記憶免疫の制御機構と樹状細胞の役割の解明

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21590546
• 研究機関: 独立行政法人理化学研究所
• 研究代表者: 藤井 眞一郎 独立行政法人理化学研究所, 免疫細胞移植戦略研究ユニット, ユニットリーダー (10392094)
• キーワード: 記憶免疫 / 自然免疫 / NKT細胞 / 免疫監視 / 腫瘍免疫

研究概要

本研究は、免疫系を効率的に活性化し,抗原特異的な記憶をいかに持続させるかという命題は、感染症、癌などに対する生体防御法を開発するうえで重要である。これまで記憶T細胞の研究は感染症の分野で精力的に進められてきてきたが、腫瘍免疫における細胞関連抗原に対する研究は、抗原量が低いなどの問題から、殆ど解明されてない。我々の開発した「NKTリガンドを提示させた腫瘍細胞」による免疫誘導の系は、長期に渡り腫瘍を排除できることを確認しており、その機構を解明する。
当該年度は、まず自然免疫を契機に誘導される獲得免疫誘導後から記憶免疫について、gp100クラスI抗原に特異的に反応するTCRトランスジェニックマウス由来のgp100特異的T細胞(Pmel)を用い、NKTリガンドを提示させたB16メラノーマワクチンで免疫後のT細胞免疫動態を解析した。「NKTリガンドを提示させた腫瘍細胞」を用いたシステムは、抗原にCFAやIFAを用いた方法に比べて遥かに強い免疫応答が長期に続く。この細胞アジュバントで誘導される一次免疫とセントラルメモリー(T_<CM>)とエフェクターメモリー(T_E)両者の記憶T細胞の相関について、(a)記憶T細胞のクローンサイズをフローサイトメトリー(FACS)を用いて解析し、(b)増幅能(BrdUの取り込み能)・サイトカイン産生能(real time PCR、ELISA、ELISPOT法)を解析した。その結果、T細胞の活性化が生じた後、記憶T細胞サブセット(T_<EM>とT_<CM>)のクローンサイズに関して経時的に比率が変化することにより、最終的にTCMが優位となる推移を辿ることが判明した。更に抗原再刺激による二次応答後の記憶免疫の解析では、NKT欠損マウスにおいても、抗原刺激により記憶T細胞の増幅が起こることが判明した。今後、継続して二次応答機構を明らかにする。

