| 研究課題/領域番号 |
21390534
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
阪井 丘芳 大阪大学, 歯学研究科, 教授 (90379082)
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| 研究分担者 |
野原 幹司 大阪大学, 歯学部附属病院, 助教 (20346167)
福本 敏 東北大学, 歯学研究科, 教授 (30264253)
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| キーワード | 臓器 / 再生 / 唾液腺 / 分枝 / 形態形成 / 口腔乾燥症 |
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| 研究概要 |
唾液腺、肺、腎臓、前立腺などの臓器は、胎生期において、上皮の塊を形成し、立体的な分枝(枝分かれ)を繰り返して発達する。分枝はこれらの臓器形成にとり、必須の現象であり、臓器再生の鍵を握っていると考えられる。本研究では、胎生期マウス唾液腺を分枝のモデルとして用い、いくつかの遺伝子の機能解析を行い、形態形成に寄与する新規遺伝子群を明らかにする予定である。
1)唾液腺の分枝部位に発現する遺伝子のスクリーニング
平成19～20年度:基盤研究Bで得られた遺伝子データをもとに研究を開始した。マウス胚の唾液腺上皮分枝部(cleft)と非分枝部(bud)に特異的に発現する遺伝子を連続的遺伝子発現解析法:SAGE(Serial Analysis of Gene Expression)法を改良したT7-SAGE法で網羅的に同定した。このデータベースの中から、分枝部(cleft)と非分枝部(bud)を対比してcleftに強く発現する遺伝子をリストアップした。将来的に臨床応用をめざすためには、分枝形態形成に関与する詳細な機能を明らかにする必要があり、コンピューター解析にて機能を推測している。フリーのウェブサイトであるPROSITEを用いてタンパク質構造を推測し、特徴的な機能ドメインを有する遺伝子の選択を行った。
2)cleft上皮に特異的に発現する遺伝子の発現量確認
リストアップしたcleft上皮に特異的に発現する遺伝子が、実際にcleftに発現しているかどうかを一部RT-PCR法で確認した。引き続いて、定量的real-time PCR法で、SAGEのdataを確証し、cleftとbudに発現する遺伝子の発現量を比較検討している。構造的に特徴のある遺伝子に関しては、すぐにsiRNAを用いた機能評価を開始し、in situ hybridizationにて発現分布の確認を進めている。
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