| 研究概要 |
FGF受容体(FGFR)には1～4型の4種類のホモログが存在し、選択的スプライシングによる数多くのアイソフォームが同定されている。Fgfr遺伝子の突然変異が、ヒトでは軟骨無形成症やクルーゾン症候群、アペール症候群、ジャクソン・ワイス症候群など、頭蓋骨間の縫合の早期癒合を引き起こすことから、FGFRは軟骨形成、頭蓋顔面の骨格形成において重要な役割を果たしていると考えられている。胎生期の顔面領域では、これらのFgfr遺伝子が時間的・空間的に特徴的な発現パターンを示すことが知られており、個々のFGF受容体とリガンドであるFGFとがそれぞれに特徴的な空間的発現パターンを有することでFGFシグナル伝達系が領域特異的な組織分化の制御に貢献し、顎顔面骨格のかたちや大きさの決定に重要な役割を果たしているものと考えられる。本研究では、FGF受容体による胎生期下顎の三次元的パターン形成のメカニズムの解明を目的として、ラット下顎器官培養系とRNA干渉により、Fgfr遺伝子発現をノックダウンし、骨格組織の形態形成のメカニズムを解明する。Fgfr遺伝子発現のノックダウンに先立ち、Fgfr1,Fgfr2,Fgfr3遺伝子のwhole mount in situ hybridizationを行うことにより、ラット胎仔下顎隆起における各々のFgfr遺伝子の発現パターンを確認した。続いて、RNA干渉に用いるshRNA用ベクターの構築を行った。現在、培養細胞にこのshRNAベクターを導入し、RNA抽出後にcDNAを作成し、Real time RT-PCRによりノックダウンの確認を行っている。さらに、エレクトロポレーション法を用いて下顎隆起の器官培養系への適応を行う予定である。
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