ヒト血漿中グランザイム3は炎症反応のマーカーとなるか

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21590669
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 衛生学
• 研究機関: 日本医科大学
• 研究代表者: 稲垣 弘文 日本医科大学, 医学部, 講師 (50213111)
• 研究分担者: 平田 幸代 日本医科大学, 医学部, 助教 (40322515) ; 川田 智之 日本医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (00224791) ; 大塚 俊昭 日本医科大学, 医学部, 准教授 (80339374)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2012
• キーワード: グランザイム3 / モノクローナル抗体 / 酵素免疫測定法 / 細胞障害性T細胞 / バイオマーカー / 炎症

研究概要

大腸菌に産生させたヒトグランザイム3を用いてモノクローナル抗体を作成し、それらを用いて新しい測定法(サンドウィッチELISA法)を確立した。一方、ヒトのリンパ球が試験管内において産生するグランザイム3が、不活性型前駆体であることが明らかとなったため、前駆体に特異的なモノクローナル抗体を新たに作成し、活性型と前駆体を分別定量することを可能にした。健常人血漿中のグランザイム3の濃度は非常に低く、ELISA法の検出限界以下であった。

研究成果

• [学会発表] 抗ヒトGranzyme3モノクローナル抗体による酵素活性の上昇 (2012)
  • 著者名/発表者名: 稲垣弘文、平田幸代、清水孝子、川田智之
  • 学会等名: 第85回日本生化学会大会
  • 発表場所: 福岡(マリンメッセ福岡)
  • 年月日: 2012-12-16
• [学会発表] FRET基質を用いたヒトGranzyme3の反応速度論的解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 平田幸代、稲垣弘文、清水孝子、川田智之
  • 学会等名: 第85回日本生化学会大会
  • 発表場所: 福岡(マリンメッセ福岡)
  • 年月日: 2012-12-16
• [学会発表] 抗ヒトGranzyme3モノクローナル抗体の酵素活性への影響 (2012)
  • 著者名/発表者名: 稲垣弘文、平田幸代、清水孝子、川田智之
  • 学会等名: 日本薬学会第132年会
  • 発表場所: 札幌(北海道大学)
  • 年月日: 2012-03-29
• [学会発表] FRET基質ライブラリを用いたヒトGranzyme3とGranzymeAの活性比較 (2012)
  • 著者名/発表者名: 平田幸代、稲垣弘文、清水孝子、川田智之
  • 学会等名: 日本薬学会第132年会
  • 発表場所: 札幌(北海道大学)
  • 年月日: 2012-03-29
• [学会発表] ヒト前駆体型Granzyme3に特異的なsandwichELISAの確立 (2011)
  • 著者名/発表者名: 稲垣弘文、平田幸代、清水孝子、川田智之
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都(京都国際会館)
  • 年月日: 2011-09-23
• [学会発表] ヒトGranzyme3の基質アミノ酸配列の検索 (2011)
  • 著者名/発表者名: 平田幸代、稲垣弘文、清水孝子、川田智之
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都(京都国際会館)
  • 年月日: 2011-09-23
• [学会発表] ヒトGranzyme3の基質アミノ酸配列の検索 (2011)
  • 著者名/発表者名: 平田幸代、稲垣弘文、清水孝子、川田智之
  • 学会等名: 日本薬学会第131年会
  • 発表場所: 静岡(ツインメッセ静岡)
  • 年月日: 2011-03-30
• [学会発表] Expression of granzyme 3 protein in human peripheral blood lymphocytes analyzed by flow cytometry. (2010)
  • 著者名/発表者名: Inagaki, H., Hirata, Y., Shimizu, T., Kobayashi, M., Li, Q., Kawada, T.
  • 学会等名: 14th International Congress of Immunology
  • 発表場所: Kobe (Kobe International Exhibition Hall)
  • 年月日: 2010-08-23
• [学会発表] Establishment of a new sandwich ELISA system for human granzyme 3. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hirata, Y., Inagaki, H., Shimizu, T., Kobayashi, M., Kawada, T.
  • 学会等名: 14th International Congress of Immunology
  • 発表場所: Kobe (Kobe International Exhibition Hall)
  • 年月日: 2010-08-23
• [学会発表] Lymphokine-activatedkiller(LAK)細胞によるGranzyme3の産生 (2010)
  • 著者名/発表者名: 稲垣弘文、平田幸代、清水孝子、小林麻衣子、川田智之
  • 学会等名: 日本薬学会第130年会
  • 発表場所: 岡山(桃太郎アリーナ)
  • 年月日: 2010-03-30
• [学会発表] 活性型ヒトGranzyme3に特異的なsandwich ELISAの確立 (2010)
  • 著者名/発表者名: 平田幸代、稲垣弘文、清水孝子、川田智之
  • 学会等名: 日本薬学会第130年会
  • 発表場所: 岡山(桃太郎アリーナ)
  • 年月日: 2010-03-30