| 研究概要 |
ヒト好酸球性中耳炎において中耳腔における炎症性タンパクを網羅的に解析した。好酸球性中耳炎の症例より中耳貯留液を採取し、RayBio^<[○!R]> Human Cytokine Antibody Array G Series 2000を用いてタンパク解析を行った。実験の概略はまず中耳貯留液サンプルのタンパク濃度を測定しBlocking Bufferで希釈した。次にサンプル180μL(タンパク質として100μg)をアレイにアプライし、室温で2時間インキュベートした。アレイを洗浄後、Biotin-Conjugated Antibody、Fluorescent dye-conjugated streptavidinを順次、アレイにアプライしインキュベートした。洗浄後、25℃,1000rpm,3分間遠心した後、20分間遮光下にてスライドグラスを乾燥させた。この後にマイクロアレイ用スキャナーGenePix4000^<[○!R]> scanner (Molecular Devices)を用いてマイクロアレイのスキャニングを行った。その結果、好酸球性中耳炎症例の中耳貯留液中には以下の炎症性タンパクが有意なレベルで存在することが明らかとなった。IL-6、Angiogenin、PARC、IL-1β、MCP-1、MIP-3α、NAP-2、MIP-1δ、IL-16、IL-5、IL-1α、IGFBP-1、IL-13、IL-3、MDC、Eotaxin-2、TNF-α、IL-15、LIGHT、TNF-β、Leptin、IL-2、BMP-4、RANTES、GCP-2、MIG、BMP-6、GDNF、IFN-γ、BLC、BDNF、TGF-β1、MCP-2、TARC、IL-7、IL-4、Eotaxin-3、Eotaxin、M-CSF、Fit-3 Ligand、IGFBP-4、EGF、IL-10、SDF-1、PDGF-BB、SCF、CNTF、IL-1ra、Fractalkine、GM-CSF、IGF-I、MCP-3、TGF-β3、IGFBP-2、FGF-6、FGF-7、NT-3、MCP-4、I-309、CKβ8-1、GRO、Acrp30、MIP-1β、TIMP-2、MIP-1α、IL-8、MIF、TIMP-1、uPAR、IL-6R、TRAIL R3、sTNF RII、GRO-α、sgp130、sTNF-RI、ICAM-1、VEGF、IGFBP-6、IL-2Rα、I-TAC、HGF、Fas/TNFRSF6、ENA-78、bFGF、MIP-3β、G-CSF、NT-4、IL-11、Amphiregulin、Angiopoietin-2、IL-1 R4/ST2、Lymphotactin、IL-17、EGF-R、MSP-α、FGF-4、b-NGF、CTACK、IL-12 p70、GITR、TRAIL R4、IGFBP-3、0steoprotegerin、IL-12 p40、Thrombopoietin、Axl、CCL-28、IGF-ISR、AgRP、PIGF、FGF-9、Dtk、IL-1RI、TECK、LIF、IGF-II、MMP-9、CD14、IL-18 BPa、IL-13Ra2、SCF-R、LAP、L-Selectin、ICAM-2、M-CSF R、IIMP-1、VEGF R2、MPIF-1、ALCAM、DR6(TNFRSF21)、IL-21R、Siglec-5、CXCL-16、MMP-3、TGF-b2、BMP-7、Fas Ligand、IP-10、PDGF AA、PDGF Rb、ErbB3、NGF-R、IL-1R II、E-Selectin、IL-2Rb、PECAM-1、Endoglin、B7-1(CD80)、Activin A、VEGF R3、VE-Cadherin、IL-5 Ra、PDGF-AB、SDF-1b、IL-9、Tie-1、TGF-a、IL-10Rb、Cardiotrophin-1、BMP-5、IL-2 Rg、Prolactin、PDGF Ra、Tie-2、Leptin R今回の検討で、好酸球性中耳炎の炎症に関与する炎症性タンパクの候補が絞り込まれたことは意義深いと思われる。
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