CCN2結合性ペプチド・RNAアプタマーの開発と組織再生・疾患治療への応用

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21592360
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 機能系基礎歯科学
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 久保田 聡 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 准教授 (90221936)
• 研究分担者: 滝川 正春 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (20112063) ; 服部 高子 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (00228488) ; 西田 崇 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (30322233) ; 青山 絵理子 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (10432650)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• キーワード: 口腔生化学 / 細胞生物学 / 再生医工学

研究概要

CCN2は骨や軟骨組織を調和のとれた再生に導く分子であるとともに、様々な臓器の線維化病変に関与することが知られている。したがってCCN2の機能をコントロールすることには、再生医療や線維化疾患治療の観点から大きな意味がある。本研究ではこのCCN2に結合する小分子、アプタマーを設計・作成し、CCN2の分子機能の制御を試みた。その結果、軟骨組織の再生を促進するアプタマー、骨リモデリングを制御しうるアプタマーをそれぞれ開発することができた。

研究成果

• [雑誌論文] Role of low-density lipoprotein receptor related protein 1(LRP1) in CCN2/connective tissue growth factor(CTGF) protein transport in chondrocytes. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kawata., K., S. Kubota, T. Eguchi, E. Aoyama, N. Moritani, S. Kondo, T. Nishida and M. Takigawa
  • 雑誌名: J Cell Sci. 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] CCN2 and orofacial tissue development and remodeling. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kubota, S.
  • 雑誌名: Jpn. Dental Sci.
  • 査読あり
• [雑誌論文] The role of CCN2 in cartilage and bone development (2011)
  • 著者名/発表者名: Kubota, S., and M. Takigawa.
  • 雑誌名: J. Cell Commun. Signal. 巻: 5 ページ: 209-217
  • 査読あり
• [雑誌論文] Differential roles of CCN family proteins during osteoblast differentiation : involvement of Smad and MAPK signaling pathways (2011)
  • 著者名/発表者名: EKawaki, H., S. Kubota, A. Suzuki, M. Suzuki, K. Kohsaka, K. Hoshi, T. Fujii, N. Lazar, T. Ohgawara, T. Maeda, B. Perbal, T. Takano-Yamamoto and M. Takigawa.
  • 雑誌名: Bone 巻: 49 ページ: 975-989
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of CCN2 on FGF2-Induced Proliferation and MMP9 and MMP13 Productions by Chondrocytes (2011)
  • 著者名/発表者名: Nishida, T., S. Kubota, E. Aoyama, D. Janune, A. Maeda and M. Takigawa
  • 雑誌名: Endocrinology 巻: 152 ページ: 4232-4241
  • 査読あり
• [雑誌論文] Binding of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase to the cis-acting element of structure-anchored repression in ccn2 mRNA. (2011)
  • 著者名/発表者名: Kondo, S., S. Kubota, Y. Mukudai, T. Nishida, Y. Yoshihama, T. Shirota, S. Shintani and M. Takigawa
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 巻: 405 ページ: 382-387
  • 査読あり
• [雑誌論文] CCN family 2/connective tissue growth factor(CCN2/CTGF) promotes osteoclastogenesis via induction of and interaction with dendritic cell-specific transmembrane protein(DC-STAMP) (2011)
  • 著者名/発表者名: Nishida, T., K. Emura, S. Kubota, K. M. Lyons and M. Takigawa
  • 雑誌名: J Bone Miner Res. 巻: 26 ページ: 351-363
