ダイサーおよび2本鎖RNA結合タンパク質を利用したウイルス抵抗性植物の作出

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21580411
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用分子細胞生物学
• 研究機関: 東京農工大学
• 研究代表者: 福原 敏行 東京農工大学, 大学院・農学研究院, 教授 (90228924)
• 連携研究者: 夏秋 知英 宇都宮大学, 農学部, 教授 (10134264) ; 森山 裕充 東京農工大学, 大学院・農学研究院, 准教授 (20392673)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• キーワード: 細胞機能 / ウイルス / RNA干渉 / 2本鎖RNA / ダイサー

研究概要

シロイヌナズナのダイサー遺伝子(DCL1-4)および2本鎖RNA結合タンパク質遺伝子(DRB1-5)を過剰発現した系統について、カブモザイクウイルスを用いてウイルス接種実験を行った。その結果、DRB2, DRB3, DRB4遺伝子を過剰発現した系統では、病徴がマイルドになるといった傾向が見られた。さらに、シロイヌナズナの芽生え由来の粗抽出液を用いてダイサー活性(2本鎖RNA切断活性)を簡便に評価する実験系を確立した。

研究成果

• [雑誌論文] Specific requirement of DRB4, a dsRNA-binding protein, for the in vitro dsRNA-cleaving activity of Arabidopsis Dicer-like 4 (2011)
  • 著者名/発表者名: Fukudome A., Kanaya A., Egami M., Nakazawa Y., Hiraguri A., Moriyama H. and Fukuhara T
  • 雑誌名: RNA 巻: 17(4) ページ: 750-760
  • DOI: DOI:10.1261/rna.2455411
  • 査読あり
• [雑誌論文] An Arabidopsis RNase III-like protein, AtRTL2, cleaves double-stranded RNA in vitro (2011)
  • 著者名/発表者名: Kiyota E., Okada R., Kondo N., Hiraguri A., Moriyama H. and Fukuhara T
  • 雑誌名: Journal of Plant Research 巻: 124 ページ: 405-414
  • DOI: DOI:10.1007/s10265-010-0382-x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bell pepper endornavirus : molecular and biological properties and occurrence in the genus Capsicum (2011)
  • 著者名/発表者名: Okada R., Kiyota E., Sabanadzovic S., Moriyama H., Fukuhara T., Saha P., Roossinck M. J., Severin A. and Valverde R. A.
  • 雑誌名: Journal of General Virology 巻: 92(11) ページ: 2664-2673
  • DOI: DOI:10.1099/vir.0.034686-0
  • 査読あり
• [雑誌論文] The presence of double-stranded RNAs in Alternaria alternata Japanese pear pathotype is associated with its morphological changes (2011)
  • 著者名/発表者名: Fuke K., Takeshita K., Aoki N., Fukuhara T., Egusa M., Kodama M. and Moriyama H
  • 雑誌名: Journal of General Plant Pathology 巻: 77 ページ: 248-252
  • DOI: DOI:10.1007/s10327-011-0315-0
  • 査読あり
• [雑誌論文] Knockdown of OsDCL2 in rice negatively affects maintenance of the endogenous dsRNA virus, Oryza sativa endornavirus (2010)
  • 著者名/発表者名: Urayama S., Moriyama M., Aoki N., Nakazawa Y., Okada R., Kiyota E., Miki D., Shimamoto K. and Fukuhara T
  • 雑誌名: Plant and Cell Physiology 巻: 51(1) ページ: 58-67
  • DOI: DOI:10.1093/pcp/pcp167
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mycoviruses related to chrysovirus affect vegetative growth in the rice blast fungus Magnaporthe oryzae (2010)
  • 著者名/発表者名: Urayama S., Kato S., Suzuki Y., Aoki N., Le Minh T., Arie T., Teraoka T., Fukuhara T. and Moriyama H
  • 雑誌名: Journal of General Virology 巻: 91(12) ページ: 3085-3094
  • DOI: DOI:10.1099/vir.0.025411-0
  • 査読あり
• [学会発表] 福原敏行シロイヌナズナのダイサーDCL3およびDCL4の生化学的解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 長野秀昭、福留章仁、中澤悠宏、平栗章弘、森山裕充
  • 学会等名: 第53回日本植物生理学会年会
  • 発表場所: 京都産業大学
  • 年月日: 20120300
• [学会発表] Involvement of DRB proteins in cell-to-cell spread of silencing signal (2011)
  • 著者名/発表者名: Takahashi T, Usui T, Fukudome A, Moriyama H and Fukuhara T
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 20111200
• [学会発表] イネ内在性2本鎖RNAレプリコン(Oryza sativa endornavirus)の遺伝様式と宿主RNAサイレンシング機構との関係 (2011)
  • 著者名/発表者名: 福原敏行、浦山俊一、岡田亮、森山裕充
  • 学会等名: 日本遺伝学会第83回大会シンポジウム
  • 発表場所: 京都大学
  • 年月日: 20110900
• [学会発表] The role of dsRNA-binding protein DRB4 in the Dicer activity of DCL4 complex in Arabidopsis thaliana (2011)
  • 著者名/発表者名: Fukudome A., Kanaya A., Egami M., Nakazawa Y., Hiraguri A., Moriyama H. and Fukuhara T
  • 学会等名: The 16th Annual Meeting of the RNA Society
  • 発表場所: 京都国際会議場
  • 年月日: 20110600
• [学会発表] in vitro dicing activity of Arabidopsis Dicer-like 4 requiring a dsRNA-binding protein DRB4 (2011)
  • 著者名/発表者名: Fukudome A., Kanaya A., Egami M., Nakazawa Y., Hiraguri A., Moriyama H. and Fukuhara T
  • 学会等名: International Plant RNA Workshop 2011
  • 発表場所: 理研横浜研究所
  • 年月日: 20110600
• [図書] Endornavirus, Unassigned Genus (2012)
  • 著者名/発表者名: Fukuhara T.
  • 総ページ数: 1989-1992
  • 出版者: Springer
• [図書] Family Endornaviridae (2012)
  • 著者名/発表者名: Fukuhara T. and Gibbs M. J
  • 総ページ数: 519-521
  • 出版者: Ninth Report of the International Committee on Taxonomy of Viruses
• [図書] Detection of long and short double-stranded RNAs (2011)
  • 著者名/発表者名: Fukuhara T., Urayama S., Okada R., Kiyota E. and Moriyama H
  • 総ページ数: 129-144
  • 出版者: Humana Press