近位尿細管エンドサイトーシスの分子機構と慢性腎臓病の発症機序における病的役割

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21591023
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 腎臓内科学
• 研究機関: 新潟大学
• 研究代表者: 斉藤 亮彦 新潟大学, 大学院・医歯学総合研究科, 特任教授 (80293207)
• 研究分担者: 佐藤 博慶 新潟大学, 大学院・医歯学総合研究科, 特任助教 (30413610) ; 飯野 則昭 新潟大学, 医歯学総合病院, 助教 (10420308) ; 竹田 徹朗 獨協医科大学, 医学部, 教授 (10361924)
• 連携研究者: 西山 成 香川大学, 医学部, 教授 (10325334) ; 市原 淳弘 東京女子医科大学, 医学部, 教授 (60203105)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• キーワード: メガリン / 近位尿細管 / エンドサイトーシス / 慢性腎臓病 / レニン-アンジオテンシン系 / バイオマーカー

研究概要

近位尿細管上皮細胞エンドサイトーシス受容体メガリンの分子機構の解析を行い、さらにメガリンを用いた慢性腎臓病の新規診断法の開発を行うと共に、慢性腎臓病の病態(レニン-アンジオテンシン系)におけるメガリンの役割について検討を行った。
1)メガリンの細胞内ドメインがアダプター蛋白Dab2を介してnonmuscle myosin heavy chainIIAと結合し、それがエンドサイトーシスの駆動力となるとなることを明らかにした(Kidney Int 2009)。
2) 2型糖尿病やタボリックシンドロームにおいては血液中のエンドトキシン(LPS)が増加するが、LPSが培養PTCにおいて、TNF.の発現誘導を介してメガリンの発現を抑制すること、さらにその下流はERK1/2経路が関係することを見出した(BBRC 2011)。
3)ヒト尿中メガリンELISA測定系を確立し、糖尿病性腎症の早期発見・重症度判定および心腎連関リスクに関する新しいバイオマーカーになりうることを示した(Diabetes Care 2012)。
4)肝臓で産生されたアンジオテンシノゲンが腎臓におけるレニン-アンジオテンシン系の活性化(アンジオテンシンIIの産生)に関わることを明らかにした。さらに糸球体を濾過したアンジアンジオテンシノゲンは近位尿細管においてメガリンを介して取り込まれることを示した(JASN 2012)。

研究成果

• [雑誌論文] Liver angiotensinogen is the primary source of renal angiotensin II (2012)
  • 著者名/発表者名: Matsusaka T, Niimura F, Shimizu A, Pastan I, Saito A, Kobori H, Nishiyama A, Ichikawa I
  • 雑誌名: J Am Soc Nephrol. 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Significance of urinary full-length and ectodomain forms of megalin in patients with type 2 diabetes (2012)
  • 著者名/発表者名: Ogasawara S, Hosojima M, Kaseda R, Kabasawa H, Yamamoto-Kabasawa K, Kurosawa H, Sato H, Iino N, Takeda T, Suzuki Y, Narita I, Yamagata K, Tomino Y, Gejyo F, Hirayama Y, Sekine S, Saito A
  • 雑誌名: Diabetes Care. 巻: Vol.35 ページ: 1112-1118
  • DOI: doi:10.2337/dc11-1684
  • 査読あり
• [雑誌論文] 慢性腎臓病と透析医療?研究の歩みから腎の再生医療に向けて (2012)
  • 著者名/発表者名: 成田一衛, 斉藤亮彦, 下条文武
  • 雑誌名: 再生医療 巻: 11(1) ページ: 35-50
  • 査読あり
• [雑誌論文] 慢性腎臓病と急性腎傷害におけるバイオマーカー (2012)
  • 著者名/発表者名: 斉藤亮彦
  • 雑誌名: 日本臨床検査自動化学会誌 巻: 37(1) ページ: 3-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analysis of different complexes of type IIa sodium-dependent phosphate transporter in rat renal cortex using blue-native polyacrylamide gel electrophoresis (2011)
  • 著者名/発表者名: Tanimura A, Yamada F, Saito A, Ito M, Kimura T, Anzai N, Horie D, Yamamoto H, Miyamoto K, Taketani Y, Takeda E
  • 雑誌名: J Med Invest. 巻: Vol.58(1, 2) ページ: 140-147
  • 査読あり
• [雑誌論文] β2-ミクログロブリンの近位尿細管における再吸収・代謝機構-エンドサイトーシス受容体メガリンの構造,機能,分子間相互作用 (2010)
  • 著者名/発表者名: 忰田亮平, 斉藤亮彦
  • 雑誌名: 臨床検査 ページ: 37-49
• [雑誌論文] Proximal tubule cell hypothesis for cardiorenal syndrome in diabetes (2010)
