| 研究課題/領域番号 |
21590267
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
助川 淳 東北大学, 大学院・医学系研究科, 准教授 (30187687)
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| 研究分担者 |
柳澤 輝行 東北大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (90133941)
守屋 孝洋 東北大学, 大学院・薬学研究科, 准教授 (80298207)
倉増 敦朗 山口大学, 大学院・医学系研究科, 准教授 (90302091)
佐藤 岳哉 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助教 (10312696)
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| キーワード | 受容体 / 細胞内輸送 / 細胞表面発現 |
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| 研究概要 |
本研究は、ヒスタミンH3受容体が、遺伝子から転写・翻訳された後、小胞体から細胞表面に輸送されるトラフィッキングの分子メカニズムを明らかにする事を目的としている。
前年度までに、H3受容体カルボキシ末端に、CLIC4、DRiP78以外に、新たにPhLP、CLIC6と呼ばれる細胞由来タンパク質が結合する事が明らかになった。まずPhLPに関して、CLIC4やDRiP78と同様に、H3受容体の細胞表面発現量に影響を及ぼすかどうかを、培養細胞系における過剰発現系用いて測定したが、影響は現れなかった。この事は、PhLPが、H3受容体の細胞表面発現トラフィッキングの律速段階に関与していない事を示唆する。CLIC4が、H3受容体の細胞表面発現を増加させることについて、細胞表面H3受容体数の増加とH3受容体を介したシグナルの増加の間に解離がある事が明らかになった。この事は、CLIC4がH3受容体の細胞表面への輸送を促進する際、H3受容体とヘテロ3量体Gタンパク質からなる情報伝達複合体のアセンブリーを阻害し、強制的に受容体だけを細胞表面に輸送する作用を持っていることを示唆している。DRiP78及び、CLIC6については、インビトロの系だけでなく、培養細胞内において、H3受容体との相互作用を確認するために、二分子蛍光相補(BiFC)システムを利用して計測したが、細胞内での相互作用はこの系においては観測されなかった。この事は、これらのタンパク質とH3受容体との細胞内での相互作用が、いわゆるシャペロン様の一過性で短時間の相互作用であることを示唆している。
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