| 研究課題/領域番号 |
21590871
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
廣田 衛久 東北大学, 病院, 助教 (70400364)
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| 研究分担者 |
佐藤 賢一 東北大学, 病院, 講師 (10282055)
濱田 晋 東北大学, 病院, 医員 (20451560)
菅野 敦 東北大学, 病院, 助教 (70509190)
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| キーワード | 膵癌 / 骨髄由来細胞 / 慢性膵炎 / グリーンマウス |
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| 研究概要 |
平成22年度は、前年度に構築した実験系の基礎を確立し、検体を採取、網羅的な解析系へと進行することである。生後7週齢のグリーンマウスの骨髄細胞10,000,000個を抽出し、7Grayの放射線を照射した生後8週のC57BL6マウスに尾静注することにより骨髄移植した。FACS解析で骨髄置換されたキメラマウスが作製されたことを確認した上で、このマウスの膵尾部にDMBAを1mg注入することにより、注入から3ヶ月後には脾臓等周囲の臓器に浸潤する膵腫瘍が形成される。この腫瘍は紡錘形の肉腫様変化をした低分化な癌で、癌細胞を取り巻く強い線維化を認めた。さらに癌病巣の周囲に過形成や異型腺管といった前癌病変も認めた。癌組織を免疫組織学的に検討したところ、癌組織中の細胞の半数がGFP陽性の骨髄由来細胞であった。これらの細胞はCK19陰性、αSMA陰性、vimentin陰性であったが、一部にCD31あるいはCD68陽性細胞を認めた。
作製された癌組織からGFP陽性細胞をFACSにてソーティングし、RNAを抽出する作業を進行中である。抽出したRNAは順次フリーズストックしており、この作業が終了次第マイクロアレイによる網羅的遺伝子発現解析を行い、特異的に発現の亢進している遺伝子を同定、機能解析するのが次年度となる。
また、慢性膵炎を背景とした発癌についても検討予定であったが、セルレインを複数回腹腔内投与することにより作製した慢性膵炎マウスを開腹しDMBAを投与すると高率に死亡し、実験効率が著しく悪いため網羅的解析を行うための検体採取は今回行っていない。
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