| 研究概要 |
昨年度にひきつづき、食道での陽イオンチャンネルTransient receptor potential vanilloid(TRP)の一つであるtype4(TRPV4)の生理的機能について研究をすすめた。対象としてC57BLワイルドタイプマウスを用い、食道を採取し、RT-PCR法、in situ hybridization法、免疫組織化学法を施行し、TRPV4のmRNA、タンパクの発現と局在を調べた。昨年度の結果に追加するものとして、in situ hybridization法では、食道上皮基底層から中間層にもTRPV4の発現、局在を認めた。今年度はその機能解析として、マウス食道上皮初代培養細胞を用いてカルシウムイメージング法を行った。細胞内へのカルシウム流入は、低浸透圧およびTRPV4の選択的アゴニストである4α-phorbol 12,13didecanoateの投与により有意に亢進し、vanilloidレセプターアンタゴニストのRutherium redにより有意に抑制された。また低浸透圧刺激、4α-PDDでみられた細胞内へのカルシウム流入の亢進は、PH5の酸性条件下では有意に抑制された。これらの結果は、TRPV4の生理的機能は酸性条件下で低下することを示している。今年度の検討でTRPV4と酸との関連性が明らかになったことは、現在注目をあびている胃食道逆流症の、病態解明にむすびつく重要な知見であると考えられた。
|
