ヒト未分化CD34抗原陰性造血幹細胞の特性解明と再生医療への応用

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21591251
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 関西医科大学
• 研究代表者: 薗田 精昭 関西医科大学, 医学部, 教授 (60206688)
• 連携研究者: 佐々木 豊 関西医科大学, 医学部, 講師 (80425066) ; 植村 靖史 関西医科大学, 医学部, 講師 (40364781) ; 松岡 由和 関西医科大学, 医学部, 助教 (70533420)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• キーワード: 造血幹細胞 / 臍帯血 / CD34抗原 / 骨髄内移植法 / 重症免疫不全マウス / 再生医療

研究概要

われわれは骨髄内直接移植法を用いることにより、ヒト臍帯血中に世界で初めて非常に未分化なCD34抗原陰性造血幹細胞(CD34-HSC)を同定した。加えて、18種類のlineage抗体を用いるCD34-HSCの高度純化法を開発し、ヒトHSCに特異的な陽性分子マーカーを同定した。また、NOGマウスを用いてCD34-HSCがCD34+CD38-HSCよりも未分化であることを示し、新たな階層制を提唱した。

研究成果

• [雑誌論文] The low level of c-kit expression marks deeply quiescent murine hematopoietic stem cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Matsuoka Y, Sasaki Y, Nakatsuka R, Takahashi M, Iwaki R, Uemura Y, Sonoda Y
  • 雑誌名: Stem Cells 巻: 29 ページ: 1783-1791
  • 査読あり
• [雑誌論文] CXCL8 enhances the angiogenic activity of umbilical cord blood-derived outgrowth endothelial cells in vitro (2011)
  • 著者名/発表者名: Kimura T, Kohno H, Matsuoka Y, Murakami M, Nakatsuka R, Hase H, Yasuda K, Uemura Y, Sasaki Y, Fukuhara S, Sonoda Y
  • 雑誌名: Cell Biol Int 巻: 35 ページ: 201-208
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of a high resolution purification method for precise functional characterization of primitive human cord blood-derived CD34-negative SCID-repopulating cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Ishii M, Matsuoka Y, Sasaki Y, Nakatsuka R, Takahashi M, Nakamoto T, Yasuda K, Matsui K, Asano H, Uemura Y, Fukuhara S, Sonoda Y
  • 雑誌名: Exp Hematol 巻: 39 ページ: 203-213
  • 査読あり
• [雑誌論文] CD16 antigen is a positive marker of peripheral blood-derived early endothelial progenitor cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Kimura T, Kohno H, Matsuoka Y, Nakatsuka R, Sasaki Y, Fukuhara S, Sonoda Y
  • 雑誌名: Int J Hematol 巻: 93 ページ: 123-125
  • 査読あり
• [雑誌論文] 5-Aza-2'-deoxycytidine treatment induces skeletal myogenic differentiation of mouse dental pulp stem cells (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakatsuka R, Nozaki T, Uemura Y, Matsuoka Y, Sasaki Y, Shinohara M, Ohura K, Sonoda Y
  • 雑誌名: Arch Oral Biol 巻: 55 ページ: 350-357
  • 査読あり
• [雑誌論文] ヒト未分化CD34抗原陰性造血幹細胞の純化とその幹細胞特性 (2010)
  • 著者名/発表者名: 薗田精昭
  • 雑誌名: 血液・腫瘍科 巻: 61 ページ: 224-232
• [雑誌論文] In vivo dynamics of human cord blood-derived CD34-SCID-repopulating cells using intra-bone marrow injection (2010)
  • 著者名/発表者名: Kimura T, Matsuoka Y, Murakami M, Kimura T, Takahashi M, Nakamoto T, Yasuda K, Matsui K, Kobayashi K, Imai S, Asano H, Nakatsuka R, Uemura Y, Sasaki Y, Sonoda Y
  • 雑誌名: Leukemia 巻: 24 ページ: 162-168
  • 査読あり