研究成果

• [雑誌論文] CD169-Positive Macrophages Dominate Antitumor Immunity by Cross presenting Dead Cell-Associated Antigens. (2011)
  • 著者名/発表者名: Asano K, Nabeyama A, Miyake Y, Qiu CH, Kurita A, Tomura M, Kanagawa O, Fujii S, Tanaka M
  • 雑誌名: Immunity 巻: 34 ページ: 85-95
  • 査読あり
• [雑誌論文] A set of genes associated with the interferon-γ response of lung cancer patients undergoing α-galactosylceramide-pulsed dendritic cell therapy. (2010)
  • 著者名/発表者名: Okita K, Motohashi S, Shinnakasu R, Nagato K, Yamasaki K, Sato Y, Kitamura H, Hijikata A, Yamashita M, Shimizu K, Fujii S, Ohara O, Taniguchi M, Sakaida I, Nakayama T
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: 101 ページ: 2333-40
  • 査読あり
• [雑誌論文] Murine induced pluripotent stem cells can be derived from and differentiate into natural killer T cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Watarai H, Fujii S, Yamada D, Rybouchkin A, Sakata S, Nagata Y, Iida-Kobayashi M, Sekine-Kondo E, Shimizu K, Shozaki Y, Sharif J, Matsuda M, Mochiduki S, Hasegawa T, Kitahara G, Endo TA, Toyoda T, Ohara O, Harigaya K, Koseki H, Taniguchi M.
  • 雑誌名: J Clin Invest. 巻: 120 ページ: 2610-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient cross-presentation of soluble exogenous antigens introduced into dendritic cells using a weak-based amphiphilic peptide. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ikeuchi N, Futami J, Hosoi A, Noji S, Kurachi M, Ueha S, Fujii S, Yamada H, Matsushima K, Moriyasu F, Kakimi K.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 392 ページ: 217-22
  • 査読あり
• [雑誌論文] Human leukemic cells loaded with alpha-galactosylceramide (alpha-GalCer) activate murine NKT cells in situ (2010)
  • 著者名/発表者名: Shimizu K, Hidaka M, Bickham K, Moriwaki M, Fujimoto K, Kawano F, Fujii S.
  • 雑誌名: Int J Hematol. 巻: 92 ページ: 152-60
  • 査読あり
• [雑誌論文] Induction of Thl-biased cytokine production by alpha-carba-GalCer, a neoglycolipid ligand for NKT cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Tashiro T, Sekine-Kondo E, Shigeura T, Nakagawa R, Inoue S, Omori-Miyake M, Chiba T, Hongo N, Fujii S, Shimizu K, Yoshiga Y, Sumida T, Mori K, Watarai H, Taniguchi M.
  • 雑誌名: Int Immunol 巻: 22 ページ: 319-28
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of functional NKT cells in vitro from embryonic stem cells bearing rearranged invariant Valpha14-Jalpha18 TCRalpha gene. (2010)
  • 著者名/発表者名: Watarai H, Rybouchkin A, Hongo N, Nagata Y, Sakata S, Sekine E, Dashtsoodol N, Tashiro T, Fujii S, Shimizu K, Mori K, Masuda K, Kawamoto H, Koseki H, Taniguchi M.
  • 雑誌名: Blood 巻: 115 ページ: 230-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Application of NKT cells in immunotherapy. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ishii Y, Motohashi S, Shimizu K, Nakayama Taniguchi M, Fujii S
  • 雑誌名: Curr Immunol review 巻: 6 ページ: 109-115
  • 査読あり
• [雑誌論文] Adjuvant activity mediated by iNKT cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Fujii S, Motohashi S, Shimizu K, Nakayama T, Yoshiga Y, Taniguchi M
  • 雑誌名: Semin Immunol 巻: 22 ページ: 97-102
  • 査読あり
• [雑誌論文] 人工アジュバントベクター細胞の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 清水佳奈子、朝倉三貴、藤井眞一郎
  • 雑誌名: Medical Science Digest 巻: 36 ページ: 10-13
• [学会発表] Antigen mRNA-transfected, fibroblasts loaded with invariant NKT cell ligand act as artificial adjuvant vector cells (AAVC) to link innate and adaptive immunity (2011)
  • 著者名/発表者名: Shimizu K, Asakura M, Sugahara H, Shinga J, Fujii S
  • 学会等名: Keystone Symposia "NK and NKT Cell Biology : Specificity and Redundancy of Innate Responses"
  • 発表場所: Brechenridge, Colorado, USA
  • 年月日: 2011-10-01
• [学会発表] Antigen mRNA-transfected, fibroblasts loaded with invariant NKT cell ligand act as adjuvant vector to target in vivo dendritic cells (DCs) (2010)
  • 著者名/発表者名: Fujii S, Asakura M, Shimizu K.
  • 学会等名: 11th International Symposium on Dendritic Cells in Fundamental and Clinical Immunology
  • 発表場所: Lugano, Switzerland
  • 年月日: 2010-09-28
• [学会発表] Immunotherapy utilizing iNKT cells to target in vivo dendritic cells (DCs). (2010)
  • 著者名/発表者名: Fujii, S.
  • 学会等名: Global COE symposium on current and future directions of dendritic cell biology and immunoth erapy.
  • 発表場所: Tokyo, Japan
  • 年月日: 2010-06-29
• [学会発表] iNKT cell-triggered in vivo DC targeting immunotherapy. "Recent advances in immune regulation and immunotherapy" (2010)
  • 著者名/発表者名: Fujii, S
  • 学会等名: NZ-RIKEN-CHIBA Joint Workshop.
  • 発表場所: Yokohama, Japan
  • 年月日: 2010-06-14
• [図書] Natural killer T cells : setting the balance in the regulation of tumor immunity
  • 著者名/発表者名: Fujii S, Shimizu K
  • 出版者: DC-based immunotherapy targeting NKT cells(In press)
• [産業財産権] iPS細胞由来アロNKT細胞を用いた免疫療法およびそのためのNKT細胞由来iPS細胞のバンキング (2010)
  • 発明者名: 谷口克、古関明彦、渡会浩志、藤井眞一郎
  • 権利者名: 理化学研究所
  • 出願年月日: 2010-12-02
  • 外国