| 研究概要 |
イネの収量性向上を目指すためにはソース機能の改良が必要である.出穂期までに葉鞘に畜積したデンプンはイネ穎果の登熟のための重要なソースであるが,蓄積したデンプンの分解ならびに転流過程の仕組みについてはほとんどわかっていない.本申請課題では,デンプン分解酵素としてβ-アミラーゼに着目し,出穂後のイネ葉鞘における機能の解析を進めている.イネゲノム上にはβ-アミラーゼをコードすると予想される遺伝子が9つ存在するが,そのうちOsBAM2とOsBAM3に関して本年度は解析を進めた.これら2つのHis-tag融合タンパク質を大腸菌で発現させ,活性を測定した結果,OsBAM2とOsBAM3はβ-アミラーゼとして機能していることが明らかになった.さらに,葉鞘におけるこれら2つの遺伝子転写レベルをリアルタイムRT-PCRによって調査した.その結果,出穂後の葉鞘においてOsBAM2とOsBAM3の転写レベルの変動は異なっており,OsBAM3の転写レベルはデンプン分解が活発に生じている時期に高く維持されていることが示された.以上ことから,OsBAM3は葉鞘において機能しているβ-アミラーゼの一つであると考えられた.また,OsBAM3とOsBAM2の機能解析をさらに進めるため,それら2つの遺伝子に関する形質転換イネを作出しつつある.それに加えて,OsBAM2とOsBAM3の細胞内局在性について調査するため,GFPとの融合タンパク質の一過性発現用ベクターを構築した.
|