• [雑誌論文] Marginal expression of CXCR4 on c-kit+Sca-1+Lineage-hematopoietic stem/progenitor cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Sasaki Y, Matsuoka Y, Hase M, Toyohara T, Murakami M, Takahashi M, Nakatsuka R, Uemura Y, Sonoda Y
  • 雑誌名: Int J Hematol 巻: 90 ページ: 553-560
  • 査読あり
• [学会発表] マウス組織に由来する間葉系幹細胞と歯髄幹細胞機能比較～ヒト造血幹細胞のin vitro支持能に関して (2012)
  • 著者名/発表者名: 中塚隆介、松岡由和、岩城隆二、高橋雅也、佐々木豊、薗田精昭
  • 学会等名: 第34回日本造血細胞移植学会総会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2012-02-25
• [学会発表] 造血幹細胞とニッチ (2012)
  • 著者名/発表者名: 佐々木豊
  • 学会等名: 第34回日本造血細胞移植学会総会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2012-02-25
• [学会発表] A novel model of human hematopoietic stem cell hierarchy (2012)
  • 著者名/発表者名: Sonoda Y
  • 学会等名: The 34th Annual Meeting of the Japan Society for Hematopoietic Cell Transplantation. Presidential Symposium
  • 発表場所: Osaka
  • 年月日: 2012-02-24
• [学会発表] ヒト造血幹細胞支持能を有するヒト骨髄由来間葉系幹細胞の予期的分離 (2012)
  • 著者名/発表者名: 松岡由和、高橋雅也、岩城隆二、佐々木豊、中塚隆介、河野比良夫、植村靖史、井上雅美、小川啓恭、高橋隆幸、石川淳、日野雅之、薗田精昭
  • 学会等名: 第34回日本サイトメトリー学会ワークショップ
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2012-02-24
• [学会発表] マウス切歯由来歯髄幹細胞によるヒト造血幹細胞のin vitro支持能の検討 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中塚隆介、松岡由和、岩城隆二、高橋雅也、佐々木豊、薗田精昭
  • 学会等名: 第73回日本血液学会総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2011-10-14
• [学会発表] 新しいヒト造血幹細胞の分化経路・階級性の提唱 (2011)
  • 著者名/発表者名: 薗田精昭
  • 学会等名: 第64回大阪血液疾患談話会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2011-07-02
• [学会発表] マウス骨髄造血幹細胞分画におけるc-kit発現レベルの検討 (2011)
  • 著者名/発表者名: 佐々木豊、松岡由和、中塚隆介、高橋雅也、岩城隆二、植村靖史、薗田精昭
  • 学会等名: 第21回日本サイトメトリー学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-06-26
• [学会発表] 歯形成端に存在する新規マウス歯髄幹細胞の予期的分離と特性解明 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中塚隆介、松岡由和、岩城隆二、高橋雅也、佐々木豊、薗田精昭
  • 学会等名: 第21回日本サイトメトリー学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-06-26
• [学会発表] ヒト造血幹細胞支持能を有するヒト骨髄由来間葉系幹細胞の予期的分離 (2011)
  • 著者名/発表者名: 松岡由和、佐々木豊、薗田精昭
  • 学会等名: 第21回日本サイトメトリー学会会長シンポジウム
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-06-25
• [学会発表] Identification and functional characterization of human primitive CD34-negative hematopoietic stem cells : Proposal of novel model of human hematopoietic cell hierarchy (2011)
  • 著者名/発表者名: Sonoda Y
  • 学会等名: 1st Baltic Stem Cell Meeting
  • 発表場所: Szczecin, Poland
  • 年月日: 2011-05-28
• [学会発表] Hypoxic culture condition facilitate the proliferation and differentiation potentials of mouse dental pulp stem cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakatsuka R, Matsuoka Y, Takahashi M, Iwaki R, Sasaki Y, Sonoda Y
  • 学会等名: The 9th Stem Cell Research Symposium
  • 発表場所: Tokyo
  • 年月日: 2011-05-14
