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2010 年度 実績報告書

新規に開発したEBV感染細胞同定法によるEBV関連疾患の診断および病態解析

研究課題

研究課題/領域番号 21591384
研究機関名古屋大学

研究代表者

木村 宏  名古屋大学, 医学系研究科, 准教授 (30303621)

研究分担者 伊藤 嘉規  名古屋大学, 医学部附属病院, 講師 (20373491)
キーワードEBV / FISH / in situ hybridization / 感染細胞 / 慢性活動性EBV感染症 / γδT細胞 / 種痘様水疱症
研究概要

【研究の目的】 EBV関連リンパ増殖性疾患の診断・発症病理の解明には、EBV感染細胞の定量と同定が必須である。これまで、侵襲の強い病理組織診による感染細胞同定法は確立されているが、末梢血中を用いた再現性の高い方法は無かった。我々はEBV encoded small RNA (EBER)特異的プローブを用い、細胞表面抗原とEBERを連続的に染色するFISH法を確立した。本年度は、症例数を増やして、このFISH法を患者の末梢血へ応用し、様々なEBV関連リンパ増殖性疾患の非侵襲的診断と病態解析に用いた。
【材料と方法】 対象は慢性活動性EBV感染症9例、種痘様水疱症様リンパ腫7例、血球食食性リンパ組織球症4例、全身性EBV陽性T細胞リンパ増殖症2例、NK/T細胞リンパ腫2例、末梢性T細胞リンパ腫1例、アグレッシブNK細胞性白血病1例の計26例。FISH法で末梢血単核球の表面抗原染色と核内EBER染色を連続施行後flow cytometoryで解析した。
【結果】 0.15~67%のリンパ球がEBER陽性で、EBER陽性細胞率0.5%以上の症例は感染細胞の同定が可能だった。2例では2種類の細胞群にEBVの感染を認めた。種痘様水疱症様リンパ腫はγδT細胞5例、NK細胞1例、NKT細胞1例に感染を認めた。本法のEBER陽性細胞率とリアルタイムPCR法のEBV-DNA量に有意な相関を認めた。
【考察】 一定以上の感染細胞が存在する場合、本法によるEBV感染細胞の同定/定量が可能である。特に複数のlineageの細胞にEBVが感染する疾患の診断に有用である。本法は既存の方法で診断の難しいT/NKリンパ増殖性疾患の病理学的診断を補完し、疾患分類や発症病理の解析に役立つと考えた。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2010

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] Immunologic and Virologic Analyses in Pediatric Liver Transplant Recipients with Chronic High Epstein-Barr Viral Loads.2010

    • 著者名/発表者名
      Gotoh K
    • 雑誌名

      Journal of Infectious Diseases

      巻: 202 ページ: 461-469

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Detection of EBV genomes in plasmablasts/plasma cells and non-B cells in the blood of most patients with EBV lymphoproliferative disorders using Immuno-FISH.2010

    • 著者名/発表者名
      Calatini S
    • 雑誌名

      Blood

      巻: 116 ページ: 4546-4559

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Multicenter evaluation of prototype real-time PCR assays for Epstein-Barr virus and cytomegalovirus DNA in whole blood samples from transplant recipients.2010

    • 著者名/発表者名
      Ito Y
    • 雑誌名

      Microbiology and Immunology

      巻: 54 ページ: 516-522

    • 査読あり
  • [学会発表] Noninvasive identification of EBV-infected lymphocyte subtypes in EBV-associated T/NK lymphoproliferative diseases.2010

    • 著者名/発表者名
      Kimura H
    • 学会等名
      The 14^<th> Biennial Conference of the International Association for Research on Epstein-Barr virus & Associated Diseases
    • 発表場所
      Birmingham, UK.
    • 年月日
      2010-09-07

URL: 

公開日: 2012-07-19  

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