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2011 年度 実績報告書

セルロース糖化を促進するタンパク質の開発

研究課題

研究課題/領域番号 21612009
研究機関公益財団法人岩手生物工学研究センター

研究代表者

竹田 匠  財団法人岩手生物工学研究センター, 生物資源研究部, 主任研究員 (80423036)

キーワード糖化 / セルロース / タンパク質生産 / エクスパンシン / グルカナーゼ
研究概要

植物細胞壁の主成分であるセルロースは、互いのセルロース繊維が水素結合により強固に結合しているため、酵素による加水分解が困難である。セルロースを加水分解し、効率的にグルコースを得るには優良な加水分解酵素やエクスパンシンの様な加水分解酵素の作用を促進するタンパク質を利用することが望ましいと考えられた。そこで、セルロース分解を促進するカタツムリ由来のタンパク質や加水分解酵素を異種発現系により調製し、これらのタンパク質によるセルロース分解への効果を検討することとした。カタツムリ由来のタンパク質はベンサミアーナ(植物)や麹菌のタンパク質発現系を用いることにより、タンパク質の作製に成功した。また、いもち病菌由来のセロビオヒドロラーゼとβ-グルコシダーゼは麹菌において生産することに成功した。さらにトリコデルマ由来のエンドグルカナーゼは枯草菌において生産することに成功した。作製したそれぞれの加水分解酵素にカタツムリ由来タンパク質を加え、セルロース分解への効果を調べたところ、カタツムリ由来のタンパク質はエンドグルカナーゼの分解作用を促進したが、セロビオヒドロラーゼやβ-グルコシダーゼの分解作用を促進しなかった。一方、カタツムリ由来タンパク質によるエクスパンシン活性(植物組織の伸展性を増加する効果)は認められなかった。次にこれら3種類の加水分解酵素を混合し、セルロースからのグルコース生産を調べた結果、カタツムリ由来タンパク質を添加することによりグルコース生産量が大幅に増加した。これらの結果から、エンドグルカナーゼの作用がカタツムリ由来タンパク質により促進され、その効果により生じたセルロースの分解産物を効率的にセロビオヒドロラーゼやβ-グルコシダーゼが分解するため、最終産物であるグルコース生産量が増加したと推察された。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2012 2011

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (1件) 図書 (2件)

  • [雑誌論文] Identification, cloning, and characterization of beta-glucosidase from Ustilago esculenta2012

    • 著者名/発表者名
      Nakajima M, Yamashita T, Takahashi M, Nakano Y, Takeda T
    • 雑誌名

      Applied Microbiology Biotechnology

      巻: 93 ページ: 1989-1998

    • DOI

      10.1007/s00253-011-3538-2

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Polyhistidine affinity chromatography for purification and biochemical analysis of fungal cell wall-degrading enzymes2012

    • 著者名/発表者名
      Takeda T
    • 雑誌名

      Intech

      ページ: 177-186

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Biochemical characterization of Magnaporthe oryzae β-glucosidases for efficient β-glucan hydrolysis2011

    • 著者名/発表者名
      Takahashi M, Konishi T, Takeda T
    • 雑誌名

      Applied Microbiology and Biotechnology

      巻: 91 ページ: 1073-1082

    • DOI

      10.1007/s00253-011-3340-1

    • 査読あり
  • [学会発表] イネいもち病菌に由来するβ-グルコシダーゼの機能解析と効率的な利用について2011

    • 著者名/発表者名
      高橋真智子、小西照子、竹田匠
    • 学会等名
      日本応用糖質科学会
    • 発表場所
      北海道大学
    • 年月日
      2011-09-28
  • [図書] セルロース膨潤タンパク質(バイオマス分解酵素研究の最前線-セルラーゼ・ヘミセルラーゼを中心として-)2012

    • 著者名/発表者名
      竹田匠
    • 総ページ数
      6
    • 出版者
      シーエムシー出版
  • [図書] 植物由来の細胞壁分解酵素(バイオマス分解酵素研究の最前線-セルラーゼ・ヘミセルラーゼを中心として-)2012

    • 著者名/発表者名
      小西照子、竹田匠
    • 総ページ数
      5
    • 出版者
      シーエムシー出版

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公開日: 2013-06-26  

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