急性冠症候群発症におけるヘリコバクター・ピロリ感染症の関与とその機序

2011 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21590629
• 研究機関: 高知大学
• 研究代表者: 杉浦 哲朗 高知大学, 教育研究部・医療学系, 教授 (50171145)
• 研究分担者: 竹内 啓晃 高知大学, 教育研究部・医療学系, 講師 (90346560) ; 公文 義雄 高知大学, 教育研究部・医療学系, 准教授 (40215033) ; 高田 淳 高知大学, 教育研究部・医療学系, 教授 (90206748)
• キーワード: 急性冠症候群 / 血小板凝集・活性化 / ヘリコバクター・ピロリ / 菌体膜蛋白 / 作製抗体(抗1pp20抗体) / 血小板活性化機序

研究概要

ピロリ菌関連血小板減少性紫斑病の解析から、血小板凝集・活性化を誘導する菌体成分の存在を明らかにした。そこで、血小板凝集・活性化を病態に有する急性冠症候群の発症機序におけるピロリ菌(感染)の関与を解明するため、そのピロリ菌体成分を検索した。その結果、幾つかの候補成分から細胞膜構成成分である1pp膜蛋白を同定した。さらに、リコンビナント融合蛋白(1pp-His蛋白)を作製し、ウサギ免疫後、抗1pp抗体(ポリクローナル抗体)を作成し、特異性は免疫沈降後ウエスタンブロットで確認した。免疫沈降は血小板と1pp-His蛋白を反応後、抗血小板抗体で沈降し、抗1pp抗体を使用した(抗His抗体でも確認)。結果、作製した抗1pp抗体は目的蛋白である1pp膜蛋白と反応し他成分との交差反応は殆ど認めなかった。
次に1pp-His蛋白を使用して血小板凝集試験を行った結果、菌体破砕物よりも1pp-His蛋白の方が高い血小板凝集を示し、本菌体成分が血小凝集・活性化能を有する事を証明すると共に濃度依存性に活性亢進する可能性および菌体内の活性阻害成分の存在も示唆された。
現在、動物感染実験(スナネズミ)より本菌体成分の血中移行性を検証している。また、既存の抗血小板凝集阻害作用を有する治療薬剤あるいは化合物を用いて本菌体成分の血小板活性作用機序を解析中である。さらに、患者検体にて本菌体成分の関与について詳細な解析を実施し急性冠症候群におけるピロリ感染症の病態解明に繋げる予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Effiect of Helicobacter pylori cdrA on IL-8 secretions and NF-κB activation (2012)
  • 著者名/発表者名: Takeuchi H, Zhang Y, Israel DA, Peek Jr.RM, Kamioka M, Yanai H, Morimoto N, Sugiura T
  • 雑誌名: World Journal Of Gastroenterology 巻: 18 ページ: 425-434
  • 査読あり
• [雑誌論文] Superoxide dismutase (SOD) activity of Helicobacter pylori per se from 158 clinical isolates and the characteristics (2012)
  • 著者名/発表者名: Morishita K, Takeuchi H, Morimoto N, Shimamura T, Kadota Y, Tsuda M, Taniguchi T, Ukeda H, Yamamoto T, Sugiura T
  • 雑誌名: Microbiol.Immunol. 巻: (In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Antibacterial activities of refined deep seawater on Helicobacter pylori (2012)
  • 著者名/発表者名: Kawada M, Takeuchi H, Con SA, Yamamoto E, Yasukawa T, Nakagawa K, Ikegami Y, Sugiura T
  • 雑誌名: J.Medical Microbiology & Diagnosis 巻: (In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of Pioglitazone on Arterial Baroreflex Sensitivty and Sympathetic Nerve Activity in Patients with Acute Myocaxdial Infarction and Type2 Diabetes Mellitus (2012)
  • 著者名/発表者名: Yokoe H, Yuasa F, Yuyama R, Murakawa K, Miyasaka Y, Yoshida S, Tsujimoto S, Sugiura T, Iwasaka T
  • 雑誌名: J Cardiovasc Pharmacol 巻: (In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vivo anti-Helicobacter pylori activity of Chinese chive (Allium tuberosum) (2011)
  • 著者名/発表者名: Kudo H., Takeuchi H, Shimamura T, Sugiura, T, Ukeda H
  • 雑誌名: Food Science and technology research 巻: 17 ページ: 505-513
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vitro antimicrobial activity of Aminoreductone against pathogenic bacteria methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) (2011)
  • 著者名/発表者名: Trang VT, Takeuchi H, Kudo H, Kashiwagi T, Katsuno S, Shimamura T, Sugiura T, Ukeda H
  • 雑誌名: Journal of Agricultural and Food Chemistry 巻: 59 ページ: 8953-8960
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of various doses of aspirin on platelet activity and endothelial function (2011)