• [学会発表] Dynamics of the expression of CXCR4 on murine hematopoietic stem/progenitor cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Sasaki Y, Matsuoka Y, Takahashi M, Iwaki R, Nakatsuka R, Sonoda Y
  • 学会等名: The 9th Stem Cell Research Symposium
  • 発表場所: Tokyo
  • 年月日: 2011-05-14
• [学会発表] 未分化造血幹細胞の支持能を持つヒト骨髄由来間葉系幹細胞の予期的分離とその機能解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 松岡由和、佐々木豊、高橋雅也、岩城隆二、中塚隆介、井上雅美、小川啓恭、高橋隆幸、石川淳、日野雅之、薗田精昭
  • 学会等名: 第33回日本造血細胞移植学会
  • 発表場所: 松山
  • 年月日: 2011-03-10
• [学会発表] ヒト造血幹細胞の本体はどこまで解明されたのか (2011)
  • 著者名/発表者名: 薗田精昭
  • 学会等名: 第6回近畿血液疾患治療研究会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-01-22
• [学会発表] Prospective isolation of mouse Sca-1+PDGFR□+dental pulp stem cells(DPSCs) existing in the tooth forming niche (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakatsuka R, Uemura Y, Matsuoka Y, Sasaki Y, Sonoda Y
  • 学会等名: The 8th Stem Cell Research Symposium
  • 発表場所: Awaji
  • 年月日: 20100513-15
• [学会発表] Prospective isolation and functional characterization of human bone marrow-derived hematopoietic stem cell-supportive mesenchymal stromal cells (2010)
  • 著者名/発表者名: Sonoda Y
  • 学会等名: Hematology Conference
  • 発表場所: James Graham Brown Cancer Center, University of Louisville, Louisville, U. S. A.
  • 年月日: 2010-12-10
• [学会発表] Prospective isolation and functional characterization of human bone marrow-derived hematopoietic stem cell-supportive mesenchymal stromal cells (2010)
  • 著者名/発表者名: Matusoka Y, Sasaki Y, Takahashi M, Nakatsuka R, Uemura Y, Inoue M, Ogawa H, Takahashi T, Ishikawa J, Hino M, Sonoda Y
  • 学会等名: The 52nd Annual Meeting of American Society of Hematology
  • 発表場所: Orland, U. S. A
  • 年月日: 2010-12-07
• [学会発表] Characterization of murine hematopoietic stem cell compartment based on the c-kit expression level (2010)
  • 著者名/発表者名: Sasaki Y, Matusoka Y, Nakatsuka R, Uemura Y, Sonoda Y
  • 学会等名: 第72回日本血液学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2010-09-25
• [学会発表] Prospective isolation and functional characterization of human bone marrow-derived MSCs (2010)
  • 著者名/発表者名: Matusoka Y, Sasaki Y, Takahashi M, Nakatsuka R, Inoue M, Ogawa H, Takahashi T, Ishikawa J, Hino M, Uemura Y, Sonoda Y
  • 学会等名: 第72回日本血液学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2010-09-24
• [学会発表] ヒト未分化CD34抗原陰性造血幹細胞の高度純化と特性解明 (2010)
  • 著者名/発表者名: 佐々木豊、石井真理、松岡由和、薗田精昭
  • 学会等名: 第20回日本サイトメトリー学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-06-26
• [学会発表] Prospective isolation and functional characterization of human hematopoietic stem cell-supportive mesenchymal stromal cells (2010)
  • 著者名/発表者名: Matsuoka Y, Sasaki Y, Takahashi M, Nakatsuka R, Uemura Y, Sonoda Y
  • 学会等名: The 8th Stem Cell Research Symposium
  • 発表場所: Awaji
