HCV蛋白とインターフェロン系との相互作用のFRET/BRET解析

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21590831
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 藤田 めぐみ (田坂 めぐみ) 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 特任助教 (50510369)
• 研究分担者: 朝比奈 靖浩 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (00422692) ; 東 正新 東京医科歯科大学, 医学部附属病院, 講師 (10376783) ; 坂本 直哉 北海道大学, 医学系研究科, 教授 (10334418)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2012
• キーワード: HCV レプリコン / インターフェロン / RIG-I / HCV-NS4B / STING

研究概要

C型肝炎ウイルス(HCV)のNS4B蛋白、インターフェロン(IFN)シグナル分子であるCardif、STINGの蛋白-蛋白間相互作用について検討した。その結果、CardifとHCV-NS4Bの間に弱い結合が見られた。一方で、STINGについても同様に解析した結果、BiFC解析で強い結合を認め、NS4BとSTINGの相互作用が示された。同じ結果を免疫沈降法、免役染色法でも確認下。以上の結果より、NS4BとSTINGは直接結合し、STINGを介したIFN発現誘導を抑制していることを示した。

研究成果

• [雑誌論文] Hepatitis C virus NS4B protein targets STING and abrogates RIG-I-mediated type-I interferon-dependent innate immunity (2013)
  • 著者名/発表者名: Nitta S, Sakamoto N, Nakagawa M, Kakiuma S, Mishima K, Kusano-Kitazume A, Kiyohashi K, Murakawa M,Nishimura-Sakurai Y, Azuma S,Tasaka-Fujita M, Asahina Y, Yoneyama M, Fujita T, Watanabe M
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 57(1) ページ: 46-58
  • DOI: doi:10.1002/hep.26017
  • 査読あり
• [雑誌論文] Wnt5a Signaling Mediates Biliary Differentiation of Fetal Hepatic Stem/Progenitor Cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Kakinuma S, Kiyohashi K, Kamiya A, Sakamoto N, Nitta S, Yamanaka H, YoshinoK, Fujiki J, Murakawa M, Kusano-Kitazume A, Shimizu H, Okamoto R, Azuma S, Nakagawa M, Asahina Y, Tanimizu N, Kikuchi A, Nakauchi H, and *WatanabeM
  • 雑誌名: Hepatology 巻: (in press)
  • DOI: doi:10.1002/hep.26293
  • 査読あり
• [雑誌論文] α-fetoprotein levels afterinterferon therapy and risk of hepatocarcinogenesis in chronic hepatitis C (2013)
  • 著者名/発表者名: Asahina Y, Tsuchiya K, Nishimura T, Muraoka M, Suzuki Y, Tamaki N, Yasui Y, Hosokawa T, Ueda K, Nakanishi H, Itakura J, Takahashi Y, Kurosaki M, Enomoto N, Nakagawa M, Kakinuma S, Watanabe M,Izumi N
  • 雑誌名: Hepatology 巻: (in press)
  • DOI: doi:10.1002/hep.26442
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of novel N-(morpholine-4-carbonyloxy) amidine compounds as potent inhibitors against hepatitis C virus replication (2012)
  • 著者名/発表者名: Kusano-Kitazume A, Sakamoto N, Okuno Y, Sekine-Osajima Y, Nakagawa M, Kakinuma S, Kiyonashi K, Nitta S, Murakawa M, Azuma S, Nishimura-Sakurai Y, Hagiwara M, Watanabe M
  • 雑誌名: Antimicrob Agent Chemother 巻: 56(3) ページ: 1315-23
  • DOI: doi:10.1128/AAC.05764-11
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analysis of interferon signaling by infectious hepatitis C virus clones with substitutions of core amino acids 70 and 91 (2011)
  • 著者名/発表者名: Funaoka Y, Sakamoto N, Suda G, Itsui Y, Nakagawa M, Kakinuma S, Watanabe T, Nitta S, Kitazume A, Kiyohashi K, Murakawa M, Azuma S, Tsuchiya K,Watanabe M
  • 雑誌名: J Virol 巻: 85 ページ: 5986-94
  • DOI: doi:10.1128/JVI.02583-10
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibitory effect of a triterpenoid compound, with or without interferon-alpha, on hepatitis C virus infection (2011)
  • 著者名/発表者名: Watanabe T, Sakamoto N, Nakagawa M, Kakinuma S, Itsui Y, Nishimura-Sakurai Y, Ueyama M, Funaoka Y, Kitazume A, Nitta S, Kiyohashi K, Murakawa M, Azuma S, Tsuchiya K, Oooka S, Watanabe M
  • 雑誌名: Antimicrob AgentChemother 巻: 55 ページ: 2537-45
  • DOI: doi:10.1128/AAC.01780-10
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum interleukin-6 levels correlate with resistance to treatment of chronic hepatitis C infection withpegylated-interferon-α2b plus ribavirin (2011)
