|
近年ヒストン蛋白が修飾を受けクロマチンが構造変化することで、DNAからの転写が調節されていることが判明してきた。アレルギー性疾患においても、ナイーブT細胞からTH2型細胞への分化の本質がクロマチンの構造変化に起因することが示され、発症や炎症の維持に重要な役割を果たす。今回の研究ではピストン脱アセチル化作用を持つSIRT1蛋白に注目し、肥満細胞のIL-4産生におけるこの蛋白の関与の検討をおこなった。
実験にはヒト肥満細胞株(HMC-1)を用いている。HMC-1にSIRT1の活性化剤(resveratrol)と阻害剤(splitomysin)を加え、カルシウムイオノファー(A23187)とPMAにて刺激した。刺激後、4時間培養後に細胞を回収した。回収した細胞よりmRNAを採取し、Real time PCR法にてIL-4の産生量の検討をおこなうと伴にカルシウムイオノファーとPMAで細胞刺激し、24時間培養した後に培養上清を回収した。ELISA法にてIL-4蛋白濃度を測定した。
これらをSIRT1活性化剤(resveratrol)にて処理をしたところ、IL-4のmRNA量がresveratrolの濃度依存的に減少することが判明した。また蛋白レベルでもresveratrolの濃度依存的にIL-4蛋白量が減少した。逆にSIRT1阻害剤(splitomysin)で処理をした細胞では、IL-4のmRNA、蛋白量がsplitomysinの濃度依存的に増加することが分かり、アレルギー性鼻炎治療との併用による予後改善へと繋がることが期待できる。
|
