顎骨再生に向けたPTHとCOX-2の骨形成相互の解明

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21592513
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 近津 大地 東京大学, 医学部附属病院, 特任講師 (30343122)
• 研究分担者: 矢野 文子 東京大学, 医学部附属病院, 特任助教 (80529040) ; 緒方 直史 東京大学, 医学部附属病院, 特任助教 (10361495)
• キーワード: PTH / COX-2

研究概要

【効率的な骨形成のためのPTH・COX-2シグナルの検討】
PTHの骨形成促進作用メカニズムを明らかとする目的で、我々が確立したPTHの骨形成促進作用が認められる骨芽細胞様細胞株であるMC3T3-E1細胞およびMC-4細胞培養系を用いてPTHシグナルの下流にある転写因子COX-2の解析を行った。具体的には、MC3T3-E1細胞およびMC-4細胞培養系にCOX-2のプロモーター領域の様々なbinding site COX-2 DNA mutationを強制発現させ、PTHによるルシフェラーゼ活性を測定することにより、PTHによるCOX-2誘導に必須のpotential cis-acting siteを検索した。また、mRNA、タンパクレベルでの解析をReal-time(Quantitative)PCRおよびWestern blotで検討した。更に、PTH刺激を加えたMC3T3-E1細胞およびMC-4細胞培養系から核タンパクを抽出してゲルシフトアッセイを行い、PTHによるCOX-2誘導のpotential cis-acting siteを検討した。その結果、骨芽細胞様細胞株においてPTHによるCOX-2の発現誘導には、calcium-calcineurin-NFAT signaling pathwayが重要であることが分かった。

研究成果

• [雑誌論文] Evaluation of 15 mandibular reconstructions with Dumbach Titan Mesh-System and particulate cancellous bone and marrow harvested from bilateral poster for ilia (2009)
  • 著者名/発表者名: Iino M, Fukuda M, Nagai H, Hamada Y, Yamada H, Nakaoka K, Mori Y, Chikazu D, Saijo H, Seto I, Ohkubo K, Takato T
  • 雑誌名: Oral Surg.Oral Med.Oral Pathol.Oral Radiol.Endod. 107 ページ: 1-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transforming growth factor-β1 in combination with fibroblast growth factor-2 and insulin-like growth factor-I for chondrocyte proliferation culture and cartilage regenerative medicine (2009)
  • 著者名/発表者名: Ogasawara T, Ohba S, Fujihara Y, Takahashi T, Liu G, Chikazu D, Suenaga H, Chung U, Yoda T, Mori Y, Susami T, Takato T, Hoshi K
  • 雑誌名: Asian.J.Oral.Maxillofac.Surg. 21 ページ: 18-26
  • 査読あり
• [学会発表] Cyclooxygenase-2は膜性骨の骨折治癒におけるkey factorである (2009)
  • 著者名/発表者名: 近津大地、藤川由美子、末永英之、杉山円、古賀陽子、阿部雅修、西條英人、森良之、飯野光喜、高戸毅
  • 学会等名: 第54回日本口腔外科学会総会
  • 年月日: 20091009-11
• [学会発表] Cyclooxygenase-2 Activity is important for Membrane Bone Fracture Healing (2009)
  • 著者名/発表者名: Chikazu D, Fujikawa Y, Ogata N, Yano F, Ogasawara T, Saijo H, Mori Y, Iino M, Takato T
  • 学会等名: 31th ASBMR Annual Meeting
  • 発表場所: Montreal, Quebec, Canada
  • 年月日: 20090911-20090915
• [学会発表] Regulator of G Protein Signaling(RGS)-2 Enhances Bone Anabolic Action of PTH through Inhibition of Gαq/PKC Pathway in Osteoblasts (2009)
  • 著者名/発表者名: Ogata N, Yano F, Chikazu D, Chung U, Nakamura K, Kawaguchi H
  • 学会等名: 31th ASBMR Annual Meeting
  • 発表場所: Montreal, Quebec, Canada
  • 年月日: 20090911-20090915