  • 著者名/発表者名: Saito A, Kaseda R, Hosojima M, Sato H
  • 雑誌名: Int J Nephrol 巻: Vol.2011
  • DOI: doi:10.4061/2011/957164
  • 査読あり
• [雑誌論文] 腎障害とメガリン (2010)
  • 著者名/発表者名: 斉藤亮彦
  • 雑誌名: 臨床検査 巻: 38巻 ページ: 733-734
• [雑誌論文] Molecular mechanisms of receptor-Mediated endocytosis in the renal proximal tubular epithelium (2009)
  • 著者名/発表者名: Saito A, Sato H, Iino N, Takeda T
  • 雑誌名: J Biomed Biotechnol 巻: Vol.2010
  • DOI: doi:10.1155/2010/403272
  • 査読あり
• [雑誌論文] Megalin and nonmuscle myosin heavy chain IIA interact with the adaptor protein Disabled-2 in proximal tubule (2009)
  • 著者名/発表者名: Hosaka K, Takeda T, Iino N, Hosojima M, Sato H, Kaseda R, Yamamoto K, Kobayashi S, Gejyo F, Saito A
  • 雑誌名: Kidney International 巻: Vol.75 ページ: 1308-1315
  • DOI: doi:10.1038/ki.2009.85
  • 査読あり
• [雑誌論文] Megalin is downregulated via LPS-TNF-α-ERK1/2 signaling pathway in proximal tubule cells
  • 著者名/発表者名: Takeyama A, Sato H, Soma-Nagae T, Kabasawa H, Suzuki A, Yamamoto-Kabasawa K, Hosojima M, Kaneko R, Higuchi F, Kaseda R, Ogasawara S, Narita I, Saito A
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: Vol.407(1) ページ: 108-112
  • DOI: doi:10.1016/j.bbrc.2011.02.118
  • 査読あり
• [学会発表] 糖尿病性腎症における尿中メガリン排泄量の測定意義 (2011)
  • 著者名/発表者名: 細島康宏,小笠原真也,黒澤寛之,鈴木芳樹,富野康日己,山縣邦弘,成田一衛,平山吉朗,関根盛,斉藤亮彦
  • 学会等名: 第23回日本糖尿病性腎症研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20111203-04
• [学会発表] Regulation of megalin expression proximal tubule cells by angiotensin II-, inslin-and LPSTNF-α-mediated signaling cross-talk (2011)
  • 著者名/発表者名: Hosojima M, Kabasawa H, Takeyama A, Sato H, Yamamoto-Kabasawa K, Kaseda R, Narita I, Saito A
  • 学会等名: 2011 Forefronts Symposium-Forefronts in Nephrology
  • 発表場所: Aahus Denmark
  • 年月日: 20110922-25
• [学会発表] Significance of urinary full-length and ectodomain forms of megalin in patients with type 2 diabetes (2011)
  • 著者名/発表者名: Ogasawara S, Hosojima M, Kabasawa H, Kaseda R, Yamamoto-Kabasawa K, Sato H, Takeda T, Suzuki Y, Narita I, Yamagata K, Tomino Y, Gejyo F, Hirayama Y, Sekine S, Saito A
  • 学会等名: 2011 Forefronts Symposium-Forefronts in Nephrology
  • 発表場所: Aahus Denmark
  • 年月日: 20110922-25
• [学会発表] 2型糖尿病における尿中全長型および細胞外領域型メガリンの測定の意義 (2011)
  • 著者名/発表者名: 斉藤亮彦,小笠原真也,細島康宏,忰田亮平,蒲澤秀門,山本-蒲澤佳子,佐藤博慶,黒澤寛之,竹田徹朗,鈴木芳樹,成田一衛,山縣邦弘,富野康日己,下条文武,平山吉朗,関根盛
  • 学会等名: 日本プロテオーム学会2011年会
  • 発表場所: 新潟
  • 年月日: 20110728-30
• [学会発表] 培養近位尿細管上皮細胞におけるLPS-TNFα-ERK1/2シグナル経路を介したメガリンの発現調節機構 (2011)
  • 著者名/発表者名: 佐藤博慶,竹山綾,蒲澤秀門,長江多恵子,金子麗華,樋口文恵,鈴木哲世,山本佳子,細島康宏,竹田徹朗,鈴木芳樹,成田一衛,斉藤亮彦
  • 学会等名: 第54回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川横浜市
  • 年月日: 20110615-17
