1) リコンビナントタンパクの精製;COS細胞およびHEK293細胞にプラスミドを用いて一過性にZ5を発現させた培養上清を作成した。培養上清をヒト血管平滑筋細胞(HASMC)に添加したととろ、血管収縮に関連した因子の遺伝子発現が有意に上昇した。精製蛋白を用いて再現性を確認中である。 2) Z5を発現する脂肪細胞の解析;レトロウイルスを用いてZ5を発現する3T3-L1脂肪細胞を作成した。parental細胞と比較して、分化誘導による脂肪蓄積、発現遺伝子の解析を行ったが、有意な差を認めなかった。 3) 抗体作成;Z5の抗体作製を行い、ヒトZ5およびマウスZ5蛋白を認識するクローンを得た。これらの抗体を用いてZ5の血中濃度測定を開始した。 4) トランスジェニックマウスの作成;SAPプロモータを用いて肝臓特異的にZ5を発現するトランスジェニックマウスの作成し、肝臓において高発現する個体を得た。高脂肪高ショ糖食負荷を行い、糖脂質代謝パラメータの測定を行ったが、有意な変化を認めなかった。高脂肪食を負荷したコントロールマウスとトランスジェニックマウスの大動脈、脂肪組織および肝臓を用いてアレイ解析を行い、発現遺伝子の網羅的解析をおこなった。大動脈において発現量が変化する遺伝子群を見出しただめ、解析を行っている。
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