|
イネの収量性向上のためにはソース機能の仕組みを理解することが不可欠である。本研究課題では、登熟に対するソースの一つである葉鞘蓄積デンプンの分解機構を解明し、登熟の向上へとつなげる知見を得ることを目的としている。デンプン分解酵素であるβ-アミラーゼのうち、OsBAM2とOsBAM3の細胞内局在性を明らかにするため、それらとGFPとのキメラタンパク質をタマネギ表皮細胞で一過性発現させたところ、OsBAM2とOsBAM3ともにプラスチドに局在することが示された。これら2つのタンパク質の機能解析を進めるため、OsBAM2とOsBAM3のRNAiによるノックダウン系統の作出を進めている。現在、OsBAM3のノックダウン系統では、野生型よりもOsBAM3の転写レベルが有意に低下した系統が数系統得られたため、そのT2世代の育成ならびに表現型の解析を進めている。また、連携研究者である(財)岩手生物工学研究センターの寺内研究部長とともに、同センターが所有しているイネ品種ひとめぼれの突然変異系統群からTILLING法によりOsBAM2とOsBAM3のコード領域に塩基の置換が生じた変異系統を選抜した。その中から、OsBAM3の基質結合部位であるグルタミン酸がバリンへと置換した系統が一つ得られたため、来年度はその系統の表現型を解析する予定である。
イネゲノムアノテーションデータベースからα-グルカンリン酸化酵素ならびにマルトース輸送体をコードすると予想される遺伝子、OsGWD1とOsMEX1の情報を得た。リアルタイムRT-PCRによりイネ葉鞘における転写レベルの変化を解析した結果、出穂前の早い段階から葉鞘のデンプン含量の減少が生じているインド型品種では、OsGWD1の転写レベルが日本型品種と比べて有意に高いことが明らかになった。来年度はOsGWD1の機能解析を進めるための形質転換体の作出を進める。
|
