| 研究概要 |
UBE3Aは細胞内の蛋白質分解経路であるユビキチン、プロテオゾーム系酵素のユビキチンリガーゼとして働くタンパク質であり、その異常は小児先天性疾患であるアンジェルマン症候群(AS)を引き起こす。今回申請者はAS原因遺伝子UBE3Aトランスジェニック(Tg)マウスを作製し、脳の発生・成熟段階におけるUBE3Aの機能を解析する。UBE3ATg♂マウスとUbe3aKOマウス(父親由来アレルのUbe3a欠失マウス:Ube3a m+/p-♀マウスを交配し、F1を4パターンの遺伝子型を持つマウスに分類し行動解析を行った。野生型、野生型+Tg、母親由来アレルのUbe3a欠失マウス(ASモデルマウス)、母親由来アレルのUbe3a欠失マウス(ASモデルマウス)のTg rescueのオス各約20匹の解析では、.野生型+Tgでは特に行動上の異常は見られなかった。ASモデルマウスでは活動量(Openfieldでの主に立ち上がり)の低下、不安様行動(Elevated plusmaze:高架式十字迷路)の低下、運動学習(rotarod test)の低下、痛覚感受性(Hot plate test)の低下、社会的行動(Social interaction test)の異常が見られたが、Tgにより、不安様行動、痛覚感受性、社会的行動がある程度回復していることが示唆された。最近、Ube3aは興奮性刺激と共に発現が上昇する事が報告された。平成23年度では、Ube3a m+/p-:Tgマウスの胎児脳神経細胞を培養し、KC1,AP5等で興奮性刺激を行い、外来性Ube3aの発現の有無を観察したが、有意な上昇は見られなかった。以上の結果より、外来性UBE3Aにより神経細胞全体におけるUBE3A量は補充されても、興奮性刺激に反応した外来性UBE3Aの発現上昇が見られない事が、本TgマウスにおいてASの症状が劇的には改善されない理由の一つと考えられた。
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