| 研究概要 |
本研究では、炭素-硫黄(C-S)結合の形成反応と開裂反応に関連の一連の酵素類の構造と機能解析を行うことによって、環状含硫化合物のC-S結合に関連の酵素類に関する世界で初めてのライブラリーを構築する。構築されたライブラリーは将来、自然界で重要な役割を演ずる有用な環状含硫化合物の微生物代謝や環境浄化などの応用的研究に有用な基本情報と技術を提供するライブラリーとなることを本研究の目的とする。具体的な酵素類としてはC-S結合の形成に至る酵素系の例として、今まで全く報告がない好熱性微生物のBio酵素類(ビオチン生合成系酵素類)を、一方C-S結合の開裂反応に至る酵素系の例としてDsz酵素類(DBT脱硫代謝系の酵素類)を対象とする。
今年度は、Bio酵素類に関しては、バイオインフォマティクスの手法から,各種好熱菌の遺伝子配列データベースより大腸菌のbioFと相同性の高い遺伝子を検索した結果、すでに見いだしている高度好熱菌Thermus thermophilus以外にビオチン生合成系酵素を持つと推定される好熱菌を5種見出した。そこで今年度はBioFについて,これらのゲノムからbioFホモログ遺伝子をクローニングし,組換え酵素を調製した。
一方、Dsz酵素類については、DszCがインドールからインジゴ誘導体を合成する新しい有用な機能(基質特異性)を見いだした。
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