わが国とアメリカ大陸のウイルス性人獣共通感染症の流行阻止のための研究

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21405035
• 応募区分: 海外学術
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 苅和 宏明 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 准教授 (70224714)
• 研究分担者: 高島 郁夫 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 教授 (30002083) ; 好井 健太朗 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 助教 (50421988) ; 有川 二郎 北海道大学, 大学院・医学研究科, 教授 (10142704) ; 森松 組子 北海道大学, 大学院・医学研究科, 准教授 (90220722)
• キーワード: 人獣共通感染症 / ハンタウイルス / ウエストナイルウイルス / げっ歯類 / 鳥類

研究概要

ハンタウイルスはげっ歯類を自然宿主として世界中に分布しており、人に感染することで腎症候性出血熱(HFRS)やハンタウイルス肺症候群(HPS)といったハンタウイルス感染症を引き起こす。本研究では、ハンタウイルスの血清型やげっ歯類の種にとらわれない抗原検出法と抗体検出法の開発を試みた。
抗原検出法としては各種ハンタウイルスに広い交差反応性を示すモノクローナル抗体E5/G6を用いてハンタウイルスの核蛋白質(NP)を検出するELISAを構築した。本抗原検出ELISAにより、Hantaan virus(HTNV)、Seoul virus(SEOV)およびPuumala virus(PUUV)の感染細胞とウイルス液中のNPを濃度依存的に検出できた。またPUUVに実験感染させたシリアンハムスターの肺において、感染後7日目、14日目の個体からもNPを検出できた。
抗体検出法としては、3種類のハンタウイルス組換えNPを抗原として用いることで、抗ハンタウイルス抗体を検出するELISAを構築した。本抗体検出ELISAにより、感染げっ歯類血清中や免疫ウサギ血清中のHTNV、SEOV、PUUV、Amur virusおよびSin Nombre virusのNPに対する抗体を検出できた。PUUVを実験感染させたシリアンハムスターでは、感染後14日目以降の個体より抗体を検出できた。また、様々な種類の野生げっ歯類の血清を検体として抗体検出ELISAを実施したところ、IFAと比較して敏感度、特異度がいずれも95%以上となり、非常に信頼性の高い抗体検出法であることが判明した。
以上のことから今回構築したハンタウイルスの抗原検出法と抗体検出法がげっ歯類を対象としたハンタウイルス感染の診断法として有用であることが示された。

