| 研究課題/領域番号 |
21590113
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| 研究機関 | 山梨大学 |
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研究代表者 |
藤室 雅弘 山梨大学, 大学院・医学工学総合研究部, 准教授 (20360927)
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| 研究分担者 |
平 敬宏 山梨大学, 大学院・医学工学総合研究部, 教授 (70197036)
王賀 理恵 山梨大学, 医学部, 助手 (00160432)
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| キーワード | 創薬 / ウイルス / 抗ウイルス薬 / 感染症 / リン酸化 / 酵素 / 基質特異性 |
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| 研究概要 |
カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス(KSHV)は、感染者の免疫不全時に、B細胞性リンパ腫やカポジ肉腫等の日和見腫瘍を起こす。また、KSHVに対して有効な抗ウイルス剤は見つかっていないことから、抗KSHV薬の開発が急務とされている。抗ヘルペスウイルス薬ACVやGCVなどの核酸代謝拮抗薬のウイルス選択性はKSHVの発現するチミジンリン酸化酵素(ORF21)やリン酸基転移酵素(ORF36)によるモノリン酸化効率と推測されるが、その真偽は不明である。また、KSHVのORF21とORF36の生理的基質が明らかになれば、それらめ情報は抗KSHV薬設計や開発を行なうための有益な情報となる。そこで、我々はKSIWのORF21とORF36の基質特異性解析と機能解析を行った。その結果、KS田に対して増殖抑制活性を持つ核酸代謝拮抗化合物としてGCVとソリブジンを見出した。さらに、HeLa細胞にKSHV ORF21を恒常的に発現させたORF21-HeLa細胞を用いて、GCVの殺細胞活性を測定した結果、ORF21はGCVをモノリン酸化してHeLa細胞のDNA複製を阻害していた。これらの結果より、核酸を骨格とする抗KSHV薬の開発において、KSHVのORF21はウイルス特異性を薬物が発揮するための絶好の標的分子となることが明らかとなった。一方で、KSHVのORF36の機能解析により、ORF36はpRbと結合し、さらにpRbをリン酸化することを明らかにした。また、pRbのリン酸化は、E2FのpRbからの遊離を促進しE2Fの転写活性化を促進していることが明らかにされた。
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