染色体遺伝子へ影響を与えない全く新しい遺伝子操作マウス創出技術の確立

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21659097
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 米満 吉和 千葉大学, 大学院・医学研究院, 客員教授 (40315065)
• 研究分担者: 野村 政壽 九州大学, 医学研究院, 講師 (30315080)
• キーワード: センダイウイルスベクター / 遺伝子操作マウス / RNAヘリカーゼ

研究概要

本年度は、rSeVを用いた遺伝子操作マウス作成技術の最適化を主として検討した。
1)使用するベクターシステムの最適化
本年度の研究から、ES細胞への感染後正常に分化し、最終的に個体発生に至るためには、野生型ウイルスや付加型ベクターでは不可能であり、
(1)ts-rSeV/dF(温度感受性変異挿入+F遺伝子欠損型ベクター:ベクター構築時に32℃にてM/HN遺伝子が発現し、体温に近い37℃にてM/HN遺伝子発現が著減する)
(2)rSeV/dFdMdHN(ウイルス膜を構成する膜蛋白遺伝子全てを欠損する)の新しい2種のベクターでのみ可能であることが判った
本年度は、rSeVを用いた遺伝子操作マウス作成技術の最適化を主として検討した。
(3)薬剤耐性遺伝子によるマウス構築効率の最適化
薬剤耐性遺伝子(neomycin^r、puromycin N-acetyltransferase(Pac))を持つベクター(ts-rSeV/dFneo、rSeV/dFdMdHNneo、ts-rSeV/dFpac、rSeV/dFdMdHNpac)の構築を進めた。
2)RNAヘリカーゼノックダウンベクターの構築
これまでの検討ではRIG-Iのdominant-negative変異体(RIG-IC)をrSeVにて発現させることにより個体発生まで至ることを見出した。このRIG-ICの必要性について、特に長期生存時における表現型の修飾について検討を進めている。