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mechanical stretch increases CCN2/CTGF expression in anterior cruciate ligament-derived cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Miyake, Y., T. Furumatsu, S. Kubota, K. Kawata, T. Ozaki and M. Takigawa.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun 巻: 409 ページ: 247-252
  • 査読あり
• [雑誌論文] Increases in p53 expression induce CTGF synthesis by mouse and human hepatocytes and result in liver fibrosis in mice (2011)
  • 著者名/発表者名: Kodama, T., S. Kubota(14番目), M. Takigawa(15番目: 18名略)
  • 雑誌名: J Clin Invest 巻: 121 ページ: 3343-3356
  • 査読あり
• [雑誌論文] Association of the metastatic phenotype with CCN family members among breast and oral cancer cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Ohgawara, T., S. Kubota, H. Kawaki, N. Kurio, T. Abd El Kader, M, Hoshijima, D. Janune, T. Shimo, B. Perbal, A. Sasaki and M. Takigawa
  • 雑誌名: J. Cell Commun. Signal 巻: 5 ページ: 291-299
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of miR-1 as a micro RNA that supports late-stage differentiation of growth cartilage cells (2010)
  • 著者名/発表者名: Sumiyoshi, K., S. Kubota, T. Ohgawara, K. Kawata, T. Nishida, T. Shimo, T. Yamashiro and M. Takigawa.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 巻: 402 ページ: 286-290
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nicotine-induced CCN2 : from smoking to periodontal fibrosis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Takeuchi, K., S. Kubota, E. Murakashi, Y. Zhou, K. Endo, P. S. Ng, M. Takigawa, and Y. Numabe.
  • 雑誌名: J. Dent. Res. 巻: 89 ページ: 34-39
  • 査読あり
• [雑誌論文] Thrombopoietic-mesenchymal interaction that may facilitate both endochondral ossification and platelet maturation via CCN2 (2010)
  • 著者名/発表者名: Sumiyoshi, K., S. Kubota, R. A. Furuta, K. Yasui, E. Aoyama, H. Kawaki, K. Kawata, T. Ohgawara, T. Yamashiro, and M. Takigawa
  • 雑誌名: J Cell Commun Signal. 巻: 4 ページ: 5-14
  • 査読あり
• [雑誌論文] Design and utility of CCN2 anchor peptide aptamers (2010)
  • 著者名/発表者名: Kawaki H, S. Kubota, E. Aoyama, N. Fujita, H. Hanagata, A. Miyauchi, K. Nakai and M. Takigawa
  • 雑誌名: Biochimie 巻: 92 ページ: 1010-1015
  • 査読あり
• [雑誌論文] N-terminal domains of CCN protein 2/connective tissue growth factor bind to aggrecan. (2009)
  • 著者名/発表者名: Aoyama E., T. Hattori, M. Hoshijima, D. Araki, T. Nishida, S. Kubota, and M. Takigawa
  • 雑誌名: Biochem. J. 巻: 420 ページ: 413-420
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of TGF-β1 on CCN2/CTGF in normal human gingival fibroblasts and periodontal ligament cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Takeuchi, H., S. Kubota, E. Murakashi, T. Fukada, S. Hashimoto, M. Takigawa and Y. Numabe
  • 雑誌名: J. Perio. Res. 巻: 44 ページ: 161-169
  • 査読あり
• [学会発表] CCN2 promotes osteoclastogenesis via induction of and interaction with DC-STAMP and by enhancing RANKL signaling via interaction with RANK and osteoprotegerin (2011)
  • 著者名/発表者名: Nishida, T.
  • 学会等名: Cell Signaling Networks 2011 : the 13th IUBMB Conference, the 1st PABMB Conference and the 3rd Meetings of the Signal Transduction Branch & Oxidative Stress Branches of SMB
  • 発表場所: Merida、Mexico
  • 年月日: 20111022-27