• [学会発表] 低タンパク血症にもかかわらず軽度タンパク尿を呈したネフローゼ症候群患者のmegalin発現の検討 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小椋雅夫,亀井宏一,佐藤舞,藤丸拓也,石川智朗,宇田川智宏,松岡健太郎,斉藤亮彦,伊藤秀一
  • 学会等名: 第54回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川横浜市
  • 年月日: 20110615-17
• [学会発表] 生活習慣改善プログラムによる尿中アルブミン排泄量の減少効果 (2011)
  • 著者名/発表者名: 山本佳子,細島康宏,蒲澤秀門,飯野則昭,竹田徹朗,鈴木芳樹,成田一衛,荒川正昭,斉藤亮彦
  • 学会等名: 第54回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川横浜市
  • 年月日: 20110615-17
• [学会発表] CKDの病態把握と予後推定における尿中メガリン測定の意義 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小笠原真也,忰田亮平,蒲澤秀門,竹田徹朗,鈴木芳樹,成田一衛,平山吉朗,関根盛,斉藤亮彦
  • 学会等名: 第54回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川横浜市
  • 年月日: 20110615-17
• [学会発表] 第54回日本糖尿病学会年次学術集会 (2011)
  • 著者名/発表者名: 斉藤亮彦,竹山綾,佐藤博慶,蒲澤秀門,長江多恵子,金子麗華,樋口文恵,鈴木哲世,山本佳子,細島康宏,忰田亮平,飯野則昭,竹田徹朗,鈴木芳樹,成田一衛
  • 学会等名: 培養近位尿細管細胞におけるLPS-TNFα-ERK1/2シグナル経路を介したメガリンの発現調節機構
  • 発表場所: 北海道
  • 年月日: 20110519-21
• [学会発表] Urinary full-length form of megalin is a novel biomarker for diabetic nephropathy (2011)
  • 著者名/発表者名: Saito A, Ogasawara S, Kabasawa H, Hosojima M, Kaseda R, Takeda T, Suzuki Y, Narita I, Hirayama Y, Sekine S
  • 学会等名: 7th International Congress on Uremia Research and Toxicity
  • 発表場所: Nagoya
  • 年月日: 20110512-14
• [学会発表] Effect of rice protein on the progression of diabetic nephropathy (2011)
  • 著者名/発表者名: Watanabe R, Kubota M, Saito A, Kumagai T, Kadowaki M
  • 学会等名: International Symposium Dietary Protein for Human Health
  • 発表場所: Auckland, New Zealand
  • 年月日: 20110327-30
• [学会発表] メタボリックシンドローム関連腎症の発症・進展機序におけるメガリンの関与 (2010)
  • 著者名/発表者名: 佐藤博慶,笹川泰司,蒲澤秀門,飯野則昭,鈴木哲世,金子麗華,青木弘行,樋口文恵,鈴木芳樹,成田一衛,斉藤亮彦
  • 学会等名: 第22回日本糖尿病性腎症研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20101204-05
• [学会発表] 近位尿細管におけるメガリンを介するエンドサイトーシス機構のイメージング解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 斉藤亮彦
  • 学会等名: 第42回日本臨床分子形態学会総会・学術
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 20100924-25
• [学会発表] Blue Native-PAGE法を用いたメガリンをめぐる分子間相互作用の検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 佐藤博慶,塩田友也,保坂聖子,蒲澤秀門,山本佳子,鈴木哲世,相馬多恵子,飯野則昭,竹田徹朗,成田一衛,斉藤亮彦
  • 学会等名: 第53回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 兵庫
  • 年月日: 20100616-18
• [学会発表] 原正則:尿中PCX測定系の構築と臨床的意義 (2010)
  • 著者名/発表者名: 黒澤寛之,小笠原真也,淺沼克彦,富野康日己,山縣邦弘,斉藤亮彦,平山吉朗,関根盛
  • 学会等名: 第53回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 兵庫
  • 年月日: 20100616-18
• [学会発表] 尿中メガリンELISA測定系の構築とCKD評価における有用性 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小笠原真也,黒澤寛之,竹田徹朗,飯野則昭,佐藤博慶,鈴木芳樹,淺沼克彦,富野康日己,山縣邦弘,成田一衛,下条文武,平山吉郎,関根盛,斉藤亮彦
  • 学会等名: 第53回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 兵庫
  • 年月日: 20100616-18
