再生に向けたヒト人工多能性幹細胞を用いた網膜変性疾患の病態解明

2011 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21592265
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 小澤 洋子 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (90265885)
• キーワード: 網膜 / 視細胞 / 再生 / iPS / 神経保護

研究概要

再生に向けたヒト人工多能性幹細胞(induced-Pluiripotent Stem cell;iPS細胞)を用いた網膜変性疾患の病態解析をするために、申請者の研究室でも立ち上げた、iPS細胞からの網膜細胞への分化誘導法(浮遊培養と接着培養を組み合わせた方法)を用いて網膜細胞を分化誘導し解析する実験を行っている。山中研究室より供与された201B7細胞に加え、患者皮膚細胞を採取した皮膚細胞に山中4因子をレトロウイルスで導入することで樹立した患者の遺伝子異常を持ったiPS細胞でも、分化誘導をした。いくつかの液性因子を投与することで網膜細胞に分化誘導した培養において、ロドプシンなどの網膜の各細胞特異的マーカーを発現している細胞の生存を継時的に解析している。分化誘導の効率を上げるための条件検討を行いつつ、それぞれの条件下に繰り返し分化誘導を行い、再現性を取る実験も併せて行っている。生存細胞数に関しては、ガラス上で培養され網膜細胞特異的マーカーを用いて免疫細胞染色された網膜細胞を顕微鏡下に計測する方法を主に用いている。
本研究で、患者遺伝子異常を持つiPS細胞由来の網膜細胞を培養可能になることは、その遺伝子異常による病態の解析に必須であり、重要なステップである。遺伝子異常により、誘導された網膜細胞の生存に変化があるかどうか、どのようなメカニズムで細胞死がおこるのか、などについて、引き続き研究を進めることが今後の新規治療法の開発に向けて重要であり、それを遂行する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Vision preservation during retinal inflammation by anthocyanin-rich bilberry extract : cellular and molecular mechanism (2012)
  • 著者名/発表者名: Miyake S, Takahashi N, Sasaki M, Kobayashi S, Tsubota K, Ozawa Y
  • 雑誌名: Lab Invest 巻: 92(1) ページ: 102-9
  • DOI: doi:10.1038/labinvest.2011.132
  • 査読あり
• [雑誌論文] Usage of micronutrient supplement for preventing advanced Age-related Macular Degeneration in Japan (2012)
  • 著者名/発表者名: Sasaki M, Shinoda H, Koto T, Uchida A, Tsubota K, Ozawa Y
  • 雑誌名: Archives of Ophthalmology 巻: 130(2) ページ: 254-5
  • DOI: doi:10.1001/archopthalmol.2011.1368
  • 査読あり
• [雑誌論文] Neuroprotective Effects of Lutein in the Retina (2012)
  • 著者名/発表者名: Ozawa Y, Sasaki M, Takahashi N, Kamoshita M, Miyake S, Tsubota K
  • 雑誌名: Current Pharmaceutical Design 巻: 18(2) ページ: 51-6
  • DOI: doi:10.2174/138161212798919101
  • 査読あり
• [雑誌論文] The formation of an angiogenic astrocyte template is regulated by the neuroretina in a HIF-1-dependent manner (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakamura-Ishizu A, Kurihara T, Okuno Y, Ozawa Y, Kishi K, Goda N, Tsubota K, Okano H, Suda T, Kubota Y
  • 雑誌名: Dev Biol
  • DOI: doi:10.1016/j.ydbio.2011.12.027
  • 査読あり
• [雑誌論文] Roles of AMP-Activated Protein Kinase in Diabetes-Induced Retinal Inflammation (2011)
  • 著者名/発表者名: Kubota S, Ozawa Y, Kurihara T, Sasaki M, Yuki K, Miyake S, Noda K, Ishida S, Tsubota K
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci 巻: 52(12) ページ: 9142-8
  • DOI: doi:10.1167/iovs.11-8041
  • 査読あり
• [雑誌論文] Retinal ganglion cell loss in superoxide dismutase 1 deficiency (2011)
  • 著者名/発表者名: Yuki K, Ozawa Y, Yoshida T, Kurihara T, Hirasawa M, Ozeki N, Shiba D, Noda K, Ishida S, Tsubota K
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci 巻: 52(7) ページ: 4143-50
  • DOI: doi:10.1167/iovs.10-6294
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transcriptional factors associated with epithelial-mesenchymal transition in choroidal neovascularization (2011)
  • 著者名/発表者名: Hirasawa M, Noda K, Noda S, Suzuki M, Ozawa Y, Shinoda K, Inoue M, Ogawa Y, Tsubota K, Ishida S
  • 雑誌名: Mol Vis 巻: 17 ページ: 1222-30
  • URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3102030/?tool=pubmed
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinical findings in a choroideremia patient who underwent vitrectomy for retinal detachment associated with macular hole (2011)
  • 著者名/発表者名: Shinoda H, Koto T, Fujiki K, Murakami A, Tsubota K, Ozawa Y
  • 雑誌名: Jpn J Ophthalmol 巻: 55(2) ページ: 169-71
  • DOI: DOI:10.1007/s10384-010-0911-0
  • 査読あり
• [学会発表] Inflammatory Signals in the Pathogenesis of Diabetic Retinopathy (2011)
  • 著者名/発表者名: Yoko Ozawa
  • 学会等名: IOIS
  • 発表場所: Goa, India(招待講演)
  • 年月日: 2011-11-15
• [備考]
  • URL: http://www.keio-eye.net/research/rcb.html