肝幹細胞移植による肝再構築機構の解析

2011 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21590833
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 東 正新 (陳 正新) 東京医科歯科大学, 医学部附属病院, 助教 (10376783)
• 研究分担者: 柿沼 晴 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 寄附講座教員 (30372444) ; 坂本 直哉 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 寄附講座教員 (10334418) ; 渡辺 守 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (10175127)
• キーワード: 再生医学 / 肝細胞 / 幹細胞 / 発生・分化 / 肝細胞移植

研究概要

我々は当該研究において、特定の目的分子の発現を修飾することで、肝幹・前駆細胞の移植効率に与える影響を解析し、さらに、肝幹細胞がレシピエント肝臓を置換する際に目的分子がどのような動態をとるのかを解析することで、効率的に肝幹細胞を致死的肝不全の治療に応用しようとする研究を行い、今年度の成果として下記を得た。(1)肝幹細胞を用いた細胞移植後の細胞動態の解析:研究グループは成体由来肝細胞を用いて、高度の肝キメリズムが得られる移植系を確立した。高脂血症モデルマウスに対して、野生型のマウス胎仔由来肝幹・前駆細胞を移植したところ、高脂血症が治癒し、移植した細胞がレシピエントの肝臓内で1年以上にわたって肝細胞として機能することを示した。さらに、成体マウス肝臓から分離した肝幹・前駆細胞についても検討し、移植細胞が長期間肝臓を再構築できることを示した(2011年米国肝臓病学会年次総会にて発表)。(2)肝幹細胞移植時の肝臓置換に関わる分子の解析:研究グループが確立した移植系において、いかなる分子が肝臓の再構築に関与しているかを明らかにする研究を行った。その結果、MMP2欠損マウス由来の肝細胞はMMP2野生型マウスと比較して、移植後の肝臓再構成が遅延していることを示した。(3)低侵襲前処理と肝幹細胞を用いた細胞移植系の開発及び致死的肝不全治療モデルの開発:これまでの結果に基づき、MMPを強制発現した細胞を移植すると、効率的に置換されたが低侵襲条件下では移植効率は低下した。さらにレトロルシンを用いない細胞移植系の開発に着手した。低侵襲条件下での移植は現時点では成功していないが、いくつかの条件検討を継続している。

研究成果

• [雑誌論文] Cholestatic liver fibrosis and toxin-induced fibrosis are exacerbated in matrix metalloproteinase-2 deficient mice (2011)
  • 著者名/発表者名: Kakinuma S, Onozuka I, Kamiya A, Miyoshi M, Sakamoto N, Kiyohashi K, Watanabe T, Funaoka Y, Ueyama M, NakagawaM, Koshikawa N, Seiki M, Nakauchi H, and Watanabe M
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 406 ページ: 134-140
• [雑誌論文] Inhibitory effect of triterpenoid compound, with or without interferon-alpha, on hepatitis C virus infection (2011)
  • 著者名/発表者名: Watanabe T, Sakamoto N, Nakagawa M, Kakinuma S, Itsui Y, Nishimura-Sakurai Y, Ueyama M, Funaoka Y, Kitazume A, Nitta S, Kiyohashi K, Murakawa M, Azuma S, Tsuchiya K, Oooka S, Watanabe M
  • 雑誌名: Antimicrob Agent Chemother 巻: 55 ページ: 2537-45
• [雑誌論文] Analysis of interferon signaling by infectious hepatitis C virus clones with substitutions of core amino acids 70 and 91 (2011)
  • 著者名/発表者名: Funaoka Y, Sakamoto N, Kakinuma S, Azuma S, Watanabe M, et al
  • 雑誌名: Journal of Virology 巻: 85 ページ: 5986-94
  • DOI: 10.1128/.JVI.02583-10
  • 査読あり
• [雑誌論文] Association of IL28B polymorphism with response to pegylated-interferon alpha plus ribavirin combination therapy in patients with chronic genotype 2 hepatitis C (2011)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto N, Azuma S, Kakinuma S, Watanabe M, et al
  • 雑誌名: J Medical Virol 巻: 83 ページ: 871-878
  • DOI: 10.1002/jmv.22038
  • 査読あり
• [学会発表] Treatment and outcomes for elderly patients with hepatocellular caricinoma (2012)
  • 著者名/発表者名: Azuma S, Sakamoto N, Kakinuma S, Watanabe M, et al
  • 学会等名: The 22nd Conference of the Asian Pacific Association for the Study of the Liver
  • 発表場所: Taipei,台湾
  • 年月日: 2012-02-17
• [学会発表] MMP-2 and MMP-14 derived from donor cells enhance therapeutic efficacy of liver cell transplantation in mice (2011)
  • 著者名/発表者名: Kakinuma S, Sakamoto N, Watanabe M, et al
  • 学会等名: 62nd Annual meeting of the American Association of the Study of Liver Disease
  • 発表場所: San Francisco, USA
  • 年月日: 2011-11-05
• [図書] iPS細胞とDirect Conversion (G.I.Research) (2011)
  • 著者名/発表者名: 柿沼晴、渡辺守
  • 総ページ数: 619
  • 出版者: 先端医学社