研究成果

• [雑誌論文] Carbon ion beam treatment induces systemic antitumor immunity against murine squamous cell carcinoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Matsunaga A, et al
  • 雑誌名: Cancer (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] An autocrine linkage between matrix metalloproteinase-14 and Tie-2 via ectodomain shedding modulates angiopoietin-1 dependent function in endothelial cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Onimaru M, et al
  • 雑誌名: Arterioscler Thromb Vasc Biol 30 ページ: 818-26
  • 査読あり
• [雑誌論文] 多発内臓動脈瘤に対する一手術例 (2010)
  • 著者名/発表者名: 諸富洋介, 他
  • 雑誌名: 日本血管外科学会雑誌 19 ページ: 17-21
  • 査読あり
• [雑誌論文] Complete elimination of established neuroblastoma by synergistic action of γ-irradiation and DCs treated with rSeV expressing interferon-β gene. (2009)
  • 著者名/発表者名: Tatsuta K, et al
  • 雑誌名: Gene Therapy 16 ページ: 240-251
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of optimized and urokinase-targeted oncolytic Sendai virus vectors applicable for various human malignancies. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kinoh H, et al
  • 雑誌名: Gene Therapy 16 ページ: 392-403
  • 査読あり
• [雑誌論文] Suppression of Sproutys has a therapeutic effect for a mouse model of ischemia by enhancing angiogenesis. (2009)
  • 著者名/発表者名: Taniguchi K, et al
  • 雑誌名: PLoS ONE 4 ページ: e5467
  • 査読あり
• [雑誌論文] Stable retinal gene expression in nonhuman primates via subretinal injection of SIVagm-based lentiviral vectors. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ikeda Y, et al
  • 雑誌名: Human Gene Therapy 20 ページ: 573-579
  • 査読あり
• [雑誌論文] Acute safety study of simian immunodeficiency virus from African green monkey(SIVagm)-based lentiviral vector for retinal gene transfer in nonhuman primates. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ikeda Y, et al
  • 雑誌名: Human Gene Therapy 20 ページ: 943-954
  • 査読あり
• [雑誌論文] Autocrine loop between VEGF-C and VEGF receptor-3 positively regulates tumor-associated lymphangiogenesis in oral squamoid cancer cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: Matsuura M, et al
  • 雑誌名: The American Journal of Pathology 175 ページ: 1709-1721
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sustained and NK/CD4^+T-cell-dependent efficient prevention of lung metastasis induced by dendritic cells harboring recombinant Sendai virus. (2009)
  • 著者名/発表者名: Komaru A, et al
  • 雑誌名: The Journal of Immunology 183 ページ: 4211-4219
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient protective immunity against Trypanosoma cruzi infection after nasal vaccination with recombinant Sendai virus vector expressing amastigote surface protein-2. (2009)
  • 著者名/発表者名: Duan X, et al
  • 雑誌名: Vaccine 27 ページ: 6154-6159
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cytokine-based log-scale expansion of functional murine dendritic cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: Harada Y, et al
  • 雑誌名: PLoS ONE 4 ページ: e6674
  • 査読あり
• [雑誌論文] VEGF-C regulates lymphangiogenesis and capillary stability by regulation of PDGF-B. (2009)
  • 著者名/発表者名: Onimaru M, et al
  • 雑誌名: Am J Physiol, Heart Circ Physiol 297 ページ: H1685-1696
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibition of choroidal neovascularization via brief subretinal exposure to a newly developed lentiviral vector pseudotyped with Sendai virus envelope proteins. (2009)
  • 著者名/発表者名: Murakami Y, et al
  • 雑誌名: Human Gene Therapy 21 ページ: 199-209
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sendai Virus for cancer immunotherapy. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ueda Y, et al
  • 雑誌名: Methods in Molecular Biology 515 ページ: 1-10
• [雑誌論文] Angiogenesis : Complexity of Tumor Vasculature and Microenvironment(review) (2009)
  • 著者名/発表者名: Furuya M, et al
  • 雑誌名: Current Pharmaceutical Design 15 ページ: 1854-1867
  • 査読あり
• [雑誌論文] 臨時増刊「病理学と社会」第3部 社会における病理学<新しい治療> 11.遺伝子治療と病理学 (2009)
  • 著者名/発表者名: 米満吉和, 他
  • 雑誌名: 病理と臨床 27 ページ: 368-375
• [雑誌論文] 特集「血管の発生・再生」各論:血管再生における遺伝子治療の新たな展開 (2009)
  • 著者名/発表者名: 久良木亮一, 他
  • 雑誌名: 細胞「The Cell」 41 ページ: 532-535
• [雑誌論文] 慢性重症虚血肢に対するFGF-2遺伝子搭載センダイウィルスベクターを用いた新規血管新生遺伝子治療臨床研究:中間報告
  • 著者名/発表者名: 伊東啓行, 他
  • 雑誌名: 脈管学J Jpn Coll Angiol (印刷中)
• [雑誌論文] 特集「感染症と血管疾患」:血管疾患とサイトメガロウイルス感染
  • 著者名/発表者名: 米満吉和
  • 雑誌名: Angiology Frontier (印刷中)
• [雑誌論文] (座談会)再生医療・遺伝子治療
  • 著者名/発表者名: 森下竜一, 他
  • 雑誌名: 分子心血管病 (印刷中)
• [学会発表] がん細胞免疫療法の治療成績向上のための要素技術開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 米満吉和
  • 学会等名: 日本薬学会第130年会
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 20100328-20100330
• [学会発表] 機能的血管再生のメカニズムとその治療への展開 (2010)
  • 著者名/発表者名: 米満吉和
  • 学会等名: 第99回日本病理学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-04-28
• [学会発表] 遺伝子治療について (2010)
  • 著者名/発表者名: 米満吉和
  • 学会等名: 九州大学病院高度先端医療センター市民公開講座
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2010-02-27
• [学会発表] 次世代バイオ創薬技術の創成:センダイウイルスの新たな挑戦 (2010)
  • 著者名/発表者名: 米満吉和
  • 学会等名: 関西眼科先進医療研究会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2010-02-24
• [学会発表] センダイウイルス組換え技術によるRNAバイオ医療の創成 (2009)
  • 著者名/発表者名: 米満吉和
  • 学会等名: 九州大学薬学研究院システム創薬リサーチコア研究会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2009-09-10
• [学会発表] 血管新生療法の現況と将来 (2009)
  • 著者名/発表者名: 米満吉和
  • 学会等名: 地域医師のための生涯研修セミナー
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2009-08-08
• [学会発表] センダイウイルス組換え技術を基盤としたバイオ医薬品開発戦略-update (2009)
  • 著者名/発表者名: 米満吉和
  • 学会等名: 福岡循環器セミナー
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2009-03-09
• [学会発表] センダイウイルス組換え技術による革新的バイオ医療技術の開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 米満吉和
  • 学会等名: 次世代医療システム産業化フォーラム
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2009-03-02
• [学会発表] 国産バイカプラットフォーム技術によるトランスレーショナルリサーチの推進 (2009)
  • 著者名/発表者名: 米満吉和
  • 学会等名: 眼科分子生物学研究会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2009-01-31
• [学会発表] 慢性動脈閉塞症に対する「夢?」の遺伝子治療 市民公開講座「足の血管が詰まる病気は大変だ!」 (2009)
  • 著者名/発表者名: 米満吉和
  • 学会等名: 厚生科学研究推進事業 研究成果普及啓発事業
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2009-01-10
• [図書] Methods in Molecular Biology : Viral Applications of the GFP(Ed.by Hicks BW) (2009)
  • 著者名/発表者名: Ueda Y, et al
  • 総ページ数: 12
  • 出版者: Humana Press.U.S.A
• [産業財産権] ヒト由来FLT-1を含むSeVベクターからなる樹状細胞 (2009)
  • 発明者名: 米満吉和, 他
  • 権利者名: 九州大学、ディナベック株式会社
  • 産業財産権番号: 特願2009-119333
  • 出願年月日: 2009-05-15
• [産業財産権] トロポニン含有医薬組成物 (2009)
  • 発明者名: 米満吉和, 他
  • 権利者名: 九州大学
  • 産業財産権番号: 特願2009-165881
  • 出願年月日: 2009-07-14
• [産業財産権] 染色体非組み込み型ウイルスベクターを用いてリプログラムされた細胞を製造する方法 (2009)
  • 発明者名: 米満吉和, 他
  • 権利者名: ディナベック株式会社
  • 産業財産権番号: WO/2010/008054
  • 出願年月日: 2009-07-16