• [学会発表] Urinary shedding forms of megalin as novel biomarkers of proximal tubular injury, ISN Nexus-The Kidney and the Vascular System : Emerging Culprits in Pathogenesis and Advances in Therapy (2010)
  • 著者名/発表者名: Saito A, Ogasawara S, Kurosawa H, Takeda T, Iino N, Sato H, Suzuki Y, Asanuma K, Tomino Y, Narita I, Gejyo F, Hirayama Y, Sekine S
  • 発表場所: Kyoto
  • 年月日: 20100415-18
• [学会発表] メタボリックシンドローム腎症におけるエンドサイトーシス受容体メガリンの病的役割とオートファジーとの関連 (2010)
  • 著者名/発表者名: 斉藤亮彦
  • 学会等名: 平成22年度「オートファジー研究会」
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 20100112-14
• [学会発表] Calorie diet reduces albuminuria in proportion to the improvement in serum leptin level and fractional excretion of uric acid in obese men (2009)
  • 著者名/発表者名: Takeda T, Yamamoto K, Iino N, Narita I, Saito A
  • 学会等名: Renal Week 2009
  • 発表場所: San Diego CA US
  • 年月日: 20091027-1101
• [学会発表] Establishment of ELISA system to evaluate ectodomain and full-length forms of megalin shed in human urine (2009)
  • 著者名/発表者名: Ogasawara S, Kurosawa H, Takeda T, Iino N, Sato H, Suzuki Y, Asanuma K, Tomino Y, Yamagata K, Narita I, Gejyo F, Hirayama Y, Sekine S and Saito A
  • 学会等名: Renal Week 2009
  • 発表場所: San Diego CA US
  • 年月日: 20091027-1101
• [学会発表] LPSによる培養近位尿細管細胞におけるmegalinの発現調節 (2009)
  • 著者名/発表者名: 竹山綾,佐藤博慶,相馬多恵子,蒲澤秀門,山本佳子,笹川泰司,飯野則昭,竹田徹朗,鈴木芳樹,下条文武,斉藤亮彦
  • 学会等名: 第52回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川
  • 年月日: 20090603-05
• [学会発表] マウス近位尿細管におけるMegalinを介したタンパク取り込みのin vivoイメージング (2009)
  • 著者名/発表者名: 生山健児,蒲澤秀門,佐藤博慶,山本佳子,竹山綾,笹川泰司,細島康宏,飯野則昭,竹田徹朗,鈴木芳樹,追手巍,下条文武,斉藤亮彦
  • 学会等名: 第52回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川
  • 年月日: 20090603-05
• [学会発表] Megalin, Cubilin, Amnionless遺伝子安定発現MDCK細胞の樹立 (2009)
  • 著者名/発表者名: 鈴木哲世,竹田徹朗,佐藤博慶,笹川泰司,蒲澤秀門,竹山綾,山本佳子,細島康宏,相馬多恵子,飯野則昭,鈴木芳樹,下条文武,斉藤亮彦
  • 学会等名: 第52回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川
  • 年月日: 20090603-05
• [学会発表] 培養近位尿細管上皮細胞におけるGlucose, Insulin, EGF, Ang IIによるMegalinの発現調節機構 (2009)
  • 著者名/発表者名: 佐藤博慶,山本佳子,細島康宏,相馬多恵子,鈴木哲世,蒲澤秀門,竹山綾,笹川泰司,生山健児,塩田友也,飯野則昭,竹田徹朗,鈴木芳樹,下条文武,斉藤亮彦
  • 学会等名: 第52回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 神奈川
  • 年月日: 20090603-05
• [学会発表] Effects of lifestyle modification with combibnes aerobic and resistance exercise on urinary albmin excretion in the population with metabolic syndrome (2009)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto K, Hosojima M, Saito M, Tanaka J, Hashiba M, Iino N, Takeda T, Suzuki Y Gejyo F, Arakawa M, Saito A
  • 学会等名: 3rd International Congress on Prediabetes and the Metabolic Syndrome
  • 発表場所: Nice France
  • 年月日: 20090401-04
• [学会発表] The efficacy of pioglitazone on the plasma asiponectin level and glucose control in patients with steroid-induced diabetes (2009)
