| 研究課題/領域番号 |
21592570
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| 研究機関 | 岐阜大学 |
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研究代表者 |
牧田 浩樹 岐阜大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (50345790)
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| 研究分担者 |
加藤 恵三 岐阜大学, 医学部附属病院, 講師 (40397336)
米本 和弘 岐阜大学, 医学部附属病院, 助教 (80422731)
柴田 敏之 岐阜大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (50226172)
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| キーワード | ラット / 4NQO / 発癌 / メチル化 / 舌 |
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| 研究概要 |
本研究は4NQO誘発ラット舌発癌モデルを用いて、病変発症前から前癌病変(軽度異型粘膜～高度異型粘膜)、癌(早期癌、浸潤癌)までの組織を採取し、ヒト口腔癌でDNAメチル化異常が報告されているさまざまな癌抑制遺伝子のプロモーター領域のDNAメチル化異常を詳細に解析し、この口腔発癌モデルの発癌過程の分子生物学的変化を明らかにすることを目的としている。
【材料と法法】F344ラットに8週間20ppmの4-NQOを飲水投与し、投与開始から2、4、6、8、10、12、20、32週後に舌組織を採取し、病理組織学的検索と遺伝子学的検索を行った。病変(前癌病変～扁平上皮癌)と舌正常上皮から抽出したDNAは、バイサルファイト処理後、メチル化異常の解析をmethylation-specific PCR (MSP)法とリアルタイムMSP法で行った。さらに、正常組織と病変のマイクロサテライト不安定性を検索した。【結果】前年度の研究でMSP法とリアルタイムMSP法において、4NQO投与開始から20週以降の前癌病変、扁平上皮癌において、p16のメチル化が検出されたが、p15、E-cadherin、MLH1、RASSF1Aでは、検出さなかった。今年度はさらにMGMT、RARbetaについてプライマーを作成しMSP法を行ったが、メチル化は検出されなかった。また、各病変において5つの領域のマイクロサテライト不安定性を検索したが、不安定性は検出されなかった。【結論】4NQO誘発ラット舌癌モデルでは、前癌病変やその周囲組織のp16癌抑制遺伝子のプロモーター領域のメチル化による発癌への関与が示唆されたが、他の癌抑制遺伝子の関与は認められなかった。今後、ヒストン修飾の関与について検討し、この口腔発癌モデルの分子生物学的解明を進めたい。
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