  • 著者名/発表者名: Furuno T, Yamasaki F, Yokoyama T, Sato K, Sato T, Doi Y, Sugiura T
  • 雑誌名: Heart Vessels 巻: 26 ページ: 267-273
  • 査読あり
• [雑誌論文] Neutrophil infiltration and oxidant-production in human atherosclerotic carotid plaques (2011)
  • 著者名/発表者名: Hosokawa T, Kumon Y, Kobayashi T, Enzan H, Nishioka Y, Yuri K, Wakiguchi H, Sugiura T
  • 雑誌名: Histol Histopathol 巻: 26 ページ: 1-11
  • 査読あり
• [雑誌論文] The effects of clonidine on arterial baroreflex sensitivity and cardiopulmonary barorefex control of sympathetic nerve activity in patients with left ventricular dysfunction (2011)
  • 著者名/発表者名: Yuasa F, Kawamura A, Yokoe H, Yoshida S, Murakawa K, Sugiura T, Iwasaka T
  • 雑誌名: Clin Physiol Funct Imaging 巻: 31 ページ: 94-100
  • 査読あり
• [雑誌論文] Combined measurements of cardiac troponin I and brain natriuretic peptide are useful for predicting adverse outcomes in hypertrophic cardiomyopathy (2011)
  • 著者名/発表者名: Kubo T, Kitaoka H, Okawa M, Yamanaka, S, Hirota T, Baba Y, Hayato K, Yamasaki N, Matsumura Y, Yasuda N, Sugiura T, Doi YL
  • 雑誌名: Circulation Journal 巻: 75 ページ: 919-926
  • 査読あり
• [雑誌論文] Decreased plasma level of vitamin C in chronic kidney disease : comparison between diabetic and non-diabetic patients (2011)
  • 著者名/発表者名: Takahashi N, Morimoto S, Okigaki M, Seo M, Someya K, Morita T, Matsubara H, Sugiura T, Iwasaka T
  • 雑誌名: Nephrol Dial Transplant 巻: 26 ページ: 1252-1257
  • 査読あり
• [雑誌論文] Acute-phase serum amyloid A is present in human colostrum and milk (2011)
  • 著者名/発表者名: Kumon Y, Yasuoka Y, Yamanaka S, Wada A, Takeuchi H, Sugiura T
  • 雑誌名: Amyloid 巻: 1 ページ: 6-8
  • 査読あり
• [学会発表] Superoxide dismutase activity of Helicobacter pylori from 158 clinical is olates (2012)
  • 著者名/発表者名: 森下慶子、竹内啓晃、島村智子、森本徳仁、門田陽集、受田浩之、杉浦哲朗、山本哲也
  • 学会等名: 第85回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 長崎ブリックホール
  • 年月日: 20120327-20120329
• [学会発表] Platelet-binding outer membrane proteins of Helicobacter pylori mediate platelet aggregation (2012)
  • 著者名/発表者名: 森本徳仁、竹内啓晃、門田陽集、西田愛恵、公文義雄、杉浦哲朗
  • 学会等名: 第85回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 長崎ブリックホール
  • 年月日: 20120327-20120329
• [学会発表] Helicobacter pyloriの細胞分裂制御に関与しているMinシステムの解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 門田陽集、竹内啓晃、森本徳仁、公文義雄、杉浦哲朗
  • 学会等名: 第85回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 長崎ブリックホール
  • 年月日: 20120327-20120329
• [学会発表] 微細藻Dunaliella salinaの有する抗ピロリ菌活性 (2012)
  • 著者名/発表者名: 工藤勇人、柏木丈拡、青木章敏、島村智子、山口裕司、竹中裕行、竹内啓晃、杉浦哲朗、受田浩之
  • 学会等名: 日本農芸化学会京都大会
  • 発表場所: 京都(ウェスティン都ホテル京都)
  • 年月日: 20120322-20120326
• [学会発表] 血小板結合性を有するピロリ菌膜蛋白と血小板凝集・活性化 (2012)
  • 著者名/発表者名: 森本徳仁、竹内啓晃、門田陽集、西田愛恵、公文義雄、杉浦哲朗
  • 学会等名: 第57回日本臨床検査医学会中国・四国支部総会
  • 発表場所: 岡山大学
  • 年月日: 20120204-20120205
• [学会発表] ニラ由来抗菌性物質の抗Helicobacter pylori活性 (2011)
  • 著者名/発表者名: 工藤勇人、竹内啓晃、杉浦哲朗、島村智子、受田浩之
  • 学会等名: 第58回日本臨床検査医学会学術集会
  • 発表場所: 岡山コンベンションセンター
  • 年月日: 20111117-20111120
• [学会発表] 海洋深層水より調製した高ミネラル水による腫瘍細胞増殖抑制効果の関与蛋白絞り込み (2011)
  • 著者名/発表者名: 端口佳宏、中川光司、池上良成、竹内啓晃、杉浦哲朗
  • 学会等名: 第15回海洋深層水利用学会全国大会
  • 発表場所: 静岡(伊藤商工会議所)
  • 年月日: 20111117-20111118
• [学会発表] Helicobacter pyloriの細胞分裂制御に関与するMinシステムの解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 門田陽集,他
