浸透圧性脱髄モデルにおける脱髄修復機構の分子病態的解析

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21500349
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 椙村 益久 名古屋大学, 医学部附属病院, 助教 (50456670)
• 研究分担者: 大磯 ユタカ 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40203707)
• キーワード: グリア細胞 / レーザーマイクロダイセクション / 脱髄

研究概要

(1)浸透圧性脱髄症候群(ODS)ラットモデルの作成と脳切片標本の作製
ODSモデルにおいて血清Naの急速補正後神経症状を観察・評価し補正1-2日後の脱髄早期、補正4-5日後の脱髄後期のそれぞれの脳を摘出し、脳切片標本を作製した。
(2)病理解析装置連動型レーザーマイクロダイセクションシステムを用いた目的の細胞の採取
脱髄早期・後期と経時的に、かつ脱髄部・非脱髄部という領域別に、ミクログリアのマーカーである抗ED1抗体を用いた免疫染色によって病理学的に解析・分別されたミクログリアをレーザーマイクロダイセクションシステムを用いて採取することに成功した。
(3)遺伝子解析
(2)の方法で採取した各々のミクログリアよりRNAを抽出し、定量的RT-PCR法によってIFN-γ, TNF-α, IL-1β, 及びiNOSなどの各種炎症性サイトカインやLIF, ciliary neurotrophic factor (CNTF), brain-derived neurotrophic factor (BDNF), nerve growth factor (NGF), glial cell line-derived neurotrophic factor (GDNF), neurotrophin-3(NT-3)などの神経栄養因子の遺伝子発現を解析した。興味深いことに、脱髄部位を含む全脳の脳切片から抽出したRNAを用いた結果と一部異なった結果が得られミクログリア特異的な遺伝子発現プロファイルを得ることができた。さらに脱髄部と非脱髄部とのミクログリアでは異なった遺伝子発現が認められ、より詳細な病態との関与を示唆する結果が得られた。
(4)蛋白発現解析
(3)で遺伝子発現が認められた因子の蛋白発現を免疫組織細胞化学法を用い共焦点レーザー顕微鏡による観察し、ミクログリア特異的な蛋白発現を確認中である。