研究成果

• [雑誌論文] Epidemiological study of hantavirus infection in the Samara Region of European Russia. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kariwa H, Tkachenko EA, Morozov VG, Seto T, Tanikawa Y, Kolominov SI, Belov SN, Nakamura I, Hashimoto N, Balakiev AE, Dzagurnova TK, Abu Daud NH, Miyashita D, Medvedkina OA, Nakauchi M, Ishizuka M, Yoshii K, Yoshimatsu K, Arikawa J, Takashima I
  • 雑誌名: Journal of Veterinary Medical Science. 71 ページ: 1569-1578
  • 査読あり
• [雑誌論文] Establishment of a neutralization test involving reporter gene-expressing virus-like particles of tick-borne encephalitis virus. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yoshii K, Ikawa A, Chiba Y, Omori Y, Maeda J, Murata R, Kariwa H, Takashima I.
  • 雑誌名: Journal of Virological Methods 161 ページ: 173-176
  • 査読あり
• [雑誌論文] A PCR-based protocol for the generation of a recombinant West Nile virus. (2009)
  • 著者名/発表者名: Maeda A, Murata R, Akiyama M, Takashima I, Kariwa H, Watanabe T, Kurane I, Maeda J.
  • 雑誌名: Virus Research 144 ページ: 35-43
  • 査読あり
• [学会発表] ダニ媒介性脳炎ウイルスSofjin株のレプリコンの構築 (2009)
  • 著者名/発表者名: 高野絢子、大森優紀、好井健太朗、石塚万理子、村田亮、苅和宏明、高島郁夫
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 都市センターホテル(東京)
  • 年月日: 2009-10-27
• [学会発表] 極東ロシアの野鼠からのハンタウイルスの分離と人におけるウイルス感染状況の調査 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉川佳佑、苅和宏明、瀬戸隆弘、真田崇弘、好井健太朗、吉松組子、有川二郎、高島郁夫
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 都市センターホテル(東京)
  • 年月日: 2009-10-27
• [学会発表] メキシコの野生げっ歯類が保有するハンタウイルスの遺伝子解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉田喜香、苅和宏明、Ramos Celso, Hernandez Cornelio S.Almaraz, Maria L.R., 高野絢子、戸谷理詩、宮下大輔、Ngonda Saasa、瀬戸隆弘、真田崇弘、吉川佳佑、好井健太朗、吉松組子、有川二郎、高島郁夫
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 都市センターホテル(東京)
  • 年月日: 2009-10-27
• [学会発表] オムスク出血熱ウイルスの感染性cDNAの構築 (2009)
  • 著者名/発表者名: 好井健太朗ら
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 都市センターホテル(東京)
  • 年月日: 2009-10-26
• [学会発表] 極東ロシアの野鳥におけるウエストナイル熱の血清疫学調査と中和試験の評価 (2009)
  • 著者名/発表者名: 村田亮、好井健太朗、苅和宏明、高島郁夫
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 都市センターホテル(東京)
  • 年月日: 2009-10-26
• [学会発表] 日本国内におけるダニ媒介性脳炎の血清疫学調査 (2009)
  • 著者名/発表者名: 持舘景太、好井健太朗、大森優紀、千葉裕美子、村田亮、真田崇弘、前田潤子、苅和宏明、高島郁夫
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 都市センターホテル(東京)
  • 年月日: 2009-10-26
• [学会発表] 極東ロシアの野鳥におけるウエストナイル熱の血清疫学調査と中和試験の評価 (2009)
  • 著者名/発表者名: 村田亮、橋口和明、好井健太朗、野田寛、伊川綾恵、原田祐里、苅和宏明、高島郁夫
  • 学会等名: 第148回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: とりぎん文化会館(鳥取)
  • 年月日: 2009-09-27
• [学会発表] 日本国内におけるダニ媒介性脳炎の血清疫学調査 (2009)
  • 著者名/発表者名: 持舘景太、好井健太朗、大森優紀、千葉裕美子、村田亮、真田崇弘、前田潤子、苅和宏明、高島郁夫
  • 学会等名: 第148回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: とりぎん文化会館(鳥取)
  • 年月日: 2009-09-27
• [学会発表] ダニ媒介性脳炎ウイルスSofjin株のレプリコンの構築 (2009)
  • 著者名/発表者名: 高野絢子、大森優紀、好井健太朗、石塚万理子、村田亮、苅和宏明、高島郁夫
  • 学会等名: 第148回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: とりぎん文化会館(鳥取)
  • 年月日: 2009-09-27
• [学会発表] オムスク出血熱ウイルスの感染性cDNAの構築 (2009)
  • 著者名/発表者名: 好井健太朗、苅和宏明、高島郁夫、Holbrook Micae
  • 学会等名: 第148回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: とりぎん文化会館(鳥取)
  • 年月日: 2009-09-27
• [学会発表] メキシコの野生げっ歯類が保有するハンタウイルスの遺伝子解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉田喜香、苅和宏明、高野絢子、戸谷理詩、宮下大輔、Saasa Ngonda、瀬戸隆弘、真田崇弘、吉川佳佑、好井健太朗、吉松組子、有川二郎、高島郁夫
  • 学会等名: 第148回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: とりぎん文化会館(鳥取)
  • 年月日: 2009-09-27
• [学会発表] Development of diagnostic methods applicable to various serotypes of hantavirus infections. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kariwa H, Sanada T, Seto T, Yoichi Tanikawa, Kentaro Yoshii, Kumiko Yoshimatsu, Jiro Arikawa, Ikuo Takashima
  • 学会等名: 43^<rd> Joint Working Conference on Viral Diseases, US-Japan Cooperative medical Science Program
  • 発表場所: Wistar Auditorium, Philadelphia, PA, USA
  • 年月日: 2009-07-22
• [学会発表] ハンタウイルス感染症の疫学 (2009)
  • 著者名/発表者名: 苅和宏明
  • 学会等名: 日本臨床ウイルス学会
  • 発表場所: 高知市文化プラザかるぽーと(高知)
  • 年月日: 2009-06-14
• [学会発表] 極東ロシアのげっ歯類からのハンタウイルスの分離とウイルス遺伝子の性状解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉川佳佑、苅和宏明、瀬戸隆弘、真田崇弘、石塚万里子、吉松組子、有川二郎、Lenid Ivanov、好井健太朗、高島郁夫
  • 学会等名: 第147回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 栃木県総合文化センター(宇都宮)
  • 年月日: 2009-04-03