胃癌におけるマイクロRNA発現異常の解析

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21590398
• 研究機関: 大分大学
• 研究代表者: 守山 正胤 大分大学, 医学部, 教授 (90239707)
• 研究分担者: 塚本 善之 大分大学, 医学部, 助教 (00433053)
• キーワード: microRNA / マイクロアレイ / 胃癌 / アポトーシス / アレイCGH / ゲノムコピー数異常 / real-time PCR

研究概要

22年度は異常発現候補遺伝子として抽出されたmicroRNAの機能解析を実施した。
1)マイクロアレイを用いた発現解析によって、33microRNAが発現上昇し、39microRNAが発現低下することを発見した。発現低下する者の中でmiR-375が最も顕著に発現低下するmicroRNAであった。
2)miR-375が発現低下した胃癌細胞に遺伝子導入して、その発現を補うと癌細胞がアポトーシスをおこして死滅した。興味深いことにmiR-375を遺伝子導入した胃癌細胞では、PDK1の発現低下を認めさらに、Actのリン酸化が低下することを見いだした。
3)次にmiR-375の分子標的を同定するためにmiR-375を遺伝子導入した胃癌細胞としなかった同じ胃癌細胞のトランスクリプトーム解析を行って、発現低下する遺伝子を絞り込み、かつmiR-375の標的配列をそのmRNAに持っている遺伝子をスクリーニングして、14-3-3-3zetaがその候補であることを突き止めた。
4)実際に胃癌細胞で14-3-3zetaをsiRNAでノックダウンすると確かにcaspase活性の上昇を認めた。
5)以上のことからmiR-375は胃癌の癌抑制遺伝子である可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Overexpression of miR-210, a downstream molecule of HIF1α, causes centrosome amplification in renal carcinoma cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Chisato Nakada, Yoshiyuki Tsukamoto, Keiko Matsuura, Tung Lam Nguyen, Naoki Hijiya, Tomohisa Uchida, Fuminori Sato, Hiromitsu Mimata, Seto Masao, Masatsugu Moriyama
  • 雑誌名: Journal of Pathology 巻: (印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] MicroRNA-375 is down-regulated in gastric carcinomas and regulates cell survival by targeting PDK1 and 14-3-3ζ. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yoshiyuki Tsukamoto, Chisato Nakada, Tsuyoshi Noguchi, Masato Tanigawa, Nguyen Lam Tung, Tomohisa Uchida, Naoki Hijia, Keiko Matsuura, Toshio Fujioka, Masao Seto, Masatsugu Moriyama
  • 雑誌名: Cancer Research 巻: 70 ページ: 2339-2349
  • 査読あり