研究成果

• [雑誌論文] Activation of vasopressin neurons leads to phenotype progression in amouse model for familial neurohypophysial diabetes insipidus. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hiroi M, Morishita Y, Hayashi M, Ozaki N, Sugimura Y, Nagasaki H, Shiota A, Oiso Y, Arima H.
  • 雑誌名: Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol 298 ページ: 486-493
  • 査読あり
• [雑誌論文] Central adiponectin functions to inhibit arginine vasopressin release in conscious rats. (2009)
  • 著者名/発表者名: Iwama S, Sugimura Y, Murase T, Hiroi M, Goto M, Hayashi M, Arima H, Oiso Y.
  • 雑誌名: J Neuroendocrinol. 21 ページ: 753-759
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prevention of neural tube defects in fetuses of streptozotocin-induced diabetic mice by loss of function of inducible nitric oxide synthase (2009)
  • 著者名/発表者名: Sugimura Y, Murase T, Oyama K, Uchida A, Sato N, Hayasaka S, Kano Y, Takagishi Y, Hayashi Y, Oiso Y, Murata Y
  • 雑誌名: Diabetologia 52 ページ: 962-971
  • 査読あり
• [雑誌論文] α-Lipoic acid reduces congenital malformations in the offspring of diabetic mice. (2009)
  • 著者名/発表者名: SugimuraY, Murase T, Kobayashi K, Oyama K, Hayasaka S, Kanou Y, Oiso Y, Murata Y.
  • 雑誌名: Diabetes/Metabolism Research and Reviews. 25 ページ: 287-294
  • 査読あり
• [雑誌論文] Folic Acid Prevents Congenital Malformations in the Offspring of Diabetic Mice. (2009)
  • 著者名/発表者名: Oyama K, Sugimura Y, Murase T, Uchida A, Hayasaka S, Oiso Y, Murata Y.
  • 雑誌名: Endocr J 56 ページ: 29-37
  • 査読あり
• [雑誌論文] (2009)
  • 著者名/発表者名: 椙村益久 大磯ユタカ
  • 雑誌名: 高ナトリウム血症 内分泌・糖尿病科(科学評論社) ページ: 393-400
• [学会発表] The differing roles of nitric oxide synthase isoforms in osmotic demyelination syndrome in rats (2009)
  • 著者名/発表者名: Sugimura Y, Murase T, Takefuji S, Takagi H, Suzuki H, Iwama S, Takagishi Y, Arima H, Sawada M, Oiso Y, Murata Y
  • 学会等名: Neuroscience 2009
  • 発表場所: シカゴ
  • 年月日: 2009-10-18
• [学会発表] Protective effects of minocycline on osmotic demyelination syndrome in rats (2009)
  • 著者名/発表者名: Suzuki H, Sugimura Y, Iwama S, Suzuki H, Arima H, Sawada M, Oiso Y
  • 学会等名: Neuroscience 2009
  • 発表場所: シカゴ
  • 年月日: 2009-10-18
• [学会発表] The differing pathological effects of nitric oxide synthase isoforms in osmotic demyelination syndrome in rats (2009)
  • 著者名/発表者名: Sugimura Y, Murase T, Takefuji S, Takagi H, Iwama S, Suzuki H, Takagishi Y, Arima H, Sawada M, Oiso Y, Murata Y
  • 学会等名: The 32nd ANNUAL MEETING OF THE JAPAN NEUROSCIENCE SOCIETY
  • 発表場所: 名古屋国際会議場(愛知県)
  • 年月日: 2009-09-17
• [学会発表] Hyponatremia-Induced Osteoporosis (2009)
  • 著者名/発表者名: J.Barsony, Sugimura, Y.Manigrasso, H.H.Tam, Q.Xu, Y.Tian, D.Adams, E.A.Carter, H.E.Regnick, J.G.Verbalis
  • 学会等名: 8th World Congress on Neurohypoohysial Hormones
  • 発表場所: 北九州国際会議場(福岡県)
  • 年月日: 2009-09-07
• [学会発表] Proinflammatory and Neurotrophic Responses of Microglia and Astrocytes in a Rat Model for Osmotic Demyelination Syndrome (2009)
  • 著者名/発表者名: Iwama S, Sugimura Y, Suzuki H, Suzuki H, Arima H, Muratay, Sawada M, Oiso Y
  • 学会等名: 8th World Congress on Neurohypoohysial Hormones
  • 発表場所: 北九州国際会議場(福岡県)
  • 年月日: 2009-09-05
• [学会発表] Minocycline prevents osmotic demyelination by inhibiting the activation of microglia in rats (2009)
  • 著者名/発表者名: Suzuki H, Sugimura Y, Iwama S, Suzuki H, Arima H, Sawada M, Oiso Y
  • 学会等名: 8th World Congress on Neurohypoohysial Hormones
  • 発表場所: 北九州国際会議場(福岡県)
  • 年月日: 2009-09-05
• [学会発表] リンパ球性漏斗下垂体炎のバイオマーカー開発-プロテオーム解析による病因自己抗原分子の検索- (2009)
  • 著者名/発表者名: 椙村益久
  • 学会等名: 第36回日本神経内分泌学会
  • 発表場所: 北九州国際会議場(福岡県)
  • 年月日: 2009-09-05
• [学会発表] プロテオミクスによるリンパ球性漏斗下垂体後葉炎の病因自己抗原の検索 (2009)
  • 著者名/発表者名: 岩間信太郎, 椙村益久, 加藤琢哉, 鈴木陽之, 榎本篤, 有馬寛, 大磯ユタカ
  • 学会等名: 第36回日本神経内分泌学会
  • 発表場所: 北九州国際会議場(福岡県)
  • 年月日: 2009-09-04
• [学会発表] SIADHモデルラットにおいてミノサイクリンは浸透圧性脱髄の発症・進展を防止する (2009)
  • 著者名/発表者名: 鈴木陽之, 椙村益久, 岩間信太郎, 鈴木弘美, 有馬寛, 澤田誠, 大磯ユタカ
  • 学会等名: 第36回日本神経内分泌学会
  • 発表場所: 北九州国際会議場(福岡県)
  • 年月日: 2009-09-04
• [学会発表] アディポネクチンによるバゾプレシン分泌抑制作用機序の検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 岩間信太郎, 椙村益久, 村瀬孝司, 有馬寛, 大磯ユタカ
  • 学会等名: 第82回日本内分泌学会学術総会
  • 発表場所: 群馬県民会館(群馬県)
  • 年月日: 2009-04-25
• [学会発表] 浸透圧性脱髄症候群ラットモデルにおけるミノサイクリンの検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 鈴木陽之, 椙村益久, 岩間信太郎, 有馬寛, 大磯ユタカ
  • 学会等名: 第82回日本内分泌学会学術総会
  • 発表場所: 群馬県民会館(群馬県)
  • 年月日: 2009-04-23