| 研究課題/領域番号 |
21590304
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| 研究機関 | 金沢大学 |
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研究代表者 |
渡辺 琢夫 金沢大学, 医学系, 准教授 (40303268)
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| 研究分担者 |
山本 博 金沢大学, 医学系, 教授 (00115198)
棟居 聖一 金沢大学, 医学系, 助教 (10399040)
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| キーワード | RAGE / protease / shedding / cAMP / phosphodiesterase |
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| 研究概要 |
RAGE (receptor for advanced glycation endproducts)を介するシグナリングにおいて、プロテアーゼ等が果たす役割を明らかにすることを目的とし、研究実施計画に基づいて研究を遂行した結果、以下の成果を得た。
1.PDE阻害剤のim vivo効果の検討
ある種のphosphodiestrease (PDE)阻害剤を用いることによって細胞内のcAMP量を増加させることができる。この作用がin vivoのレベルで有効であり、これにより特定の組織におけるRAGEシグナルを抑制しうることを確認した後、このPDE阻害剤のRAGE関連疾患に対する治療薬としての可能性を、マウスの腸疾患モデルを用いて検討した。この結果、当該薬剤が病態の進行を抑制する可能性が示された。
2.RAGEの細胞内動態の検討
RAGEの2種類のスプライシング・バリアントである膜型RAGEと分泌型RAGEのそれぞれにHalo Tag^<TM>を付加した組換えタンパクを培養細胞において強制発現させる系を確立した。この培養細胞系を用いて蛍光標識Halo Tag^<TM>リガンドによるパルスチェイスラベリングを行い、共焦点レーザー蛍光顕微鏡下で観察することにより、生細胞内におけるRAGEタンパクの動態をリアルタイムに追跡することが可能になった。
以上のように、本年度は、PDE阻害剤を用いてcAMPシグナルを修飾することによりRAGE関連疾患の病態を抑制できる可能を示すと共に、薬剤によるRAGEの細胞内動態の変化をリアルタイムに解析することが可能なシステムを確立した。
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