ピロリジル転移リボ核酸合成酵素を利用した非天然型アミノ酸の蛋白質への導入

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21550167
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生体関連化学
• 研究機関: 独立行政法人理化学研究所
• 研究代表者: 柳沢 達男 独立行政法人理化学研究所, システム研究チーム, 研究員 (10450420)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• キーワード: バイオテクノロジー / 非天然型アミノ酸 / タンパク質 / クロスリンカー / ケミカルバイオロジー / 翻訳 / ピロリジン / アミノアシルtRNA合成酵素

研究概要

研究代表者はピロリジルtRNA合成酵素(PylRS)/tRNA^<Pyl>システムを用いて新規のクロスリンカー含有リジン誘導体、TmdZLysをタンパク質に部位特異的に導入することに成功した。従来のクロスリンカー含有アミノ酸に比べて、TmdZLysを導入したタンパク質は細胞内ターゲットであるタンパク質と広い範囲でUVクロスリンクが可能であった。TmdZLys導入系を用いてタンパク質間相互作用ネットワークを解明することが期待される。

研究成果

• [雑誌論文] (2012)
  • 著者名/発表者名: Yanagisawa, T., Hino, N., Iraha, F., Mukai, T., Sakamoto, K., Yokoyama, S.
  • 雑誌名: Mol. BioSyst 巻: 8 ページ: 1131-1135
  • 査読あり
• [雑誌論文] (2011)
  • 著者名/発表者名: Mukai, T., Yanagisawa, T., Ohtake, K., Wakamori, M., Adachi, J., Hino, N., Sato, A., Kobayashi, T., Hayashi, A., Shirouzu, M., Umehara, T., Yokoyama, S., Sakamoto, K.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun 巻: 411 ページ: 757-761
  • 査読あり
• [学会発表] 終止コドンUAGがセンス・コドンに再定義された大腸菌株を用いた非天然型アミノ酸のタンパク質への導入 (2011)
  • 著者名/発表者名: 坂本健作、安達仁朗、若森昌聡、白水美香子、梅原崇史、柳沢達男、向井崇人、横山茂之
  • 学会等名: 第6回無細胞生命科学研究会
  • 発表場所: 兵庫
  • 年月日: 2011-11-16
• [学会発表] 大腸菌、昆虫細胞、動物細胞を用いた非天然型アミノ酸のタンパク質への部位特異的導入法の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 坂本健作、向井崇人、大竹和正、伊良波史枝、林明子、佐藤文、樋野展正、柳沢達男、脇山素明、横山茂之
  • 学会等名: 第10回日本蛋白質科学会年会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2010-06-17
• [学会発表] 翻訳後修飾アミノ酸のタンパク質への部位特異的導入 (2009)
  • 著者名/発表者名: 坂本健作、小林隆嗣、柳沢達男、横山茂之
  • 学会等名: 第4回無細胞生命科学研究会
  • 発表場所: 岐阜
  • 年月日: 2009-11-16
• [産業財産権] 新規非天然型アミノ酸とその応用に関する研究: N(epsilin)-(p-trifluoromethyldiazirinylbenzylo xycarbonyl) lysine
  • 発明者名: Yokoyama, S., Sakamoto, K., Yanagisawa, T., Hino, N., F. Iraha
  • 権利者名: Yokoyama, S., Sakamoto, K., Yanagisawa, T., Hino, N., F. Iraha
  • 産業財産権番号: 特願、2011-253307