  • 著者名/発表者名: Kaseda R, Hosojima M, Yamamoto K, Iino N, Takeda T, Suzuki Y, Saito A
  • 学会等名: 3rd International Congress on Prediabetes and the Metabolic Syndrome
  • 発表場所: Nice France
  • 年月日: 20090401-04
• [図書] actions and interactions in proximal tubule cells associated with the development of chronic kidney disease. In : Basic and Clinical Endocrinology Up-to-Date, ISBN 978-953-307-340-8, Edited by Fulya Akin (2011)
  • 著者名/発表者名: Saito A, Hosojima M, Sato H
  • 出版者: InTech
• [図書] 糖尿病における微量アルブミン尿の機序-糸球体・血管系と尿細管系の相互的関係の観点から-「腎臓」 (2011)
  • 著者名/発表者名: 細島康宏,蒲澤秀門,佐藤博慶,斉藤亮彦
  • 総ページ数: 176-182
  • 出版者: Annual Review 2011
• [図書] Physiology and pathophysiology of megalin-mediated endocytosis in renal proximal tubule cells. In : Advances in Medicine and Biology Research(Leon V. Berhardt) (2010)
  • 著者名/発表者名: Saito A, Sato H, Iino N, Takeda T
  • 出版者: Nova Science Publishers
• [備考]
  • URL: http://www.med.niigata-u.ac.jp/amm/
• [産業財産権] 急性腎障害の検査方法 (2012)
  • 発明者名: 斉藤亮彦,黒澤寛之,平山吉朗
  • 権利者名: 国立大学法人新潟大学,デンカ生研株式会社
  • 産業財産権番号: 特許、特願2012-045844
  • 出願年月日: 2012-03-01
• [産業財産権] URINE PRETREATMENT AGENT FOR URINARY PROTEIN QUANTITATION, URINE PRETREATMENT METHOD, AND URINARY PROTEIN QUANTITATION METHOD (2012)
  • 発明者名: Hara M, Saito A, Ogasawara S, Hirayama Y, Kurosawa H
  • 権利者名: Niigata University, Hara M, Denka Seiken Co., Ltd.
  • 産業財産権番号: 特許、US 8, 105, 840
  • 取得年月日: 2012-01-31
  • 外国
• [産業財産権] ヒトメガリンの測定方法 (2011)
  • 発明者名: 斉藤亮彦,黒澤寛之,平山吉朗
  • 権利者名: 国立大学法人新潟大学,デンカ生研株式会社
  • 産業財産権番号: 特許、特許第486537号
  • 取得年月日: 2011-11-18
• [産業財産権] METHOD FOR MEASURING HUMAN MEGALIN (2011)
  • 発明者名: Saito A, Takeda T, Ogasawara S, Miura S
  • 権利者名: Niigata University, Denka Seiken Co., Ltd.
  • 産業財産権番号: 特許、US 7, 955, 809
  • 取得年月日: 2011-06-07
  • 外国
• [産業財産権] 腎疾患の検査方法 (2010)
  • 発明者名: 原正則,斉藤亮彦,富野康日己,淺沼克彦,黒澤寛之,小笠原真也,平山吉朗
  • 権利者名: 原正則,国立大学法人新潟大学,学校法人順天堂大学,デンカ生研株式会社
  • 産業財産権番号: 特許、特願2009-139187, PCT/JP2010/003836
  • 出願年月日: 2010-06-10
• [産業財産権] 糖尿病性腎症の検査方法 (2010)
  • 発明者名: 原正則,斉藤亮彦,富野康日己,淺沼克彦,黒澤寛之,小笠原真也,平山吉朗
  • 権利者名: 原正則,国立大学法人新潟大学,学校法人順天堂大学,デンカ生研株式会社
  • 産業財産権番号: 特許、特願2009-139188, PCT/JP2010/003837
  • 出願年月日: 2010-06-10
• [産業財産権] 尿中ヒトメガリンを測定する事を含む腎疾患検出方法 (2010)
  • 発明者名: 斉藤亮彦,富野康日己,淺沼克彦,小笠原真也,黒澤寛之,平山吉朗
  • 権利者名: 国立大学法人新潟大学,学校法人順天堂,デンカ生研株式会社
  • 産業財産権番号: 特許、特願2009-108498, PCT/JP2010/057465
  • 出願年月日: 2010-04-27
• [産業財産権] 腎障害の検出用マーカーとしての尿中メガリンおよびその使用 (2010)
  • 発明者名: 斉藤亮彦,富野康日己,淺沼克彦,小笠原真也,黒澤寛之,平山吉朗
  • 権利者名: 国立大学法人新潟大学,学校法人順天堂,デンカ生研株式会社
  • 産業財産権番号: 特許、特願2011-511418, PCT/JP2010/057490
  • 出願年月日: 2010-04-27
• [産業財産権] メガリンタンパク切断阻害剤 (2010)
  • 発明者名: 岩田博司,原田英里,三井彰,斉藤亮彦
  • 権利者名: 味の素株式会社
  • 産業財産権番号: 特許、特願2011-503880
  • 出願年月日: 2010-03-12