小胞体タンパク質ミツグミン23の機能解析

2011 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21500382
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 西 美幸 京都大学, 薬学研究科, 研究員 (60183894)
• キーワード: 筋小胞体 / カルシウム / ミツグミン23

研究概要

申請者らが以前に発見し報告したミツグミン23(MG23)は小胞体と核膜に発現する機能不明な23kDaの膜タンパク質である。MG23は様々な細胞系で検出され、骨格筋、心臓、脳といった興奮性組織で発現が顕著である。本研究はMG23の機能解明を目指す基礎研究であるが、得られる成果は医薬領域での病態解明や創薬への応用の可能性を秘めている。
MG23の機能解明を目指して、イーストによる組み換えMG23タンパク質の大量培養、精製の系を立ち上げた。His-tag及びMG23特異抗体による2段階のアフィニティー精製により純度の高い精製タンパク質が得られた。まずはじめに化学架橋剤を用いて何量体かを調べたところ6量体構造が示唆された。そこでこの情報と精製タンパク質の電子顕微鏡観察像を用いて単粒子解析を行い、MG23は6回対称構造で中心に穴のあいたボウル様の構造をとることを予想した。さらに、精製タンパク質の電気生理的解析により、電位依存性のカリウム、カルシウム透過能を備えた陽イオンチャンネルであることを見出した。MG23の細胞死との関連について解析を進行中である。複数の培養細胞でcDNA強制発現を実施し恒常的発現細胞株の樹立を遂行中である。

研究成果

• [雑誌論文] Endogenously determined restriction of food intake overcomes excitation-contraction uncoupling in JP45KO mice with aging (2012)
  • 著者名/発表者名: Delbono, O., Messi M. L., Wang, Z., Treves, S., Mosca, B., Bergamelli, L., Nishi, M., Takeshima, H., Shi H., Xue B. & Zorzato, F
  • 雑誌名: Exp. Gerontol 巻: 4 ページ: 304-316
  • DOI: DOI:10.1016/j.exger.2012.01.004
  • 査読あり
• [雑誌論文] TRIC-A channels in vascular smooth muscle conyribute to blood pressure maintenance (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamazaki D.…Nishi M., 他23名
  • 雑誌名: Cell Metabolism 巻: 14 ページ: 231-241
  • DOI: 10.1016/j.cmet.2011.05.011
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mitsugumin 23 forms a massive bowl-shaped assembly and cation-conducting channel (2011)
  • 著者名/発表者名: Ventri E.…Nishi M., 他9名
  • 雑誌名: Biochemistry 巻: 50 ページ: 2623-2632
  • DOI: 10.1021/bi1019447
  • 査読あり
• [学会発表] Upregulation of calcium influx via Cavl.1 in skeletal muscle fibers from JP45 calsequestrin 1 double knock out mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Zorsat F.…Nishi M., 他5名
  • 学会等名: Biophysical Society 56th annual meeting
  • 発表場所: サンディエゴ(アメリカ)
  • 年月日: 2012-02-26
• [備考]
  • URL: http://www.pharm.kyoto-u.ac.jp/biochem/