肺における細胞特異的エピジェネティクスへの挑戦

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21590961
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 別役 智子 北海道大学, 大学院・医学研究科, 准教授 (60333605)
• キーワード: LCM / マウス / 喫煙 / 細気管支上皮 / miRNA

研究概要

炎症性サイトカインの調節、DNA修復、増殖といった様々な細胞機能の変化は、いわゆるエピジェネティクスと呼ばれるDNAの翻訳後修飾によりもたらされている。肺におけるmiRNAに関する既存の報告はごく限られている。よって、本研究をこれらのLCMを用いたジェネティクス研究成果のエピジェネティクスへの発展的展開として位置づける。本年度は、喫煙暴露後とコントロールマウスとの間で細気管支上皮におけるmiRNAをマイクロアレイ上で網羅的にスクリーニングすることを目的とした。C57BL/6マウスに喫煙暴露モデルを作成する。laser capture microdissection(LCM)法を用いて顕微鏡下に細気管支上皮細胞を選択的に採取した。長さ200塩基以下のRNAを濃縮したsmall RNAの画分として回収できるように開発されたmirVana? miRNA Isolatiom Kit(Ambion社)を用いた。miRNAはendonucleaseによるプロセッシングの結果保存された部分を有している。マウスの既知miRNAの数が比較的少ないことにより、すべてのmiRNAを理想的にアレイというプラットフォーム上で拾い上げることができ、既存のバイオインフォーマティクスのデータベースの中に取り込んで解析を行った。

