再生に向けたヒト人工多能性幹細胞を用いた網膜変性疾患の病態解明

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21592265
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 小沢 洋子 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (90265885)
• キーワード: 網膜 / 視細胞 / 再生 / iPS / 神経保護

研究概要

再生に向けたヒト人工多能性幹(iPS)細胞を用いた網膜変性疾患の病態解析をするために、申請者の研究室でもiPS細胞からの網膜細胞への分化誘導系を立ち上げた。浮遊培養と接着培養を組み合わせた方法である。山中研究室より供与された201B7細胞に加え、患者皮膚細胞を採取し、皮膚細胞に山中4因子をレトロウイルスで導入することで樹立した患者の遺伝子異常を持ったiPS細胞でも、誘導を開始した。患者由来iPS細胞では、遺伝子導入部位などにより、その性質に株間のばらつきがある可能性があった。そこで樹立した患者由来細胞株50ラインのうちで、トランスジーン(4因子)の検定等の解析から、iPS細胞の性質を持つと判断された細胞株において、申請者の研究室で網膜細胞を誘導し、その性質を解析中である。分化誘導された細胞で、Pax6などの特徴的転写因子、ロドプシンなどの特異的マーカーを発現していることを確認している。また、網膜への分化誘導が可能で、研究に有用と判断された細胞株において、さらにiPS細胞の性質を確定するために、マウスへの移植を行い、テラトーマの作成による3胚葉への分化の可能性があることを実証した。
本研究で、患者遺伝子異常を持つiPS細胞由来の網膜細胞を培養可能になることは、その遺伝子異常による病態の解析に必須であり、重要なステップである。本細胞を用いた病態解明を、引き続き進める予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Neurodegenerative influence of oxidative stress in the retina of a murine model of diabetes. (2010)
  • 著者名/発表者名: Sasaki M, Ozawa Y, Kurihara T, Kubota S, Yuki K, Noda K, Kobayashi S, Ishida S, Tsubota K.
  • 雑誌名: Diabetologia. 巻: 53(5) ページ: 971-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] von Hippel-Lindau protein regulates transition from the fetal to the adult circulatory system in retina. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kurihara T, Kubota Y, Ozawa Y, Takubo K, Noda K, Simon MC, Johnson RS, Suematsu M, Tsubota K, Ishida S, Goda N, Suda T, Okano H.
  • 雑誌名: Development. 巻: 137(9) ページ: 1563-71
  • 査読あり
• [雑誌論文] Eicosapentaenoic acid suppresses ocular inflammation in endotoxin-induced uveitis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Suzuki M, Noda K, Kubota S, Hirasawa M, Ozawa Y, Tsubota K, Mizuki N, Ishida S.
  • 雑誌名: Mol Vis. 巻: 17 ページ: 1382-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Retinal aging and sirtuins. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ozawa Y, Kubota S, Narimatsu T, Yuki K, Koto T, Sasaki M, Tsubota K.
  • 雑誌名: Ophthalmic Res. 巻: 44(3) ページ: 199-203
  • 査読あり
• [学会発表] Oxidative stress and diabetic retinopathy. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ozawa Y.
  • 学会等名: The 24th Asia Pacific Academy of Ophthalmology Congress.
  • 発表場所: Beijing, China
  • 年月日: 20100916-20100920
• [学会発表] Resveratrol prevents light-induced retinal degeneration via suppressing activator protein-1 activation. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kubota S, Kurihara T, Ebinuma M, Kubota M, Yuki K, Sasaki M, Noda K, Ozawa Y, Oike Y, Ishida S, Tsuboto K.
  • 学会等名: Gordon Research Conference : Biology of Aging.
  • 発表場所: Les Diablerets, Switzerland
  • 年月日: 20100822-20100827
• [学会発表] Spatial distribution of VEGF establishes proper retinal vascular patterning via VHL/HIF-1 pathway. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kurihara T, Kubota Y, Ozawa Y, Suda T, Okano H, Tsubota K.
  • 学会等名: Gordon Research Conference : Biology of Aging.
  • 発表場所: Les Diablerets, Switzerland
  • 年月日: 20100822-20100827
• [学会発表] Yellow intraocular lens implantation prevents light-induced retinal damage in mice. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ebinuma M, Kurihara T, Omoto M, Noda K, Kubota S, Ozawa Y, Shimmura S, Ishida S, Tsubota K.
  • 学会等名: Association for Research in Vision and Ophthalmology (ARVO) Annual Meeting.
  • 発表場所: Fort Lauderdale, FL, USA
  • 年月日: 20100502-20100506
• [学会発表] Localization of transcriptional factors associated with epithelial-mesenchymal transition in choroidal neovascularization. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hirasawa M, Noda K, Suzuki M, Ogawa Y, Ozawa Y, Tsubota K, Ishida S.
  • 学会等名: Association for Research in Vision and Ophthalmology (ARVO) Annual Meeting.
  • 発表場所: Fort Lauderdale, FL, USA
  • 年月日: 20100502-20100506
• [学会発表] Resveratrol suppresses ocular inflammation in the diabetic retina. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kubota S, Kurihara T, Noda K, Ozawa Y, Oike Y, Ishida S, Tsubota K.
  • 学会等名: Association for Research in Vision and Ophthalmology (ARVO) Annual Meeting.
  • 発表場所: Fort Lauderdale, FL, USA
  • 年月日: 20100502-20100506
• [学会発表] von Hippel-lindau tumor suppressor protein is required for transition from embryonic to adult circulatory system in retina. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kurihara T, Kubota Y, Ozawa Y, Noda K, Johnson RS, Goda N, Ishida S, Tsubota K, Suda T, Okano H.
  • 学会等名: Association for Research in Vision and Ophthalmology (ARVO) Annual Meeting.
  • 発表場所: Fort Lauderdale, FL, USA
  • 年月日: 20100502-20100506
• [学会発表] Neuroprotective effect of an antioxidant lutein in light-induced retinal degeneration. (2010)
  • 著者名/発表者名: Sasaki M, Ozawa Y, Kurihara T, Kubota S, Yuki K, Noda K, Kobayashi S, Ishida S, Tsubota K.
  • 学会等名: Association for Research in Vision and Ophthalmology (ARVO) Annual Meeting.
  • 発表場所: Fort Lauderdale, FL, USA
  • 年月日: 20100502-20100506
• [学会発表] Purification of iPS cells derived from a retinitis pigmentosa patient from feeder cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yoshida T, Koizumi H, Yuki K, Tsubota K, Okano H, Ozawa Y.
  • 学会等名: Association for Research in Vision and Ophthalmology (ARVO) Annual Meeting.
  • 発表場所: Fort Lauderdale, FL, USA
  • 年月日: 20100502-20100506
• [学会発表] Superoxide dismutase 1 -/- mice as a model of normal-tension glaucoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yuki K, Yoshida T, Kurihara T, Kubota S, Sasaki M, Noda K, Ishida S, Ozawa Y, Tsubota K
  • 学会等名: Association for Research in Vision and Ophthalmology (ARVO) Annual Meeting.
  • 発表場所: Fort Lauderdale, FL, USA
  • 年月日: 20100502-20100506
• [備考]
  • URL: http://www.keio-eye.net/research/rcb.html