プラークアッセイ法を応用した細胞障害性HCV株のクローン化と機能解析

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21590832
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 大岡 真也 東京医科歯科大学, 医学部・附属病院, 講師 (90361691)
• 研究分担者: 坂本 直哉 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 寄付講座教員 (10334418) ; 東 正新 東京医科歯科大学, 医学部附属病院, 助教 (10376783) ; 渡辺 守 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (10175127)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• キーワード: HCVレプリコン / HCV-JFH1培養系

研究概要

本研究では、プラークアッセイ法により得た増殖力・細胞障害性の強いウイルスクローンの解析を遂行し以下の結果を得た。(1)感染レセプター欠損Huh7細胞を用いた解析より、変異クローンは細胞内増殖が亢進しておりウイルス粒子形成・分泌能は野生型と同等であった。(3)変異HCVクローンをヒト肝臓移植キメラマウスに接種したところ変異ウイルスは感染早期は高度に増殖するが安定期においては野生型と同等のレベルになり変異が消失した野生ウイルスが増加した

研究成果

• [雑誌論文] The inhibitory effect on hepatitis C virus infection of a triterpenoid compound, with or without interferon-alpha (2011)
  • 著者名/発表者名: Watanabe T, Sakamoto N, Nakagawa M, Kakinuma S, Itsui Y, Nishimura-Sakurai Y, Ueyama M, Funaoka Y, Kitazume A, Nitta S, Kiyohashi K, Murakawa M, Azuma S, Tsuchiya K, Oooka S, Watanabe M
  • 雑誌名: Antimicrob Agents Chemother 巻: 55(6) ページ: 2537-2545
• [雑誌論文] Cell culture and in vivo analyses of cytopathic hepatitis C virus mutants (2010)
  • 著者名/発表者名: Mishima K, Sakamoto N, Sekine-Osajima Y, Nakagawa M, Itsui Y, Azuma S, Kakinuma S, Kiyohashi K, Kitazume A, Tsuchiya K, Imamura M, Hiraga N, Chayama K, Wakita T, Watanabe M
  • 雑誌名: Virology 巻: 405 ページ: 361-369
• [雑誌論文] SR蛋白リン酸化酵素阻害剤によるHCV増殖抑制効果の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 唐鎌優子、坂本直哉、井津井康浩、中川美奈、藤田めぐみ、櫻井幸、柿沼晴、大岡真也、東正新、土屋輝一郎、小野木博、萩原正敏、渡辺守
  • 雑誌名: 消化器内科 巻: 51(6) ページ: 632-635
• [雑誌論文] Two flavonoids extracts from Glycyrrhizae radix inhibit in vitro hepatitis C virus replication (2009)
  • 著者名/発表者名: Sekine-Osajima Y, Sakamoto N, Nakagawa M, Itsui Y, Tasaka M, Nishimura-Sakurai Y, Chen CH, Suda G, Mishima K, Onuki Y, Yamamoto M, Maekawa S, Enomoto N, Kanai T, Tsuchiya K, Watanabe M
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 39 ページ: 60-69
• [学会発表] 細胞障害性HCV-JFH1における遺伝子変異の機能解析とin vivo感染動態の検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 三島果子、坂本直哉、筬島裕子、中川美奈、柿沼晴、陳正新、脇田隆字、今村道雄、茶山一彰、渡辺守
  • 学会等名: (一般口演)第46回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 山形
  • 年月日: 2010-05-27
• [学会発表] Establishment and genetic analyses of cytopathogenic HCV-JFH1 mutants by plaque-forming assay (2009)
  • 著者名/発表者名: Kako Mishima, Naoya Sakamoto, Yuko Sekine-Osajima, Mina Nakagawa, Megumi Tasaka, Yuki Nishimura-Sakurai, Yasuhiro Itsui, Takaji Wakita, and Mamoru Watanabe
  • 学会等名: 16th. International Meeting on Hepatitis C Virus & Related Viruses
  • 発表場所: Nice, France
  • 年月日: 2009-10-03
• [学会発表] 細胞傷害性HCV-JFH1subcloneの単離と機能解析.(ワークショップ3) (2009)
  • 著者名/発表者名: 三島果子坂本直哉中川美奈井津井康浩筬島裕子田坂めぐみ櫻井幸須田剛生山本満千植山真由美渡辺貴子船岡祐介渡辺守
  • 学会等名: 第45回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2009-06-04
• [学会発表] 細胞障害性HCV-JFH1subcloneの単離と機能解析
  • 著者名/発表者名: 三島果子、坂本直哉、筬島裕子、中川美奈、藤田めぐみ、櫻井幸、須田剛生、唐鎌優子、山本満千、渡辺貴子、植山真由美、船岡祐介、幾世橋佳、新田沙由梨、北詰晶子、井津井康浩、柿沼晴、陳正新、脇田隆字、渡辺守
  • 学会等名: 京都(ポスター)