| 研究概要 |
骨代謝制御における新規分子PRIPの役割解明を目的として,2年目は以下の解析を行い結果を得た。
・下垂体前葉細胞において、受容体へのGnRHの結合か引き起こすシクナル伝達から性腺刺激ホルモン(LH,FSH)の分泌に至るまでの過程で、PRIPがどのステップに機能しているかを検討した。
下垂体前葉から精製されたRNAおよび蛋白質を用いた性腺刺激ホルモンのqRT-PCRおよび蛋白質量測定を行ったところ、転写レベルでのLH、FSH量は、野生型およびPRIP-KOマウス間で差はなく、蛋白質レベルで下垂体前葉内に残る性腺刺激ホルモン量に差があることが分かった。つまり、野生型およびPRIP-KOマウスにおいてホルモンが同等量発現しているにも関わらず分泌量に差があるということで、細胞内でホルモン産生後分泌に至る過程でPRIPの有無が影響していることが示唆された。
・大腿骨を用いたμCTによる解析において、野生型に比べPRIP-KOマウスで骨量増加が見られたので、生殖系ホルモンの影響を受けて生じた差なのかどうかを調べるために、卵巣摘出マウスを作製して骨量を測定した。その結果、ノックアウトマウスでは、卵巣を摘出しても骨量の減少が野生型ほど見られなかった。つまり、PRIP-KOマウスにおける骨量増加は、生殖系ホルモンが関与しない別の制御機構によるものと考えられた。
・カルセイン2重標識による骨形成能の解析を行ったところ、PRIP-KOマウスにおいて骨形成速度の増加が見られた。
これらのことから、PRIPは骨代謝の中でも特に骨形成制御においてより機能していることが示唆された。
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