| 研究課題/領域番号 |
21591663
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
菊森 豊根 名古屋大学, 医学部附属病院, 病院助教 (90402635)
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| 研究分担者 |
林 良敬 名古屋大学, 環境医学研究所, 准教授 (80420363)
小林 猛 中部大学, 応用生物学部, 教授 (10043324)
中尾 昭公 名古屋大学, 医学系研究科, 教授 (70167542)
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| キーワード | BRAF / 甲状腺癌 / 温熱治療 / ヒートショック蛋白 |
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| 研究概要 |
【培養細胞実験】BRAF変異を有するヒト癌培養細胞における各種遺伝子発現の検討。
1.ヒト癌培養細胞株であるNPA細胞においてPCR-RFLP法によりBRAFの変異を確認した
2.NPA細胞においてsiRNAを用いてBRAFのmRNA発現を抑制することにより、悪性化の指標である遺伝子群の発現が抑制された。
3.NPA細胞以外のBRAF変異を持つヒト甲状腺乳頭癌細胞株としてK1細胞、変異を有さないヒト甲状腺乳頭癌細胞株としてTPC-1においてBRAFのmRNAの発現をreal-time RT-PCRで検討した。
4.ヒートショック蛋白抑制剤である17-AAGの添加により変異BRAFが抑制され、細胞増殖が抑制されることが予想されている。乳がん細胞株で17-AAGの添加によりアポトーシスが誘導され、細胞増殖が抑制された。
【臨床検体をもちいた実験】甲状腺乳頭癌臨床検体を用いてBRAF変異と悪性度の関連を検討した。
1.ヒト甲状腺乳頭癌臨床検体を用いてダイレクトシークエンス法によりBRAFの変異を検討し、約9割で変異を認めた。
2.ヒト甲状腺乳頭癌臨床検体での検討で、変異BRAF mRNAの発現と悪性度の関連する遺伝子のmRNAの発現に有意な正の相関を認めた。また、分化度を反映する遺伝子のmRNAの発現との間には負の相関傾向を認めた。
培養細胞実験、臨床検体を用いた実験の結果は国際専門誌(査読あり)であるEndocrine Journalに掲載された。またアポトーシスの関連については日本乳癌学会総会にて口頭発表した。
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