  • 学会等名: 第58回日本臨床検査医学会学術集会
  • 発表場所: 岡山コンベンションセンター
  • 年月日: 20111117-19
• [学会発表] rep-PCRを原理とした細菌タイピングシステムDiversiLabによるHelicobacter pyloriのgenotyping (2011)
  • 著者名/発表者名: 森本徳仁、竹内啓晃、森澤美恵、西田愛恵、吉川智絵、森本みゆき、森田珠恵、門田陽集、小倉克巳、近藤孝美、杉浦哲朗
  • 学会等名: 第43回日本臨床検査自動化学会総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 20111006-20111008
• [学会発表] Functional analysis of minC, D and E genes of Helicobacter pylori (2011)
  • 著者名/発表者名: Kadota Y, Takeuchi H, Morimoto N, Nishida Y, Kumon Y, Sugiura T
  • 学会等名: International Union of Micrrobiological Societies 2011 Congress
  • 発表場所: Sapporo convention center, Japan
  • 年月日: 20110906-20110910
• [学会発表] Superoxide dismutase (SOD) of Helicobacter pylori clinical isolates from patients with gastroduodenal diseases (2011)
  • 著者名/発表者名: Morishita K, Takeuchi H, Shimamura T, Morimoto N, Kadota Y, Tsuda M, Taniguchi T, Ukeda H, Sugiura T, Yamamoto T
  • 学会等名: International Union of Microbiological Societies 2011 Congress
  • 発表場所: Sapporo convention center, Japan
  • 年月日: 20110906-20110910
• [学会発表] Evaluation of Natural product, Refined Deep Seawater, for Helicobacter pylori colonization and intestinal flora condition, and its application (2011)
  • 著者名/発表者名: Takeuchi H, Kawada M, Tai H, Yamamoto E, Yasukawa T, Nakagawa K, Morimoto N, Ikegami Y, Sugiura T
  • 学会等名: World Congress of Microbes-2011 : 1st Annual Symposium of Bacteriology and Infection
  • 発表場所: Beijing International Convention Center, China
  • 年月日: 20110730-20110801
• [学会発表] 遺伝子タイピングシステムDiversiLab^[○!R]によるHelicobacter pyloriゲノム解析の評価 (2011)
  • 著者名/発表者名: 森本徳仁、竹内啓晃、西田愛恵、森澤美恵、吉川智絵、森田珠恵、森本みゆき、小倉克巳、近藤孝美、杉浦哲朗
  • 学会等名: 第17回日本ヘリコバクター学会学術集会
  • 発表場所: 富山国際会議場
  • 年月日: 20110624-20110625
• [学会発表] Anti-Helicobacter pylori activity of Chinese chive (Allium tuberosum) (2011)
  • 著者名/発表者名: Kudo H, Takeuchi H, Shimamura T, Kashiwagi T, Sugiura T, Ukeda H
  • 学会等名: 111^<th> ASM Gceneral Meeting
  • 発表場所: New Orleans, LA USA (Convention center)
  • 年月日: 20110621-20110624
• [学会発表] The clinical efficacy of refined deep seawater (RDSW) on colonzation of Helicobacter pylori (2011)
  • 著者名/発表者名: Kawada M, Nakagawa K, Ikegami Y, Takeuchi H, Sugiura T
  • 学会等名: 111^<th> ASM General Meeting
  • 発表場所: New Orleans, LA USA (Convention center)
  • 年月日: 20110521-20110524
• [学会発表] In vitro Antimicarobial Activity of Aminoreductone against Pathogenic Bacteria Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) (2011)
  • 著者名/発表者名: Trang VT, Takeuchi H, Kudo H, Shimamura T, Katsuno S, Kashiwagi T, Sugiura T, Ukeda H
  • 学会等名: 111^<th> ASM Greneral Meeting
  • 発表場所: New Orleans, LA USA (Convention center)
  • 年月日: 20110521-20110524
• [学会発表] Repetitive-sequence-based PCR法を用いた口腔カンジダ菌のGenotypingに関する検討 (2011)
  • 著者名/発表者名: 森下慶子、中村裕一郎、成川玄、高嶋まゆ子、竹内啓晃、杉浦哲朗、山本哲也
  • 学会等名: 第65回NPO法人日本口腔科学学会学術集会
  • 発表場所: 東京(タワーホール船堀)
  • 年月日: 20110421-20110422
• [図書] パーフェクトガイド検査値事典 (2011)
  • 著者名/発表者名: 杉浦哲朗, (監修中原一彦)
  • 総ページ数: 648
  • 出版者: 総合医学社
• [図書] ポケットの中の心電図症例集 (2011)
  • 著者名/発表者名: 土居忠文(著), 杉浦哲朗(監修)
  • 総ページ数: 180
  • 出版者: 株式会社幸千回