| 研究課題/領域番号 |
21592119
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
新倉 仁 東北大学, 大学院・医学系研究科, 准教授 (80261634)
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| 研究分担者 |
永瀬 智 東北大学, 大学院・医学系研究科, 准教授 (00292326)
吉永 浩介 東北大学, 病院, 准教授 (40343058)
大槻 健郎 東北大学, 病院, 助教 (40531330)
海法 道子 東北大学, 病院, 助教 (50531331)
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| キーワード | 子宮内膜癌 / タモキシフェン / PTEN / 発癌 / ノックアウトマウス |
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| 研究概要 |
本研究の第一の目標はタモキシフェンを投与した際に、子宮内膜腺で特異的に発現するプロモーターを同定し、その下流で酵素Creを発現するトランスジェニックマウスを作成することである。さらにこのマウスをCre-loxP systemでCre発現部位でのみ癌抑制遺伝子PTEN欠失するマウス(PTEN^<lox/lox>)と交配し、タモキシフェン投与下で子宮内膜癌が発生するマウス発癌モデルを作成する事を最終的な目標としている。
これまでの計画通り、タモキシフェン投与下に子宮内膜腺で特異的に発現するプロモーターを同定し、その下流で酵素Creを発現するトランスジェニックマウスを作成することが当初の目的であるため以下に示すような手順で実験を継続している。
実験(1):タモキシフェン投与時の特異的0遺伝子発現の確認、および実験(2):Creトランスジェニックマウスの作成について集約的に実行している。
実験(1)としては去勢した8-12週齢のメスC57/B6マウスを用いてタモキシフェン投与群とコントロール群に分けて子宮内膜をそれぞれレーザーキャプチャーマイクロダイセクション法で分離し、RNAを抽出し、マイクロアレイを行った。統計的解析を行い候補分子を検索している段階である。
実験(2)についてはすでにCre遺伝子フラグメントをクローニングベクターに組み込み済みであり、実験(1)で候補に挙がった子宮内膜特異的発現プロモーターが有望であれば速やかにサブクローニング可能な状態にはなっている。Creの発現確認用のROSA26レポーターマウスも動物施設にて繁殖中である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
タモキシフェン投与群とコントロール群に分けてマウスの子宮内膜をそれぞれレーザーキャプチャーマイクロダイセクション法で分離し、RNAを抽出し、マイクロアレイを行っていたが有望な特異的プロモーターの探索に時間がかかった。
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| 今後の研究の推進方策 |
タモキシフェン投与時の特異的遺伝子発現の確認、およびCreトランスジェニックマウスの作成について集約的に実行することが可能なように、Cre遺伝子フラグメントをクローニングベクターに組み込み済みであり、候補に挙がった子宮内膜特異的発現プロモーターが有望であれば速やかにサブクローニング可能な状態になっている。
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