研究成果

• [雑誌論文] Cigarette smoke induces nucleic acid oxidation in lung fibroblasts (2010)
  • 著者名/発表者名: Deslee G, Adair-Kirk TL, Betsuyaku T, Woods JC, Moore CH, Gierada DS, Conradi SH, Atkinson JJ, Toennies HM, Battaile JT, Kobayashi DK, Patterson GA, Holtzman MJ, Pierce RA
  • 雑誌名: Am J Respir Cell Mol Biol (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] High levels of extracellular matrix metalloproteinase inducer are expressed in lymphangioleiomyomatosis (2010)
  • 著者名/発表者名: Odajima N, Betsuyaku T, Yoshida T, Hosokawa T, Nishimura M
  • 雑誌名: Hum Pathol (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Aging enhances susceptibility to cigarette smoke-induced inflammation through bronchiolar chemokines (2010)
  • 著者名/発表者名: Moriyama C, Betsuyaku T, Ito Y, Hamamura I, Hata J, Takahashi H, Nasuhara Y, Nishimura M
  • 雑誌名: Am J Respir Cell Mol Biol 42 ページ: 304-311
  • 査読あり
• [雑誌論文] Laminin gamma2 fragments are increased in the circulation of patients with early phase acute lung injury (2010)
  • 著者名/発表者名: Katayama M, Ishizaka A, Sakamoto M, Fujishima S, Sekiguchi K, Asano K, Betsuyaku T, Kotani T, Ware LB, Matthay MA, Hashimoto S
  • 雑誌名: Intensice Care Med 36 ページ: 479-486
  • 査読あり
• [雑誌論文] Aging affects lipopolysaccharide-induced upregulation of heme oxygenase-1 in the lungs and alveolar macrophages (2009)
  • 著者名/発表者名: Ito Y, Betsuyaku T, Moriyama C, Nasuhara Y, Nishimura M
  • 雑誌名: Biogerontology 10 ページ: 173-180
  • 査読あり
• [雑誌論文] Matrix metalloproteinases in blood from patients with LAM (2009)
  • 著者名/発表者名: Odajima N, Betsuyaku T, Nasuhara Y, Inoue H, Seyama K, Nishimura M
  • 雑誌名: Respir Med 103 ページ: 124-129
  • 査読あり
• [雑誌論文] A soluble factor (EMMPRIN) in exudates influences knee motion after total arthroplasty (2009)
  • 著者名/発表者名: Onodera J, Onodera S, Kondo E, Betsuyaku T, Yasuda K
  • 雑誌名: Knee Surg Sports Traumatol Arthrosc 17 ページ: 298-304
  • 査読あり
• [雑誌論文] Relationship between improved airflow limitation and changes in airway caliber induced by inhaled anticholinergic agents in COPD (2009)
  • 著者名/発表者名: Hasegawa M, Makita H, Nasuhara Y, Odajima N, Nagai K, Ito Y, Betsuyaku T, Nishimura M
  • 雑誌名: Thorax 64 ページ: 332-338
  • 査読あり
• [雑誌論文] Curcumin attenuates elastase-and cigarette smoke-induced pulmonary emphysema in mice (2009)
  • 著者名/発表者名: Suzuki M, Betsuyaku T, Ito Y, Nagai K, Odajima N, Moriyama C, Nasuhara Y, Nishimura M
  • 雑誌名: Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 296 ページ: L614-L623
  • 査読あり
• [雑誌論文] Epilysin(MMP-28)restrains early macrophage recruitment in Pseudomonas aeruginosa pneumonia (2009)
  • 著者名/発表者名: Manicone AM, Birkland TP, Lin M, Betsuyaku T, van Rooijen N, Lohi J, Keski-Oja J, Wang Y, Skerrett SJ, Parks WC
  • 雑誌名: J Immunol 182 ページ: 3866-3876
  • 査読あり
• [学会発表] Aging enhances susceptibility to cigarette smoke-induced inflammation (2009)
  • 著者名/発表者名: Betsuyaku T
  • 学会等名: The 9th World Congress on Inflammation Industry Sponsored Symposium 1
  • 発表場所: 東京:京王プラザホテル東京
  • 年月日: 2009-07-07
• [学会発表] Relationship between improved airflow limitation and changes in airway caliber induced by inhaled anticholinergics in chronic obstructive pulmonary disease (2009)
  • 著者名/発表者名: Hasegawa M, Nasuhara Y, Makita H, Odajima N, Nagai K, Ito Y, Betsuyaku T, Nishimura M
  • 学会等名: 第49回日本呼吸器学会
  • 発表場所: 東京:東京国際フォーラム
  • 年月日: 2009-06-14
• [学会発表] Kinetics of various ocidative stress markers in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) in lipopolysaccaride (LPS) induced lung injury (2009)
  • 著者名/発表者名: Yoshida T, Betsuyaku T, Nagai K, Ito Y, Nasuhara Y, Nishimura M
  • 学会等名: 第49回日本呼吸器学会
  • 発表場所: 東京:東京国際フォーラム
  • 年月日: 2009-06-13
• [学会発表] Catalase expression in pulmonary macrophages of smokers and chronic obstructive pulmonary disease (COPD) patients (2009)
  • 著者名/発表者名: Inomata T, Betsuyaku T, Ito Y, Nasuhara Y, Nishimura M
  • 学会等名: 第49回日本呼吸器学会
  • 発表場所: 東京:東京国際フォーラム
  • 年月日: 2009-06-13
• [学会発表] 酸化ストレスによる肺病変としての気腫化と線維化 (2009)
  • 著者名/発表者名: 別役智子
  • 学会等名: 第49回日本呼吸器学会
  • 発表場所: 東京:東京国際フォーラム
  • 年月日: 2009-06-13
• [学会発表] アレルギー性気道炎症モデルにおける気道被覆液中のグルタチオン化蛋白の検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 長井桂,別役智子,南須原康行,近藤宇史,西村正治
  • 学会等名: 第49回日本呼吸器学会
  • 発表場所: 東京:東京国際フォーラム
  • 年月日: 2009-06-13
• [学会発表] 高齢マウス単回喫煙曝露モデルにおける細気管支上皮細胞でのnuclear factor κB(NF-κB)の活性化とケモカイン発現亢進 (2009)
  • 著者名/発表者名: 守山千夏,別役智子,伊藤洋子,西村正治
  • 学会等名: 第49回日本呼吸器学会
  • 発表場所: 東京:東京国際フォーラム
  • 年月日: 2009-06-12
• [学会発表] Alveolar-specific gene expression profiling in emphysematous lungs (2009)
  • 著者名/発表者名: Hersh CP, Betsuyaku T, Patel N, Marchetti N, Klanderman BJ, Criner G, Choi A
  • 学会等名: The 105^<th> American Thoracic Society International Conference
  • 発表場所: The San Diego Convention Center, San Diego, CA, United States
  • 年月日: 2009-05-17
• [学会発表] Protein S-glutathionylation in the Epithelial Lining Fluid during Allergic Airway Inflammation (2009)
  • 著者名/発表者名: Nagai K, Betsuyaku T,Nasuhara Y, Kondo T, Nishimura M
  • 学会等名: The 105^<th> American Thoracic Society International Conference
  • 発表場所: The San Diego Convention Center, San Diego, CA, United States
  • 年月日: 2009-05-17
• [学会発表] Duration of cigarette smoke (CS) exposure affects the resolution of lung inflammation after cessation in mice (2009)
  • 著者名/発表者名: Odajima N, Betsuyaku T, Inomata T, Yoshida T, Moriyama C, Suzuki K, Nagai K, Nasuhara Y, Nishimura M
  • 学会等名: The 105^<th> American Thoracic Society International Conference
  • 発表場所: The San Diego Convention Center, San Diego, CA, United States
  • 年月日: 2009-05-17
• [学会発表] Kinetics of various oxidative stress markers in BAL fluid in lipopolysaccaride (LPS)-induced lung injury (2009)
  • 著者名/発表者名: Yoshida T, Betsuyaku T, Nagai K, Ito Y, Nasuhara Y, Nishimura M
  • 学会等名: The 105^<th> American Thoracic Society International Conference
  • 発表場所: The San Diego Convention Center, San Diego, CA, United States
  • 年月日: 2009-05-17
• [学会発表] Catalase expression in pulmonary macrophages of smokers and chronic obstructive pulmonary disease(COPD)patients (2009)
  • 著者名/発表者名: Inomata T, Betsuyaku T, Ito Y, Nasuhara Y, Nishimura M
  • 学会等名: The 105^<th> American Thoracic Society International Conference
  • 発表場所: The San Diego Convention Center, San Diego, CA, United States
  • 年月日: 2009-05-17
• [図書] 実験医学増刊 病態解明に迫るI.活性酸素シグナルと酸化ストレス 癌,神経変性疾患,循環・代謝異常にかかわるレドックス制御機構と最新の技術開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 別役智子
  • 総ページ数: 243
  • 出版者: 羊土社