| 研究概要 |
下肢切断を免れない重症下肢虚血の患者に対する治療として血管新生療法が注目を浴びている。生体内での血管新生は様々な増殖因子の相互作用により成り立っており、単一増殖因子での方法の限界が報告されている。
そこで我々は、血小板を濃縮した多血小板血漿Platelet Rich Plasma : PRPに注目した。PRPは様々な血管新生因子・組織再生因子を含んでおり、これらを生体吸収性ゼラチンハイドロゲルにて徐放することによる相乗効果を検討した。我々は糖尿病マウス下肢虚血モデルにおいてゼラチンハイドロゲルを用いたPRP投与の有効性を確認した(Bir SC, Esaki J, Marui A, et al., J Vasc Res.2011 ; 48(3) : 195)。そして、PRPにはVEGF、bFGF以外にSDF-1、PDGF-BBなどの豊富な増殖因子を含んでいることが確認し、またPRP徐放化ゼラチンハイドロゲルをマウス虚血下肢モデルに筋肉注射することで、レーザードップラー血流計による血流改善や、組織評価による血管新生・動脈形成効果も確認した。
平成23年度は虚血下肢に対する血管新生療法の臨床応用を目指して、より成熟性の高い血管新生を得るための方策を、ウサギ下肢虚血モデルを用いて検討した。臨床応用する上での最優先事項であるまず検証した。ウサギ下肢虚血モデルを作製し、切離した動脈近傍の大腿四頭筋に、生理食塩水10mlにて希釈したゼラチンハイドロゲルを各1mlずつ、合計10か所に局所筋肉内投与した。ゼラチンハイドロゲルを投与した近傍の肉片を切離して、癌抑制遺伝子であるp53および予後不良癌で発現がみられる上皮成長因子受容体EGFR(Erbb1,Erbb2)遺伝子のmRNA発現をRT-PCR法にて定量して安全性の評価を行った。未投与群に比較してp53およびEGFR遺伝子のmRNAの発現に有意差は見られなかったことから、この手法の安全性が示唆された。
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