  • 著者名/発表者名: Ueyama M, Nakagawa M, Sakamoto N,Onozuka I, Funaoka Y, Watanabe T, Nitta S, Kiyohashi K, Kitazume A, Murakawa M, Nishimura-Sakurai Y, Sekine-Osajima Y, Itsui Y, Azuma S, Kakinuma S, Watanabe M and the Ochanomizu-Liver Conference Study Group
  • 雑誌名: Antivir Ther 巻: 16 ページ: 1081-1091
  • DOI: doi:10.3851/IMP1864
  • 査読あり
• [雑誌論文] Studies on virus kinetics using infectious fluorescence-tagged hepatitis C virus cell culture (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto M, Sakamoto N, Nakamura T, Itsui Y, Nakagawa M, Nishimura-Sakurai Y, Kakinuma S, Azuma S, Kato T, Wakita T, Watanabe M
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 41 ページ: 258-269
  • DOI: doi:10.1111/j.1872-034X.2010.00771.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Association of IL28B variants with response to pegylated-interferon alpha plus ribavirin combination therapy reveals intersubgenotypic differences between genotypes 2a and 2b (2011)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto N, Nakagawa M, Tanaka Y, Sekine-Osajima Y, Ueyama M, Kurosaki M, Nishida N, Tamori A, Nishimura-Sakurai Y, Itsui Y, Azuma S, Kakinuma S, Hige S, Ito Y, Tanaka E, Hiasa Y, Izumi N, Tokunaga K, Mizokami M, Watanabe M, and the Ochanomizu-Liver Conference Study Group
  • 雑誌名: J Medical Virol 巻: 83 ページ: 871-878
  • DOI: doi:10.1002/jmv.22038
  • 査読あり
• [雑誌論文] Antiviral effects of the interferon-induced protein guanylate binding protein 1 and its interaction with the hepatitis C virus NS5Bprotein (2009)
  • 著者名/発表者名: Itsui Y, Sakamoto N, Kakinuma S, Nakagawa M, Sekine-Osajima Y, Tasaka-Fujita M, Nishimura-Sakurai Y, Suda G, Karakama Y, Mishima K, Yamamoto M, Watanabe T, Ueyama M, Funaoka Y, Azuma S, Watanabe M
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 50(6) ページ: 1727-37
  • DOI: doi:10.1002/hep.23195
  • 査読あり
• [学会発表] HCV-NS4B protein binds STINGand blocks the RIG-I mediated IFN pathway (2012)
  • 著者名/発表者名: Sayuri Nitta, Naoya Sakamoto, Mina Nakagawa, Sei Kakinuma, Akiko Kusano Kitazume, Miyako Murakawa, Megumi Tasaka-Fujita, Yasuhiro Asahina, Mamoru Watanabe
  • 学会等名: 10th single topic conference
  • 発表場所: Tokyo
  • 年月日: 20121121-22
• [学会発表] HCV NS4B蛋白によるRIG-I誘導性Interferon発現経路の抑制機構についての解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 新田沙由梨、 坂本直哉 、吉野耕平、村川美也子、北詰晶子、幾世橋佳、東正新、柿沼晴、中川美奈、朝比奈靖浩、渡辺守
  • 学会等名: JDDW2012
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20121010-13
• [学会発表] HCV-NS4B blocks the RIG-I mediated IFN pathway through targeting of STING (2012)
  • 著者名/発表者名: Sayuri Nitta, Naoya Sakamoto, Mina Nakagawa, Sei Kakinuma, Kako Mishima, Akiko Kusano-Kitazume, Kei Kiyohashi, Miyako Murakawa, Kohei Yoshino, Megumi Tasaka-Fujita, Yasuhiro Asahina, Mamoru Watanabe
  • 学会等名: 19^<th> International Symposium of Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: Venice, Italy
  • 年月日: 20121005-09
• [学会発表] IFN不応例における宿主自然免疫応答とHCV逃避機構 (2012)
  • 著者名/発表者名: 新田沙由梨,朝比奈靖浩,坂本直哉,村川美也子,北詰晶子,幾世橋佳,東正新,柿沼晴,中川美奈,渡辺守
  • 学会等名: 第77回日本インターフェロン・サイトカイン学会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20120621-22
• [学会発表] HCVNS4B蛋白はSTINGを介しRIG-I誘導性 Interferon産生応答を抑制する (2012)
  • 著者名/発表者名: 新田沙由梨、 坂本直哉、吉野耕平、村川美也子、北詰晶子、幾世橋佳、東正新、柿沼晴、中川美奈、 朝比奈靖浩、渡辺守
  • 学会等名: 第48回肝臓学会総会
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 20120607-08
• [学会発表] HCVgenotype 1b株キメラウイルスを用いた HCV core領域アミノ酸70/91変異株の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 藤田めぐみ 、脇田隆字、加藤孝宣
  • 学会等名: 第48回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 2012-06-08
