| 研究概要 |
1.ドパミンキノンによる神経障害時のアストログリア抗酸化機構賦活のメカニズム:
昨年度までに,アストログリアでのグルタチオン(GSH)およびメタロチオネイン(MT)の発現誘導およびその放出が,ドパミン(DA)神経特異的酸化ストレスであるDAキノンによるDA神経障害に対する抗酸化機構として重要であることを,初代培養神経/アストログリア細胞および片側パーキンソン病(PD)モデルマウスを用いて示したが,今年度はそれらの抗酸化機構分子の発現誘導のメカニズムについて検討した.DA添加による初代培養アストログリアでのMT発現誘導は,DAトランスポーター阻害剤により抑制されたが,DAアンタゴニストでは影響されなかった、また,GSH合成やMT発現を誘導する転写因子Nrf2の核移行ならびにDNA結合活性の亢進がDA添加により認められ,これもDAトランスポーター阻害剤により抑制された.これにより,過剰DA曝露によりアストログリアはDAトランスポーターを介してDAを取込み,Nrf2の活性化を介して,それにより制御されるGSHやMTといった抗酸化分子の合成・発現を誘導することが明らかになった.
2.片側パーキンソン病モデルマウスにおけるアストログリアの増殖誘導ならびに抗酸化機構賦活によるドパミン神経保護効果:
昨年度までの基礎検討で,5HT1Aアゴニストの8-OH-DPATが培養アストログリアに対して増殖を誘導し,マウスへの連日投与で線条体におけるアストログリアの増殖誘導が認められたが,そこで得られた至適投与量で正常マウスに連日投与した.8-OH-DPAT連日投与により線条体でのアストログリアの増殖誘導,GSH増加だけでなく,グルタミン酸トランスポーターGLT-1およびMTの発現が誘導された.さらに,6-OHDA線条体注入片側PDモデルマウスに8-OH-DPATを1週間連日投与し,DA神経保護効果について検討した.黒質のチロシン水酸化酵素(TH)陽性DA神経細胞の脱落および腹側線条体のTH,DAトランスポーター陽性DA神経終末の脱落がともに,8-OH-DPAT連日投与により抑制された.また,8-OH-DPAT投与により,アストログリアから分泌され神経保護に働くMTの発現が健常側線条体および障害側腹側線条体において有意に増加していた.これらにより,5HT1Aアゴニストがアストログリアの増殖誘導を介したDA神経保護作用を併せ持ったPD治療薬となり得る可能性を示すことができた.
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