  • 年月日: 2010-05-13
• [学会発表] High resolution purification and functional characterization of primitive human cord blood-derived CD34-negative SRCs (2010)
  • 著者名/発表者名: Sasaki Y, Murakami M, Matsuoka Y, Takahashi M, Nakatsuka R, Uemura Y, Sonoda Y
  • 学会等名: The 8th Stem Cell Research Symposium
  • 発表場所: Awaji
  • 年月日: 2010-05-13
• [学会発表] Sca-1陽性PDGFRα陽性マウス歯髄幹細胞の予期的分離と特性の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 中塚隆介、松岡由和、岩城隆二、高橋雅也、佐々木豊、薗田精昭
  • 学会等名: 第9回日本再生医療学会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2010-03-19
• [学会発表] ヒト臍帯血由来未分化CD34抗原陰性造血幹細胞の純化とその特性解明 (2010)
  • 著者名/発表者名: 村上真理、松岡由和、中塚隆介、高橋雅也、植村靖史、佐々木豊、福原資郎、薗田精昭
  • 学会等名: 第32回日本造血細胞移植学会
  • 発表場所: 浜松
  • 年月日: 2010-02-19
• [学会発表] Isolation of mouse dental pulp-derived Sca-1+PDGFR□+tissue-committed stem cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Nakatsuka R, Matsuoka Y, Uemura Y, Sasaki Y, Sonoda Y
  • 学会等名: The 7th Stem Cell Research Symposium
  • 発表場所: Tokyo
  • 年月日: 20090515-16
• [学会発表] Kinetics of CXCR4 expression on murine steady state KSL cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Sasaki Y, Matsuoka Y, Toyohara T, Hase M, Nakatsuka R, Uemura Y, Sonoda Y
  • 学会等名: The 7th Stem Cell Research Symposium
  • 発表場所: Tokyo
  • 年月日: 20090515-16
• [学会発表] High resolution purification and characterization of human cord blood-derived CD34-negative SCID-repopulating cells with a very immature phenotype (2009)
  • 著者名/発表者名: Murakami M, Matusoka Y, Nakatsuka R, Takahashi M, Nakamoto T, Yasuda K, Matsui K, Uemura Y, Sasaki Y, Tsuji T, Fukuhara S, Sonoda Y
  • 学会等名: The 51st Annual Meeting of American Society of Hematology
  • 発表場所: New Orleans, U. S. A
  • 年月日: 2009-12-07
• [学会発表] マウス骨髄造血幹/前駆細胞はCXCR4低発現である (2009)
  • 著者名/発表者名: 佐々木豊、松岡由和、豊原貴之、長谷真、中塚隆介、植村靖史、薗田精昭
  • 学会等名: 第71回日本血液学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2009-10-25
• [学会発表] マウス骨髄由来Lineage-Sca-1+c-kitlow/-細胞の造血幹(前駆)細胞特性の解明 (2009)
  • 著者名/発表者名: 松岡由和、佐々木豊、中塚隆介、植村靖史、薗田精昭
  • 学会等名: 第71回日本血液学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2009-10-25
• [学会発表] ヒト未分化CD34抗原陰性造血幹細胞の純化とその特性解明 (2009)
  • 著者名/発表者名: 村上真理、松岡由和、中塚隆介、植村靖史、佐々木豊、福原資郎、薗田精昭
  • 学会等名: 第71回日本血液学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2009-10-23
• [学会発表] In vivo dynamics of human cord blood-derived CD34-negative SCID-repopulating cells(SRCs) in comparison to CD34+CD38+and CD34+CD38-SRCs using intra-bone marrow injection (2009)
  • 著者名/発表者名: Sonoda Y, Kimura T, Matusoka Y, Murakami M, Nakamoto T, Yasuda K, Nakatsuka R, Uemura Y, Sasaki Y
  • 学会等名: TERMIS 2nd World Congress
  • 発表場所: Seoul, Korea
  • 年月日: 2009-09-02
• [備考] 幹細胞生物学講座(衛生学講座)
  • URL: http://WWW3.kmu.ac.jp/hygiene/index.html