表者名
      升島努, 他
    • 学会等名
      第59回質量分析総合討論会
    • 発表場所
      吹田市
    • 年月日
      2011-09-14
  • [学会発表] 1細胞内2点局在同時分析による細胞内分子分布探索法の確立2011

    • 著者名/発表者名
      升島努, 他
    • 学会等名
      日本分析化学会第60年会
    • 発表場所
      名古屋市
    • 年月日
      2011-09-14
  • [学会発表] 1細胞ダイレクト質量分析法を用いた細胞内2領域同時分析法の開発2011

    • 著者名/発表者名
      升島努, 他
    • 学会等名
      第24回バイオメディカル分析科学シンポジウム
    • 発表場所
      鳥取県西伯郡伯耆町
    • 年月日
      2011-09-01
  • [学会発表] 1細胞質量分析で見る植物分子代謝2011

    • 著者名/発表者名
      升島努
    • 学会等名
      農研機構セミナー
    • 発表場所
      岡山市(招待講演)
    • 年月日
      2011-08-05
  • [学会発表] Live Single-cell Mass Spectrometry2011

    • 著者名/発表者名
      升島努
    • 学会等名
      日本質量分析学会北海道談話会・講演会
    • 発表場所
      札幌市(招待講演)
    • 年月日
      2011-07-21
  • [学会発表] 日本消化器外科学会総会胆道癌におけるテロメラーゼおよびTERT発現の検討2011

    • 著者名/発表者名
      檜山英三, 他
    • 学会等名
      第66回日本消化器外科学会総会
    • 発表場所
      名古屋市
    • 年月日
      2011-07-13
  • [学会発表] 小児肝癌の国際共同臨床試験とゲノム解析2011

    • 著者名/発表者名
      檜山英三
    • 学会等名
      第32回IFN治療研究会
    • 発表場所
      広島市
    • 年月日
      2011-06-24
  • [学会発表] Live Single-cell MS Mediated Monitoring of Molecular Diffusion through Gap Junction in Normal Human Cells2011

    • 著者名/発表者名
      Masujima T, et al
    • 学会等名
      59th ASMS Conference
    • 発表場所
      Denver市(米国)
    • 年月日
      2011-06-08
  • [学会発表] Live Single-cell Mass Spectrometry for Real Time Molecular Detection of a Stimulated Allergy Cell Organelle2011

    • 著者名/発表者名
      Masujima T, et al
    • 学会等名
      59th ASMS Conference
    • 発表場所
      Denver市(米国)
    • 年月日
      2011-06-08
  • [学会発表] Simultaneous Molecular Analysis from Different Organelle in a Live Single Cell by Dual Tip Live Single-cell MS2011

    • 著者名/発表者名
      Masujima T, et al
    • 学会等名
      59th ASMS Conference
    • 発表場所
      Denver市(米国)
    • 年月日
      2011-06-06
  • [学会発表] 十二指腸乳頭部癌におけるテロメラーゼ活性およびhTEKT発現の検討2011

    • 著者名/発表者名
      檜山英三, 他
    • 学会等名
      第111回日本外科学会定期学術集会
    • 発表場所
      (紙上開催)
    • 年月日
      2011-05-25
  • [学会発表] 胆管癌におけるTS、DPD、OPRT発現とS-1治療効果の相関についての検討2011

    • 著者名/発表者名
      檜山英三, 他
    • 学会等名
      第111回日本外科学会定期学術集会
    • 発表場所
      (紙上開催)
    • 年月日
      2011-05-25
  • [学会発表] Live Single-Cell MS for Direct Analysis of a Lipid Droplet in a Single HepG2 Cell2011

    • 著者名/発表者名
      Masujima T, et al
    • 学会等名
      ICAS2011国際分析科学会議
    • 発表場所
      京都市
    • 年月日
      2011-05-24
  • [学会発表] Exploration of Neoplastic Tumor Marker by Differential LC-MS2011

    • 著者名/発表者名
      Hiyama E, et al
    • 学会等名
      ICAS2011国際分析科学会議
    • 発表場所
      京都市
    • 年月日
      2011-05-24
  • [学会発表] Live Single Cell Video-Mass Spectrometry2011

    • 著者名/発表者名
      Masujima T.
    • 学会等名
      ICAS2011国際分析科学会議
    • 発表場所
      京都市
    • 年月日
      2011-05-23
  • [学会発表] Clinical feature of ALK mutated neuroblastoma2011

    • 著者名/発表者名
      Hiyama E, et al
    • 学会等名
      44th Annual Meeting of Pacific Association of Paediatric.Surgeons (PAPS)
    • 発表場所
      Cancun, Mexico
    • 年月日
      2011-04-13
  • [図書] パートナー分析化学I2012

    • 著者名/発表者名
      升島努(共著)
    • 総ページ数
      297
    • 出版者
      南江堂
  • [図書] パートナー分析化学II2012

    • 著者名/発表者名
      升島努(共著)
    • 総ページ数
      328
    • 出版者
      南江堂
  • [図書] 試料分析講座「創薬の分析化学」2011

    • 著者名/発表者名
      升島努, 他
    • 総ページ数
      309
    • 出版者
      丸善出版

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公開日: 2013-06-26   更新日: 2014-11-17  

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