| 研究課題/領域番号 |
21590636
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| 研究機関 | 兵庫医科大学 |
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研究代表者 |
菊池 正二郎 兵庫医科大学, 医学部, 講師 (70381960)
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| 研究分担者 |
松井 毅 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 講師 (10452442)
落合 登志哉 京都府立医科大学, 医学研究科, 講師 (30311913)
大辻 英吾 京都府立医科大学, 医学研究科, 教授 (20244600)
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| キーワード | 腫瘍検査学 |
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| 研究概要 |
【研究の目的】新規早期大腸癌血清診断法の確立
【本年度の研究実績】
(1)Dermokineアイソフォーム特異的抗体の作製と精製:これまでにELISA固相化抗体として使用している抗Dermokine-β,γ抗体はN末端22-167aaを認識しているが、検出に用いているHRP標識抗体は分泌型Dermokineの高次構造を認識している。そのためにELISAIの安定性に若干問題があった。計画通りにHEK293細胞などにDermokine-βあるいはγをトランスフェクションして複数のクローンを確保してイムノブロットによるスクリーニングを行い適切なクローンを選択した。培養上清中に分泌された抗Dermokine抗体はプロテインAセファロースにより精製して複数のモノクローナル抗体を選択した。また、ウサギに対してエピトープの異なる複数の精製ペプチドを皮下注射してポリクローナル抗体も作製した。、
(2)癌におけるDermokineアイソフォームの発現パターン解析:大腸癌組織(早期癌20症例と進行癌20症例)と大腸腺腫における免疫組織学的解析による局在解析を行った。また、大腸癌細胞株(20種類)におけるDermokineの各アイソフォーム(α/β/γ/δ/ε)のmRNA発現状況をreal-time RT-PCR法にて行い、Dermokineの発現解析を行った。これらの結果を解析して、現在論文投稿中である
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