• [学会発表] IL-6-mediated intersubgenotypic variation of interferon sensitivity in hepatitis C virus genotype 2a/2b chimeric clones (2011)
  • 著者名/発表者名: Suda G, Sakamoto N, Itsui Y, Nakagawa M, Tasaka-Fujita M, Funaoka Y, Watanabe T, Nitta S, Kiyohashi K, Azuma S, Kakinuma S, Tsuchiya K, Imamura M, Hiraga N, Chayama K, Watanabe M
  • 学会等名: 62th. Annual Meeting of American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: San Francisco
  • 年月日: 2011-11-04
• [学会発表] HCV-NS4B targets STING and abrogates RIG-I-mediated type-I interferon-dependent innate immune response (2011)
  • 著者名/発表者名: Nitta S, Sakamoto N, Nakagawa M, Kakinuma S, Mishima K, Kusano-KitazumeA, KiyohashiK, Murakawa M, Yoshino K, Tasaka-Fujita M, Watanabe M
  • 発表場所: Seattle
  • 年月日: 2011-09-08
• [学会発表] HCV-NS4B蛋白とIFN発現シグナル分子との分子間相互作用の解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 新田沙由梨、 坂本直哉、藤田めぐみ、北詰晶子、幾世橋佳、船岡祐介、渡辺貴子、植山真由美、小野塚泉、東正新、中川美奈、柿沼晴、渡辺守
  • 学会等名: 第48回日本消化器免疫学会
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 2011-07-21
• [学会発表] HCV-NS4B蛋白とRIG-I惹起性IFN産生シグナル関連蛋白との分子間相互作用の解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 新田沙由梨、坂本直哉、藤田めぐみ、柿沼晴、村川美也子、北詰晶子、幾世橋佳、船岡祐介、渡辺貴子、植山真由美、小野塚泉、櫻井幸、中川美奈、東正新、渡辺守
  • 学会等名: 第47回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-06-02
• [学会発表] Antiviral effects of interferon-induced proteins GBP-1 and its interactions with hepatitis C virusNS5B protein (2009)
  • 著者名/発表者名: Itsui Y, Sakamoto N, Nakagawa M, Osajima Y, Tasaka M, Sakurai Y, Suda G, Karakama Y, Mishima K, Yamamoto M, Watanabe T, Ueyama M, Funaoka Y, Azuma S (Chen CH), Kakinuma S, Yauchi T, Watanabe M
  • 学会等名: 60th. Annual Meeting of American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: Boston
  • 年月日: 2009-11-02
• [学会発表] インターフェロン発現・作動機構とHCV蛋白 (2009)
  • 著者名/発表者名: 田坂めぐみ
  • 学会等名: 第13回日本肝臓学会大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2009-10-14
• [学会発表] Establishment and genetic analyses of cytopathogenic HCV-JFH1 mutants by plaque-forming assay (2009)
  • 著者名/発表者名: Mishima K, Sakamoto N, Sekine-Osajima Y, Nakagawa M, Tasaka M, Nishimura-Sakurai Y, Itsui Y, Wakita T, Watanabe M
  • 発表場所: Nice
  • 年月日: 2009-10-03
• [学会発表] Genotype 2型C型慢性肝炎のインターフェ ロン治療再燃例に対する再治療の試み (2009)
  • 著者名/発表者名: 渡辺貴子、中川美奈、船岡祐介、植山真由美、三島果子、山本満千、小貫優子、須田剛生、櫻井幸、田坂めぐみ、筬島裕子、井津井康浩、陳正新、坂本直哉、渡辺守
  • 学会等名: 第45回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2009-06-04
• [学会発表] HCV増殖を制御するInterferon誘導蛋白とHCV非構造蛋白の相互作用の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 井津井康浩、 坂本直哉、中川美奈、筬島裕子、田坂めぐみ、櫻井幸、須田剛生、三島果子、山本満千、植山真由美、渡辺貴子、 船岡祐介、渡辺守
  • 学会等名: 第45回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2009-06-04
• [学会発表] 細胞障害性HCV-JFH1 subcloneの単離と機能解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 三島果子、坂本直哉、中川美奈、井津井康浩、筬島裕子、田坂めぐみ、櫻井幸、須田剛生、山本満千、植山真由美、渡辺貴子、船岡祐介、渡辺守
  • 学会等名: 第45回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2009-06-04
• [学会発表] Genotype 2b急性肝炎由来HCVクローンの構築と増殖・粒子形成能の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 須田剛生、坂本直哉、中川美奈、田坂めぐみ、櫻井幸、小貫優子、山本満千、渡辺貴子、植山真由美、船岡祐介、井津井康浩、陳正新、今村道雄、茶山一彰、渡辺守
  • 学会等名: 第45回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2009-06-04
• [学会発表] HCVコア変異株培養系を用いたインターフェロン感受性、細胞内増殖、粒子分泌能の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 船岡祐介、坂本直哉、井津井康浩、須田剛生、中川美奈、田坂めぐみ、櫻井幸、小貫優子、山本満千、渡辺貴子、植山真由美、陳正新、渡辺守
  • 学会等名: 第45回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2009-06-04
• [学会発表] HCV複製増殖に関連する糖脂質代謝ネットワークの網羅的解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 櫻井幸、坂本直哉、中川美奈、井津井康浩、田坂めぐみ、小貫優子、須田剛生、三島果子、山本満千、植山真由美、船岡祐介、渡辺貴子、陳正新、渡辺守
  • 学会等名: 第45回日本肝臓学会総会
  • 年月日: 2009-06-04