C型肝炎ウイルス複製複合体に含まれる蛋白の同定とウイルス複製における役割の解析

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21590867
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 相崎 英樹 国立感染症研究所, ウイルス第二部, 主任研究官 (00333360)
• 研究分担者: 鈴木 哲朗 国立感染症研究所, 室長 (00250184)
• キーワード: ウイルス / 感染症 / 癌 / 内科 / プロテオーム

研究概要

本研究はプロテオミックス技術により、HCV複製複合体(RC)を構成する宿主因子を同定し、その機能を解析することを目的とした。サブゲノムレプリコン(genotype 1b)を有するHuh7細胞からHCVRCを含む界面活性剤不溶性膜分画を抽出し、Huh7細胞と比較したところ、レプリコン細胞で2倍以上量が増加していた蛋白が約60個認められ、それらはHeat shock protein、Chaperone、Enzyme、Receptor signaling complex、Ubiquitin proteasome system proteinなどに分類された。に更に、HCVRNA複製活性は細胞の増殖期に亢進することが知られているので、レプリコン細胞の膜分画において対数増殖期にのみ増加した蛋白を同定したところ、高HCV複製期に1.5倍以上増加していた蛋白が約45個認められた。両者に共通する蛋白として、分子シャペロンT-complex polypeptide 1 ring complex subunitε(CCT5)及びHeat shock cognate protein 70が含まれていた。レプリコン細胞へのCCT5 siRNA導入によってHCV RNA複製レベルが低下したことから、今回同定された分子シャペロンがHCV RCへ取り込まれRNA複製調節に関与する可能性が示唆された。今後、CCT5、HSD70のウイルス複製における役割について解析する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Identification of hepatitis C virus genotype 2a replicon variants with reduced susceptibility to ribavirin (2010)
  • 著者名/発表者名: Hmwe SS, Aizaki H, Date T, Murakami K, Ishii K, Miyamura T, Koike K, Wakita T, Suzuki T
  • 雑誌名: Antiviral Res. 85 ページ: 520-524
  • 査読あり
• [雑誌論文] SYNCRIP(synaptotagmin-binding, cytoplasmic RNA-interacting protein)is a host factor involved in hepatitis C virus RNA replication (2009)
  • 著者名/発表者名: Liu HM, Aizaki H, Choi KS, Machida K, Ou JJ, Lai MM
  • 雑誌名: Virology 386 ページ: 249-256
  • 査読あり
• [雑誌論文] Involvement of creatine kinase B in hepatitis C virus genome replication through interaction with the viral NS4A protein (2009)
  • 著者名/発表者名: Hara H, Aizaki H, Matsuda M, Shinkai-Ouchi F, Inoue Y, Murakami K, Shoji I, Kawakami H, Matsuura Y, Lai MM, Miyamura T, Wakita T, Suzuki T
  • 雑誌名: J Virol. 83 ページ: 5137-5147
  • 査読あり
• [雑誌論文] Proteomics analysis of mitochondrial proteins reveals over expression of a mitochondrial protein chaperone, prohibitin, in cells expressing hepatitis C virus core protein (2009)
  • 著者名/発表者名: Tsutsumi T, Matsuda M, Aizaki H, Moriya K, Miyoshi H, Fujie H, Shintani Y, Yotsuyanagi H, Miyamura T, Suzuki T, Koike K
  • 雑誌名: Hepatology 50 ページ: 378-386
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluation of Hepatitis C Virus Core Antigen Assays in Detecting the Recombinant Viral Antigens of Various Genotypes (2009)
  • 著者名/発表者名: Mohsan S, Suzuki R, Kondo M, Aizaki H, Kato T, Mizuochi T, Wakita T, Watanabe H, Suzuki T
  • 雑誌名: J Clin Microbiol. 47 ページ: 4141-4143
  • 査読あり
• [雑誌論文] Production of infectious hepatitis C virus by using RNA polymerase I-mediated transcription
  • 著者名/発表者名: Masaki T, Suzuki R, Saeed M, Mori KI, Matsuda M, Aizaki H, Ishii K, Maki N, Miyamura T, Matsuura Y, Wakita T, Suzuki T
  • 雑誌名: J Virol (In press)
  • 査読あり
• [学会発表] C型肝炎ウイルス subgenomic replicon RNAを複製するヒト肝星細胞株の樹立 (2009)
  • 著者名/発表者名: 渡辺則幸、相崎英樹、松浦知和、脇田隆字、鈴木哲朗
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20091025-20091027
• [学会発表] Identification of lipid droplet -associated membrane proteins that are involved in HCV production (2009)
  • 著者名/発表者名: Aizaki H, Yamamoto M, Goto K, Fukasawa M, Hanada K, Sato S, Takahashi N, Matsuura Y, Miyamura T, Wakita T, Suzuki T
  • 学会等名: 16th International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: Nice, France
  • 年月日: 20091003-20091009
• [学会発表] Structural requirements of virion-associated cholesterol for HCV morphogenesis and infectivity (2009)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto M, Aizaki H, Goto K, Hamano K, Miyamura T, Wakita T, Suzuki T
  • 学会等名: 16th International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: Nice, France
  • 年月日: 20091003-20091009
• [学会発表] HCV subgenomic replicon replication in human hepatic stellate cell lines (2009)
  • 著者名/発表者名: 渡辺則幸, 相崎英樹, 松浦善治, 脇田隆字, 鈴木哲朗
  • 学会等名: 16th International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: Nice, France
  • 年月日: 20091003-20091009
• [学会発表] 感染性HCV粒子形成における宿主生体膜の役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹、脇田隆字
  • 学会等名: 第45回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20090604-20090605
• [学会発表] 生体膜脂質のC型肝炎ウイルス生活環における役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹
  • 学会等名: 第31回日本膜学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20090521-20090522
• [学会発表] HCV粒子形成に関与する脂肪滴周辺膜蛋白の同定と機能解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹、後藤耕司、山本真民、佐藤慈子、高橋信弘、深澤征義、花田賢太郎、松浦善治、宮村達男、脇田隆字、鈴木哲朗
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20090000
• [学会発表] C型肝炎ウイルス粒子形成、感染性に重要なコレステロール構造の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 山本真民、相崎英樹、宮村達男、濱野国勝、脇田隆字、鈴木哲朗
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20090000
• [学会発表] C型肝炎ウイルス粒子の脂質成分の感染における役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹、山本真民、後藤耕司、原弘道、森川賢一、谷英樹、松浦善治、斎藤恭子、深澤征義、花田賢太郎、西島正弘、宮村達男、脇田隆字、鈴木哲朗
  • 学会等名: 第16回肝細胞研究会
  • 発表場所: 山形
  • 年月日: 20090000
• [図書] 生体膜脂質のC型肝炎ウイルス生活環における役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹
  • 総ページ数: 6
  • 出版者: 日本膜学会誌
• [備考]
  • URL: http://www.nih.go.jp/niid/vir2/HP_top0729/top.html