| 研究課題/領域番号 |
21592164
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| 研究機関 | 和歌山県立医科大学 |
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研究代表者 |
保富 宗城 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (90336892)
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| 研究分担者 |
山中 昇 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (10136963)
田村 真司 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (10244724)
戸川 彰久 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (70305762)
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| キーワード | 肺炎球菌 / 母体免疫 / PspA / Interleukin-17A |
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| 研究概要 |
遺伝子組み換えPspAの作成:TOPOTAクローニングキットおよびpETシステムを用い、肺炎球菌TIGR4株よりPspA遺伝子をクローニングし、大腸菌にてPspA蛋白を発現させた後に、Niクロマトグラフィーにて精製した。
母体免疫による肺炎球菌特異的免疫応答の誘導:PspAにて雌マウスを1週間に2回、3週間の経鼻免疫免疫を行った後に雄マウスと交配し新生児マウスを得た。新生児マウス出産後に母親マウスの母乳中の抗PspA-IgAおよび-IgG、血清中抗PspA-IgAおよび-IgGの誘導、さらに新生児マウスの血清中抗PspA-IgGの変化をLISA法にて検討した。これらの検討の結果、母体免疫により母マウス母乳中および血清中さらに新生児マウス血清中に抗PspA-IgGが誘導されることが判明した。
母体免疫による新生児マウスの肺炎球菌感染予防効果:3種類の感染モデルを作成し、検討を行った。すなわち新生児マウスに肺炎球菌TIGR4株を覚醒下に経鼻接種、麻酔下に経鼻接種、腹腔内接種を行い、それぞれ鼻咽腔保菌モデル、肺炎モデル、全身感染モデルを作成した。いずれの感染モデルにおいても、免疫群由来の新生児マウスは非免疫群由来の新生児マウスと比較し、肺炎球菌感染に対する予防効果を有意に認めた。
母体免疫により新生児マウスに誘導されるTh1/Th2/Th17系免疫応答についての検討:生後7日目に新生児マウス脾臓よりリンパ球を分離し、PspA、コンカナバリンAにて72時間刺激した後に、リンパ球の培養上清に産生されたIL-4、IFN-Y、IL-17をELISA法にて測定した。PspA母体免疫母マウス由来の新生児マウスリンパ球では、PspA刺激によりIL-17が産生されることから、母体免疫のメカニズムにTh17系免疫応答が関与していることが示唆された。
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