• [学会発表] Role of CCN2 in the remodeling of periodontal tissue upon nicotine exposure. Novel targets for cancer and connective tissue diseases (2011)
  • 著者名/発表者名: Kubota, S.
  • 学会等名: A meeting sponsored by the International CCN Society
  • 発表場所: Vancouver、Canada
  • 年月日: 20110924-27
• [学会発表] RANK結合タンパク質CCN2/CTGFはRANK-RANKLシグナルを促進する (2011)
  • 著者名/発表者名: 青山絵理子
  • 学会等名: 第29回骨代謝学会学術集会
  • 発表場所: 大阪市
  • 年月日: 20110728-30
• [学会発表] The role of CCN2/CTGF binding to receptor activator of NF-κB(RANK) in the RANK-RANK ligand system (2010)
  • 著者名/発表者名: Aoyama, E.
  • 学会等名: BMB2010(第83回日本生化学会大会、第33回日本分子生物学会年会)
  • 発表場所: 神戸市
  • 年月日: 20101207-10
• [学会発表] CCN2/CTGF binds to fibroblast growth factor receptor 2 and modulates its signaling (2010)
  • 著者名/発表者名: Aoyama, E
  • 学会等名: Sixth International Workshop on the CCN Family of Genes
  • 発表場所: Newcastle、Northern Ireland
  • 年月日: 20101020-24
• [学会発表] Screening of CCN2-binding peptides and its scientific utility (2010)
  • 著者名/発表者名: Kubota, S.
  • 学会等名: Sixth International Workshop on the CCN Family of Genes
  • 発表場所: Newcastle、Northern Ireland
  • 年月日: 20101020-24
• [学会発表] CCN family 2/connective tissue growth factor(CCN2/CTGF) promotes osteoclastogenesis via interaction with dendritic cell-specific transmembrane protein(DC-STAMP) (2009)
  • 著者名/発表者名: Nishida, T
  • 学会等名: The 31st Annual Meeting of the American Society for Bone and Mineral Research
  • 発表場所: Denver、USA
  • 年月日: 20090911-15
• [学会発表] CCNファミリー遺伝子の転写後制御とその生物学的意義 (2009)
  • 著者名/発表者名: 久保田聡
  • 学会等名: 第3回日本CCNファミリー研究会シンポジウム
  • 発表場所: 岡山市
  • 年月日: 20090828-29
• [学会発表] CCN family proteins and micro RNAs : Extracellular and intracellular conductors of molecular networks (2009)
  • 著者名/発表者名: Kubota, S.
  • 学会等名: The Second International Symposium of Medical and Dental Education in Okayama
  • 発表場所: 岡山市
  • 年月日: 20090517-18
• [学会発表] 遺伝子発現の転写後調節の重要性:組織再生因子CCN2の場合 (2009)
  • 著者名/発表者名: 久保田聡
  • 学会等名: 岡山大学大学院医歯薬学総合研究科機能再生・再建科学専攻主催ミニシンポジウム
  • 発表場所: 岡山市
  • 年月日: 2009-08-11
• [図書] In : Encyclopedia of Signaling Molecules(Sangdun Choi ed) (2012)
  • 著者名/発表者名: Kubota, S. and M. Takigawa
  • 出版者: Springer
• [図書] Nucleophosmin/B23 : A multifunctional regulator that determines the fate of ccn2 mRNA. In : CCN Proteins in Health and Disease(A. Perbal, M. Takigawa & B. Perbal eds) (2010)
  • 著者名/発表者名: Kubota, S., Y. Mukudai, H. Kawaki, S. Kondo, T. Eguchi, K. Sumiyoshi, T. Ohgawara, T. Shimo and M. Takigawa
  • 総ページ数: 41-55
  • 出版者: Springer
• [図書] Novel transcriptional regulation of CCN2/CTGF by nuclear translocation of MMP3. In : CCN Proteins in Health and Disease(A. Perbal, M. Takigawa & B. Perbal eds) (2010)
  • 著者名/発表者名: Eguchi, T., S. Kubota, K. Kawata, Y. Mukudai, J. Uehara, T. Ohgawara, S. Ibaragi, A. Sasaki, T. Kuboki and M. Takigawa
  • 総ページ数: 255-264
  • 出版者: Springer
• [図書] Cooperative regulation of cell proliferation and differentiation by CCN2 and CCN3. In : CCN Proteins in Health and Disease(A. Perbal, M. Takigawa & B. Perbal eds) (2010)
  • 著者名/発表者名: Takigawa, M., H. Kawaki, S. Kubota, K. M. Lyons and B. Perbal
  • 総ページ数: 105-109
  • 出版者: Springer