再生に向けたヒト人工多能性幹細胞を用いた網膜変性疾患の病態解明

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21592265
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 小沢 洋子 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (90265885)
• キーワード: 網膜 / 視細胞 / 再生 / iPS / 神経保護

研究概要

再生に向けたヒト人工多能性幹(iPS)細胞を用いた網膜変性疾患の病態解析をするためには、iPS細胞からの網膜細胞への分化誘導系を、申請者の研究室で立ち上げる必要があった。これに対し、申請者は平成21年度にまず、既存のiPS細胞(山中研究室より供与された253G1細胞および201B7細胞)を用い、既報を元に網膜細胞を分化誘導することに成功した。浮遊培養と接着培養を組み合わせた方法である。分化誘導された細胞で、Pax6などの特徴的転写因子、ロドプシンなどの特異的マーカーを発現していることを確認した。
さらに、患者皮膚細胞を採取し、皮膚細胞に山中4因子をレトロウイルスで導入することで、患者細胞由来iPS細胞を樹立した。iPS細胞では、遺伝子導入部位などにより、その性質に株間のばらつきがある可能性があった。そこで50ラインの患者由来iPS細胞を樹立した。そして、その一部を用いて、トランスジーン(4因子)の検定等、iPS細胞の性質を解析した。その方法は共同研究者の岡野栄之教授より伝授された。その結果、樹立した細胞株の少なくとも一部では、iPS細胞への適切な誘導がなされていることが明らかになった。患者遺伝子を有した皮膚由来のiPS細胞の樹立は、遺伝子異常疾患の病態解明のために重要な部分であり、この樹立に成功したことは意義深い。今後はこの細胞を用いて、患者由来iPS細胞から網膜細胞を誘導する研究に移行する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Neurodegenerative influence of oxidative stress in the retina of a murine model of diabetes (2010)
  • 著者名/発表者名: Sasaki M, Ozawa Y, Kurihara T, Kubota S, Yuki K, Noda K, Kobayashi S, Ishida S, Tsubota K.
  • 雑誌名: Diabetologia (In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] (Pro)renin receptor-mediated signal transduction and tissue renin-angiotensin system contribute to diabetes-induced retinal inflammation (2009)
  • 著者名/発表者名: Satofuka S, Ichihara A, Nagai N, Noda K, Ozawa Y, Fukamizu A Tsubota K, Itoh H, Oike Y, Ishida S.
  • 雑誌名: Diabetes 58(7) ページ: 1625-1633
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prevention of ocular inflammation in endotoxin-induced uveitis with resveratrol by inhibiting oxidative damage and nuclear factor-kappaB activation (2009)
  • 著者名/発表者名: Kubota S, Kurihara T, Mochimaru H, Satofuka S, Noda K, Ozawa Y, Oike Y, Ishida S, Tsubota K.
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci 50(7) ページ: 3512-3519
  • 査読あり
• [雑誌論文] Involvement of Hyaluronan and Its Receptor CD44 with Choroidal Neovascularization (2009)
  • 著者名/発表者名: Mochimaru H, Takahashi E, Tsukamoto N, Miyazaki J, Yaguchi T, Koto T, Kurihara T, Noda K, Ozawa Y, Ishimoto T, Kawakami Y, Tanihara H, Saya H, Ishida S, Tsubota K.
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci. 50(9) ページ: 4410-4415
  • 査読あり
• [雑誌論文] Retinal phototoxicity in a novel murine model of intraocular lens implantation (2009)
  • 著者名/発表者名: Kurihara T, Omoto M, Noda K, Ebinuma M, Kubota S, Koizumi H, Yoshida S, Ozawa Y, Shimmura S, Ishida S, Tsubota K.
  • 雑誌名: Mol Vis. 15 ページ: 2751-2761
  • 査読あり
• [学会発表] SOCS3 is required to temporally fine-tune photoreceptor cell differentiation (2009)
  • 著者名/発表者名: Ozawa Y, Nakao K, Tsubota K, Yoshimura A, Okano H.
  • 学会等名: OIST Retinal Workshop"The Retina : Neural Stem Cells and Photoreceptor Degeneration"
  • 発表場所: Okinawa
  • 年月日: 20091109-20091111
• [学会発表] ルテインによるマウス網膜炎症モデルにおける網膜神経保護効果の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 佐々木真理子, 小沢洋子, 栗原俊英, 野田航介, 石田晋, 坪田一男
  • 学会等名: 日本基礎老化学会第32回大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20090618-20090620
• [学会発表] ルテインによるマウス光障害モデルにおける網膜神経保護効果の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 佐々木真理子, 栗原俊英, 坪田一男, 小沢洋子
  • 学会等名: 第113回日本眼科学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20090416-20090419
• [学会発表] 網膜再生医療の現状と展望 (2009)
  • 著者名/発表者名: 小沢洋子
  • 学会等名: 第113回日本眼科学会専門別研究会「眼科再生医療研究会」
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2009-10-09
• [備考]
  • URL: http://www.keio-eye.net/research/rcb.html